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            • 1． 嗜热土壤芽胞杆菌产生的β-葡萄糖苷酶（BglB）是一种耐热纤维素酶，为使其在工业生产中更好地应用，开展了以下试验：
              Ⅰ．利用大肠杆菌表达BglB酶
              （1）PCR扩增bglB基因时，选用 ______ 基因组DNA作模板．
              （2）图1为质粒限制酶酶切图谱．bglB基因不含图中限制酶识别序列．为使PCR扩增的bglB基因重组进该质粒，扩增的bglB基因两端需分别引入 ______ 和 ______ 不同限制酶的识别序列．
              （3）大肠杆菌不能降解纤维素，但转入上述建构好的表达载体后则获得了降解纤维素的能力，这是因为 ______ ．
              Ⅱ．温度对BglB酶活性的影响

              （4）据图2、3可知，80℃保温30分钟后，BglB酶会 ______ ；为高效利用BglB酶降解纤维素，反应温度最好控制在 ______ （单选）．
              A.50℃B.60℃C.70℃D.80℃
              Ⅲ．利用分子育种技术提高BglB酶的热稳定性
              在PCR扩增bglB基因的过程中，加入诱变剂可提高bglB基因的突变率．经过筛选，可获得能表达出热稳定性高的BglB酶的基因．
              （5）与用诱变剂直接处理嗜热土壤芽胞杆菌相比，上述育种技术获得热稳定性高的BglB酶基因的效率更高，其原因是在PCR过程中 ______ （多选）．
              A．仅针对bglB基因进行诱变     B．bglB基因产生了定向突变
              C．bglB基因可快速累积突变    D．bglB基因突变不会导致酶的氨基酸数目改变．
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            • 2．

              下列关于生物学实验的描述，正确的是

              A．温度对酶活性影响的实验一般选用斐林试剂做指示剂
              B．向DNA浓盐溶液中缓慢加入蒸馏水并过滤之后弃去滤液
              C．PCR产物中加入二苯胺试剂后加热变蓝说明有目的DNA产生
              D．在家庭中用鲜葡萄制作果酒时酵母菌装置应放在30℃~35℃处
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            • 3． 利用PCR扩增目的基因，下列说法正确的是（　　）
              A．要有一段已知核苷酸序列的双链DNA做引物
              B．利用DNA双链复制的原理
              C．要用解旋酶使DNA解链为单链
              D．该过程无需使用DNA聚合酶
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            • 4． 如图为形成cDNA过程和PCR扩增过程示意图．据图分析，下列说法正确的是（　　）
              A．催化①过程的酶是RNA聚合酶
              B．④过程发生的变化是引物与单链DNA结合
              C．催化②⑤过程的酶都是DNA聚合酶，都能耐高温
              D．如果RNA单链中A与U之和占该链碱基含量的40%，则一个双链DNA中，A与G之和也占该DNA碱基含量的60%
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            • 5． 花椰菜易受黑腐病菌的危害而患黑腐病，野生黑芥具有黑腐病的抗性基因．用一定剂量的紫外线处理黑芥原生质体可使其染色体片段化，并丧失再生能力．再利用此原生质体作为部分遗传物质的供体与完整的花椰菜原生质体融合，以获得抗黑腐病杂种植株．流程如图．

              据图回答下列问题：
              （1）过程①所需的酶是 ______ ．
              （2）过程②后，在显微镜下观察融合的活细胞中有供体的 ______ 存在，这一特征可作为初步筛选杂种细胞的标志．
              （3）原生质体培养液中需要加入适宜浓度的甘露醇以保持一定的渗透压，其作用是 ______ ．原生质体经过 ______ 再生，进而分裂和脱分化形成愈伤组织．
              （4）若分析再生植株的染色体变异类型，应剪取再生植株和 ______ 植株的根尖，通过 ______ 、 ______ 、染色和制片等过程制成装片，然后在显微镜下观察比较染色体的形态和数目．
              （5）采用特异性引物对花椰菜和黑芥基因组DNA进行PCR扩增，得到两亲本的差异性条带，可用于杂种植株的鉴定．下图是用该引物对双亲及再生植株1-4进行PCR扩增的结果．据图判断，再生植株1-4中一定是杂种植株的有 ______ ．

              （6）对杂种植株进行 ______ 接种实验，可筛选出具有高抗性的杂种植株．
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            • 6． 下列属于PCR技术的条件的是（　　）
              ①单链的脱氧核苷酸序列引物  
              ②目的基因所在的DNA片段    
              ③脱氧核苷酸    
              ④核糖核苷酸    
              ⑤DNA连接酶     
              ⑥DNA聚合酶     
              ⑦DNA限制性内切酶．
              A．①②③⑤
              B．①②③⑥
              C．①②③⑤⑦
              D．①②④⑤⑦
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            • 7． 在25℃的实验条件下可顺利完成的是（　　）
              A．光合色素的提取与分离
              B．用班氏试剂鉴定还原糖
              C．PCR技术生产目的基因
              D．制备用于微生物培养的固体培养基
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            • 8． 下列相关酶的应用，错误的是
              A．胰蛋白酶——动物细胞培养
              B．酸性脂肪酶——加酶洗衣粉
              C．耐高温的Taq酶——PCR技术
              D．限制酶——基因工程
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            • 9． 生物技术的广泛应用给社会带来了较大的经济效益，受到了社会的广泛重视．请回答下列有关问题：
              （1）制作泡菜时需要测定亚硝酸盐的含量，其方法是 ______ ．亚硝酸盐在特定的条件下会转变为 ______ ，引起生物致癌．引起细胞癌变的原因是环境中的致癌因子使细胞中的 ______ 发生 ______ ．
              （2）1993年，美国科学家因发明了PCR技术面获得了诺贝尔化学奖．PCR技术和生物体内DNA的复制都必须的条件包括 ______ 、模板DNA、能量、游离的脱氧核苷酸和引物；在生物体内DNA复制所必需的，而在PCR技术中不需要的成分是 ______ ．
              （3）为获得一种能高效降解农药的细菌（目的菌），向培养基中加入某种化合物，将初步筛选得到的目的菌转到固体培养基中，常采用的接种方法是 ______ ；实验结束后，使用过的培养基应该处理后再倒掉，这样做是为了 ______ ．
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            • 10． 下列关于基因工程技术的叙述，错误的是（　　）
              A．切割质粒的限制性核酸内切酶均特异性地识别6个核苷酸序列
              B．PCR反应中温度的周期性改变是为了DNA聚合酶催化不同的反应
              C．基因工程的基本工具是：限制性内切酶、DNA连接酶
              D．抗虫基因即使成功地插入到植物细胞染色体上也未必能正常表达
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