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            • 1． 家蚕细胞具有高效表达外源基因能力．将人干扰素基因导入家蚕细胞并大规模培养，可以提取干扰素用于制药．
              （1）进行转基因操作前，需用 ______ 酶短时处理幼蚕组织，以便获得单个细胞．
              （2）为使干扰素基因在家蚕细胞中高效表达，需要把来自cDNA文库的干扰素基因片段正确插入表达载体的 ______ 和 ______ 之间；若要检测干扰素基因在家蚕细胞中是否表达，可以采用的分子检测方法有 ______ 、 ______ ．
              （3）通过PCR技术可大量获取目的基因．PCR反应体系主要包括：扩增缓冲液（含Mg2+）、水，4种脱氧核糖苷酸、模板DNA、 ______ 和 ______ ．
              （4）培养家蚕细胞时，贴壁生长的细胞会产生接触抑制．通常将多孔的中空薄壁小玻璃珠放入反应器中，这样可以 ______ ，增加培养的细胞数量，也有利于空气交换．
              （5）“桑基鱼塘”生态系统能充分利用废弃物中的能量，形成“无废弃物农业”，这主要是遵循生态工程的 ______ 原理．同时，通过饲养家禽、家畜，栽培食用菌，提高农民经济收入，使保护环境和发展经济相互协调，这又体现了生态工程的 ______ 原理．
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            • 2． 一对表现型正常的夫妇，生了一个镰刀型细胞贫血症（常染色体隐性遗传病）男性患儿．在他们欲生育第二胎时，医生为该对夫妇实施了体外受精和产前基因诊断．请回答：
              （1）为了获得更多的卵子用于体外受精时，可考虑注射 ______ ．
              （2）为了使产前基因诊断结果更加明显，要先从胚胎细胞中提取物质 ______ 进行PCR扩增．PCR扩增前需要知道相关基因的核苷酸序列，以便 ______ ．PCR扩增过程需要高温（90℃-95℃）处理，目的是 ______ ；为适应这一处理过程的高温条件，因此需要加入 ______ ．
              （3）PCR扩增后用特定 ______ 对扩增产物进行切割．已知正常基因内有一个该酶的切点，而致病基因没有．若胚胎基因型与父母一样，则切割后进行基因检测时应含有 ______ 种DNA片段．
              （4）若胚胎基因型为显性纯合子且其哥哥配型相合，则可考虑由第二个孩子提供骨髓治疗其哥哥的镰刀型细胞贫血症．骨髓移植能用于治疗该病的原因是 ______ ．
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            • 3． 定点突变技术是指通过聚合酶链式反应（PCR）向目的基因片段中引入所需变化．GFP（绿色荧光蛋白）的发光基团是第65至67位的三个氨基酸（丝氨酸-酪氨酸-甘氨酸），该发光基团可利用定点突变技术使第66位酪氨酸换成组氨酸，即可发出更明亮的蓝光，成为蓝色荧光蛋白．

              （1）定点突变第一步得把突变位点设计在引物上，据图1中信息人工合成短DNA引物应包含的序列是 ______ ，突变位点一般设计在引物中间位置的理由是 ______ ，该定点突变技术是否成功的标志是 ______ ，该技术属于 ______ 工程的范畴．
              （2）如下所示，如果要用PCR扩增以下DNA模板中的基因1（左），一位同学设计了一对引物如下（右），该设计不合理的理由是 ______ ．
              5′------基因1------3′引物1 5′--AGATCT---3′
              3′------基因1------5′引物2　5′--TCTAGA---3′
              （3）如图2表示引物修正后PCR扩增目的基因（基因1）的第 ______ 轮循环的示意图．若再进行一轮循环，仅有基因1（含引物）的DNA片段有 ______ 个．
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            • 4． 已知某传染性疾病的病原体为RNA病毒，该病毒表面的A蛋白为主要抗原，制备抗A蛋白抗体的部分流程如下图．

              请回答：
              （1）①代表的是 ______ 过程．为获得A基因表达载体，需用 ______ 酶对A基因和运载体进行切割．将A基因表达载体导入动物细胞常用的方法是 ______ ．
              （2）利用PCR技术扩增A基因时，设计引物序列的主要依据是 ______ ，加入引物的作用是 ______ ．
              （3）与体内DNA复制相比较，PCR反应要在一定的缓冲溶液中才能进行，并且要严格控制 ______ 等条件．
              （4）过程③采用的技术是 ______ ，获得的X叫 ______  细胞．
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            • 5． 中国科学家成功将肝再生增强因子（hALR）的基因导入羊的乳腺上皮细胞中，再利用核移植技术培育出了转基因克隆羊，其乳汁含有hALR．回答下列问题：
              （1）在体外，可通过PCR技术扩增hALR基因，该技术依据的原理是 ______ ．为了保证PCR反应的进行，反应体系需要加入耐高温 ______ 酶、模板DNA、dCTP、dATP、dGTP、dTTP、 ______ 等．
              （2）将外源hALR基因导入乳腺上皮细胞常用的方法是 ______ ，检测其染色体上是否整合了hALR基因，可采用 ______ 技术；将乳腺上皮细胞的细胞核移植到受体卵母细胞之前，对受体卵母细胞的处理是 ______ ．
              （3）与转基因工程菌（大肠杆菌）相比，利用羊乳腺生产出的hALR有生物活性，其原因可能是 ______ ．
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            • 6．

              多聚酶链式反应（PCR）是一种体外迅速扩增DNA片段的技术。下列有关PCR过程的叙述中不正确的是（ ）

              A．变性过程中破坏的是DNA分子内碱基对之间的氢键，也可利用解旋酶实现
              B．复性过程中引物与DNA模板链的结合是依靠碱基互补配对原则完成
              C．延伸过程中需要DNA聚合酶、ATP、四种核糖核苷酸
              D．PCR与细胞内DNA复制相比所需要酶的最适温度较高
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            • 7． 下列关于PCR技术的叙述，错误的是（　　）
              A．利用了细胞内DNA复制的原理
              B．引物是合成子链的条件之一
              C．Taq酶在90-95℃时会变性
              D．每一次循环后目的基因的量增加一倍
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            • 8． 资料显示，近十年来，PCR技术（DNA聚合酶链式反应技术）成为分子生物实验的一种常规手段，如图所示，在很短的时间内，在试管中将DNA扩增几百万倍甚至几十亿倍，使分子生物实验所需的遗传物质不再受限于活的生物体．请据图回答：

              （1）加热至94℃的目的是使DNA样品的 ______ 键断裂，这一过程在生物体细胞内是通过 ______ 酶的作用来完成的．通过分析得出新合成的DNA分子中，A=T，C=G，这个事实说明DNA分子的合成遵循 ______ ．
              （2）PCR技术能把某一DNA片段进行扩增，是依据什么原理？ ______ ．
              （3）在以DNA为模板，延伸引物合成双链DNA时，需要一种特殊的酶是 ______ ．
              （4）通过PCR技术使DNA分子大量复制时，若将一个用15N标记的模板DNA分子（第一代）放入试管中，以14N标记的脱氧核苷酸为原料，连续复制到第五代时，含15N标记的DNA分子单链数占全部DNA总单链数的比例为 ______ ．
              （5）PCR技术不仅为遗传病的诊断带来了便利，而且改进了检测细菌和病毒的方法．若要检测一个人是否感染了艾滋病病毒，你认为可以用PCR扩增血液中的 ______
              A．白细胞DNA   　 B．病毒蛋白质 　  C．血浆抗体  　  D．病毒核酸．
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            • 9． 列属于PCR术的条件的是（　）
              引空/已知的脱氧核苷酸序列/格氧核苷酸核核苷DA连接酶DNA合酶⑦DNA限制性内切酶．
              A．①②③⑤
              B．①②③⑥
              C．①②③⑤⑦
              D．①②④⑤⑦
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            • 10．

              有关PCR技术的说法，错误的是(　　)

              A．PCR是一项在生物体外复制特定DNA片段的核酸合成技术
              B．PCR技术的原理是DNA双链复制，遵循碱基互补配对原则
              C．利用PCR技术获取目的基因的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列
              D．PCR扩增中必须有解旋酶才能解开双链DNA，产物为cDNA
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