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            • 1.

              如图为形成cDNA过程和PCR扩增过程示意图.据图分析,下列说法正确的是( )


              A.催化①过程的酶是RNA聚合酶
              B.④过程发生的变化是引物与单链RNA结合
              C.催化②⑤过程的酶都是DNA聚合酶,都能耐高温
              D.如果RNA单链中A与U之和占该链碱基含量的40%,则一个双链DNA中,A与T之和也占该DNA碱基含量的40%
            • 2.

              玉米是重要的粮食作物,经深加工可生产酒精、玉米胚芽油和果糖等。流程如下:

               
              (1)玉米秸秆中的纤维素经充分水解后的产物可被酵母菌利用发酵生产酒精。培养酵母菌时,该水解产物为酵母菌的生长提供____。发酵过程中检测酵母菌数量可采用________________法或稀释涂布平板法计数。

              (2)玉米胚芽油不易挥发,宜选用___________法或____法从玉米胚芽中提取。

              (3)玉米淀粉经酶解形成的葡萄糖可在葡萄糖异构酶的作用下转化成果糖。利用________技术可使葡萄糖异构酶重复利用,从而降低生产成本。

              (4)利用PCR技术扩增葡萄糖异构酶基因时,需用耐高温的__________催化。PCR技术一般要经历三十次以上的循环,每次循环包括变性、_______和_______三步。

            • 3. 如图为真核细胞DNA复制过程示意图.下列有关DNA复制与PCR比较的叙述中,错误的是(  )
              A.图中酶1的主要作用是断开氢键,PCR也需要酶1
              B.复制完成后子链与母链等长,但PCR子链与母链可能不等长
              C.DNA复制过程需要引物,PCR一般需要两种不同的引物
              D.DNA复制是边解旋边复制,PCR是完全解旋后再进行复制
            • 4.

              嗜热菌可以生活在98℃的高温环境中,研究发现其耐热性与基因H的表达产物有关。下图表示某研究小组利用大肠杆菌对H基因实行的克隆和表达过程,其中NdeⅠ、EcoRⅠ、HindⅢ、SalⅠ四种限制酶的识别序列和酶切位点分别为CATATG、GAATTC、AAGCTT、GTCGAC。请分析回答:

              (1)图中的结构A是________,其主要作用是________。一个完整的基因表达载体组成,除了质粒1中所示结构以外,还应该含有________。

              (2)用图中质粒1和H基因构建重组质粒,应选用________两种限制酶进行切割,影响限制酶处理效果的因素可能有________(多选)。

              ①反应温度 ②缓冲液pH ③限制酶的浓度 ④DNA样品的纯度

              (3)实验中发现,重组质粒导入大肠杆菌后H基因的表达效率很低,但在含有质粒2(辅助性质粒)的细胞中,H基因可以高效表达。为了筛选出转入了两种质粒的受体菌,应在筛选平板培养基中添加________,整个实验过程应保持________操作。

              (4)PCR反应中引物的设计非常关键,据图分析,扩增H基因时应选择的一对引物是________。

              A.引物Ⅰ:···GGGAATTC···;引物Ⅱ:···CTCATATG···

              B.引物Ⅰ:···GAATTCCC···;引物Ⅱ:···CATATGAG···

              C.引物Ⅰ:···GGAAGCTT···;引物Ⅱ:···AAGCTTCC···

              D.引物Ⅰ:···CTCATATG···;引物Ⅱ:···AAGCTTAAGCTT···

            • 5.

              下列甲、乙两图为获得生物新品种的过程示意图。请据图回答下列问题。

              (1)检测目的基因是否转录出mRNA的检测方法是采用        技术。

              (2)乙图为获得抗虫棉技术的流程。图中将目的基因导入植物受体细胞采用的方法是       。在培育转基因植物的研究中,卡那霉素抗性基因(kanR)常作为标记基因,只有含卡那霉素抗性基因的细胞才能在卡那霉素培养基上生长。因此,C过程的培养基除含有必要营养物质、琼脂和激素外,还必须加入         

              (3)随着科技发展,获取目的基因的方法也越来越多,乙图中的“抗虫基因”是利用甲图中的方法获取,③是在           (填“酶的名称”)作用下进行延伸的。

            • 6.

              PCR是聚合酶链式反应的缩写,利用PCR技术可对目的基因进行扩增。请回答有关问题:

              (1)PCR的原理是                     

              (2)PCR技术使DNA解链是通过           实现的,PCR技术中       提供能量。

              (3)DNA解链后冷却的目的是让                      相结合。

              (4)当温度加热至70~75℃时,是 酶把单个脱氧核苷酸,通过 键连接到引物上。如此逐渐延伸形成互补链,进而使目的基因加倍。

              (5)通过重复循环(2)、(3)、(4)过程,经过n次循环需要       个引物。 

            • 7. 下列说法中不正确的是(  )
              A.科学家从70 ℃~80 ℃热泉中可分离得到含耐高温TaqDNA聚合酶的微生物
              B.设置对照实验的主要目的是排除实验组中非测试因素对实验结果的影响,提高实验结果的可信度
              C.统计某一稀释度的5个平板的菌落数依次为M1、M2、M3、M4、M5,应以它们的平均值作为该样品的实际活菌数
              D.同其他环境相比,土壤中的微生物数量最大,种类最多
            • 8. 玉米是重要的粮食作物,经深加工可生产酒精、玉米胚芽油和果糖等。流程如下:                                                                               

              (1)玉米秸秆中的纤维素经充分水解后的产物可被酵母菌利用发酵生产酒精。培养酵母菌时,该水解产物为酵母菌的生长提供________。发酵过程中检测酵母菌数量可采用_______法或稀释涂布平板法计数。

              (2)玉米胚芽油不易挥发,宜选用_______法或________法从玉米胚芽中提取。

              (3)玉米淀粉经酶解形成的葡萄糖可在葡萄糖异构酶的作用下转化成果糖。利用________技术可使葡萄糖异构酶重复利用,从而降低生产成本。

              (4)利用PCR技术扩增葡萄糖异构酶基因时,需用耐高温的_______催化。PCR一般要经历三十次以上的循环,每次循环包括变性、_______和_______三步。

            • 9. 检测转基因(CP4基因)大豆的基本流程如下,下列有关说法错误的是

              大豆DNA的提取和纯化→扩增靶基因(CP4基因)→结果观察与鉴定

              A.采用吸水胀破法破裂细胞,提取DNA
              B.利用溶解度的差异,将DNA与杂质分离
              C.扩增靶基因,需要设计特异性引物
              D.结果鉴定需要以非转基因大豆作对照进行分析
            • 10. (12分) PCR技术有效地 解决了因为样品中DNA含量太低而难以对样品进行研究的问题,而被广泛应用,此过程需要一种Taq DNA聚合酶。请回答有关问题:

              (1)体内DNA复制过程中用解旋酶打开双链DNA,而PCR技术中应用__________。

              (2)Taq DNA聚合酶是从水生耐热细菌Taq中分离的。

              ①Taq DNA聚合酶的功能是催化脱氧核苷酸之间形成____________________。

              ②Taq DNA聚合酶的化学本质为蛋白质,可用________法和__________法进行分离。

              (3)相对于细菌分离,DNA分子的分离和提取操作要复杂的多。

              ①在DNA提取中两次用到蒸馏水,其目的分别是____________、_____________。

              ②实验中能否以哺乳动物成熟的红细胞为实验材料?为什么?__________________。

              (4)与体内DNA复制相比较,PCR反应要在________________中才能进行,并且要严格控制________条件。

              (5)PCR中加入的引物有____________种,加入引物的作用是作为______________________的起点。

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