(1)欲培养细菌必须先制备可供细菌生长的培养基。实验室中常用牛肉膏蛋白胨固体培养基来培养微生物，该培养基的组成成分包括牛肉膏、蛋白胨、NaCl________、H₂O等；该培养基中微生物所需的氮源来自________，制备该培养基的步骤是：计算→称量→溶化→灭菌→倒平板，其中灭菌常用的方法是_______________________________________________；培养基灭菌后，需要冷却到________ ℃左右才能倒平板，等平板冷凝后，还需要将平板倒置，主要目的是___________________________________________________________________________。

(2)为了使实验更有说服力，某同学设置空白对照组和若干实验组，其中对照组的作用是____________________________________________________。若在某次调查中，某一实验组平板上的平均菌落数为39个，而空白对照组的平板上出现了9个菌落，这种结果说明在此次调查中出现了________现象。

(3)某同学利用稀释涂布平板法来统计样品中细菌的数目，统计结果往往比实际细菌的数目要低，主要原因是：_________________________________。

土壤中含有大量的难溶性磷酸盐，为了从土壤中筛选出能够将难溶性磷酸盐转化为植物能吸收的可溶性磷的优良解磷菌株，以便将其添加到有机肥中，改善植物磷元素供应。科研人员进行如下实验：

实验原理：固体培养基中难溶性磷酸盐在微生物的作用下溶解，会在菌落周围形成透明圈(如右图)，透明圈直径(D)与菌落直径(d)的比值( D/d)代表微生物溶解磷的能力大小。

实验步骤：

步骤1　取某地区土样5 g制得土壤溶液后稀释，取稀释液1 mL接种到基础培养基A上，在适宜温度下培养72 h。

步骤2　在基础培养基A上用接种环挑取代表性菌落再次接种，培养3～4 d后观察菌落特征和透明圈的大小，初步筛选出三种优良解磷菌株(如下表)。

分析回答：

(1)从物理形态看，培养基A属于________培养基。培养基中磷源应该是________。

(2)步骤1中接种方法是________，步骤2中接种环的灭菌方法是________。

(3)根据实验结果可以确定溶解磷能力最强的菌株是________。

(4)为进一步测定初步筛选的三种菌株实际溶解磷的能力，研究人员将它们接种到基础培养基B中，并在37℃、200 r·min^－1摇床培养，定期取上清液，测定溶液中可溶性磷含量，得到如图所示曲线。  

①用摇床进行培养的好处是__________________。

②结果表明最优良的解磷菌株是________。

(一)有些细菌可分解原油，从而消除由原油泄漏造成的土壤污染。某同学欲从受原油污染的土壤中筛选出能高效降解原油的菌株。回答问题。

(1)在筛选过程中，应将土壤样品稀释液接种于以________为唯一碳源的固体培养基上，从功能上讲，该培养基属于________培养基。

(2)纯化菌种时，为了得到单菌落，常采用的接种方法有两种，即________和________。

(3)筛选高效菌株时，可比较单菌落周围________________，____________说明该菌株的降解能力________。

(4)细菌种群进化过程中，其主要作用的变异来源是_________________。

(二)富集培养是微生物学中的最强有力的技术手段之一。主要是利用不同微生物生命活动特点的不同，制定环境条件，使仅适应该条件的微生物旺盛生长，从而使其数量大大增加。下图描述了采用富集方法从土壤中分离能降解酚类化合物——对羟基苯甲酸的微生物的实验过程。请分析回答下列问题。

(1)①→③重复培养的目的是_____________________________。

(2)⑤的菌落中大部分是降解________微生物。设置⑥的目______________。

(3)⑤→⑥采用单细胞挑取法，将所选菌种接种到⑥的培养基中，在此操作过程中如何防止杂菌污染(至少写出两点)。_____________________________________________________。

（1）像其他微生物一样，酵母需要适当的营养和合适的环境条件，培养时培养液中的营养物质主要有                     等。(要求回答4种营养物质)

（2）当酵母繁殖时，没有糖转化为酒精，此时酵母菌为                 呼吸．

（3）从含有酵母菌、醋酸菌、蓝藻的培养液中分离出酵母菌，最简单的培养方法是：在              并且                条件下进行培养．

（4）葡萄酒制作是否成功，发酵后需用             来鉴定，在             条件下，该物质与酒精反应呈现            色。

（5）为筛选和纯化酵母菌，根据用途应选用                   培养基，常用的接种方法                和                 ．扩大培养过程中需要对酵母菌进行计数，取0.2mL样品，用固体培养基对其培养，最后统计了三个平板，菌落数分别是200、180、220．则样品中微生物的数量为               个/mL．该统计结果             （低于、高于）实际值。

(1)制备土壤浸出液时，为避免菌体浓度过高，需将浸出液进行________处理。

(2)要从长期使用该除草剂的土壤中分离目的菌，上述培养皿中培养基的特点是：固体培养基________________。若需要调节培养基pH，应该在各种成分都溶化后且分装________(填“前”或“后”)进行。对培养基进行灭菌，常采用的方法是________。

(3)培养后发现，只有很少菌落出现，大部分细菌在此培养基上不能生长的主要原因是________________或有氧条件抑制了这些细菌的生长。

(4)在固体培养基上形成的菌落中，无透明带菌落利用的氮源主要是________，有透明带菌落利用的氮源主要是________，据此可筛选出目的菌。

(5)若要统计某土壤样品中该活菌数目，宜采用__________________法。

①测定该菌数时，在对应稀释倍数为10⁶的培养基中，得到以下几种统计结果，正确可信的是____________，理由是_______________________________________。

A．一个平板，统计的菌落数是230

B．两个平板，统计的菌落数是220和260，取平均值240

C．三个平板，统计的菌落数分别是210、50和520，取平均值260

D．四个平板，统计的菌落数分别是210、300、240和250，取平均值250

②一同学在稀释倍数为10⁵的培养基中测得平板上菌落数的平均值为234，那么每毫升样品中的菌落数是__________个(涂布平板时所用稀释液的体积为0.1 mL)。

③用这种方法测定的大肠杆菌菌落数比实际活菌数量_________，因为_________________                                      _。（2分）

（1）过程①加入了微生物，其作用是把秸秆颗粒分解。从土壤中获取①所需微生物的过程称为微生物的_________，选择培养基应以__________为唯一碳源。纯化菌种时，将筛选获得的菌液用______________法或______________法接种到培养基上。

（2）酒精发酵阶段接种的微生物是             ，生产酒精要控制的必要条件是             。

（3）在培养微生物的过程中，对培养基和接种环采用的灭菌方法分别是___________（1分）、________________（1分）。