胡萝卜因含有多种营养成分而备受人们青睐。其中β－胡萝卜素是一种抗氧化剂，具有解毒作用，是维护人体健康不可缺少的营养素。下图是获取胡萝卜素的二个途径，请据图回答：

（1）图中粉碎了的胡萝卜需进行[①]___________处理后再进行萃取操作，在浓缩之前，还需进行[②]____________处理。

（2）现有石油醚、乙酸乙酯、乙醚、苯等四种有机溶剂，最好选择____________用于胡萝卜素的萃取，主要理由是_______________________________（答对两点既可）

（3）胡萝卜素的萃取瓶口需安装冷凝回流装置，以防止____________________。

（4）途径2获取的产胡萝卜素工程菌在发酵生产时，除供给足量的水、无机盐、氧气外，还需要供给_______、________等营养物质。

胡萝卜素是一种常用的备用色素，可分别从胡萝卜或产生胡萝卜素的微生物体中提取获得。请回答下列问题：

（1）提取到的胡萝卜素粗品可以通过________法进行鉴定，鉴定过程中需要用胡萝卜素标准样品作为                                 。

（2）碳源的种类对β胡萝卜素的产量有着一定的影响，有关研究结果如下：

据表分析，最佳碳源是________。若要进一步探究最佳氮源，请简要写出实验设计思路：                                                                                                                                                 。

（3）有科研人员尝试利用紫外线处理红酵母，以获得高产菌株，使用这种育种方法的优点是​                                                                                                             。经定量分析后，若得到高产菌株，要对其进行长期保存，可采用                                      的方法在－20℃的冷冻箱中保存。

利用紫外线诱变选育高产β–胡萝卜素的三孢布拉霉负菌，未突变菌不能在含有一定浓度的β–紫罗酮的培养基上生长，菌体随β–胡萝卜素含量增加从黄色加深至橙红色。图甲为选育及提取获得β–胡萝卜素流程，请回答下列问题：

(1)用紫外线照射三孢布拉霉负菌的目的是                     。为选出高产突变菌种，还应在培养基中添加          ，在接入菌种前，应对培养基进行                   ，以避免杂菌污染。

(2)某同学进行正确的接种操作后，平板经培养后的菌落分布如图乙所示。该同学的接种方法是              ；由于              ，所以培养基上只有少数菌能生长形成菌落。

(3)进行③过程时，应选取         色的菌落接种至液体培养基。使用过的培养基及其培养物，需灭菌后才能丢弃的原因是                。

(4)将萃取的胡萝卜素样品与β–胡萝卜素标样层析后进行比对，结果如下图，从图中分析可知，色带为        β–胡萝卜素。

胡萝卜素可以维持眼睛和皮肤的健康，改善夜盲症、皮肤粗糙的状况，有助于身体免受自由基的伤害。请根据其提取过程及胡萝卜素的性质，回答下列问题：

（2）如图是胡萝卜素粗品鉴定装置示意图。该鉴定方法的名称是__________________法。在图乙的胡萝卜素的结果示意图中，A、B、C、D四点中，属于提取样品的样点             。

(1)平板划线法能将聚集的菌种逐步             到培养基的表面，从而可以分离到由一个细胞繁殖而来的菌落。平板划线法一般不用于活菌计数的原因是                 。 

(2)为了探究萃取物是否是胡萝卜素，该同学将叶绿素b、叶绿素a、叶黄素、萃取物和色素混合液(含4种光合色素)依次点样在滤纸的1、2、3、4、5位置(如图所示)，并进行层析，滤纸条上各色素带的位置为       (填字母)时，即可说明该萃取物最可能是胡萝卜素。

(3)酵母菌R能分泌A、B两种酶，下图是某课题组关于这两种酶的实验结果：

①图中结果显示，在 40℃至 60℃范围内，热稳定性较好的酶是   。高温条件下酶容易失活，其原因是        。

②由图可知，若要从酵母菌R种群中筛选出能产生热稳定性高的酶目的菌株，应在            的条件下培养。

 ③对A、B两种酶进行分离提纯，若分子量相差较大，最好采用          方法。

Ⅱ科研人员获得了一种叶绿素b完全缺失的水稻突变体，该突变体对强光照环境的适应能力更强。请回答问题。

(1)提取水稻突变体的光合色素，应在研磨叶片时加入CaCO₃，以防止色素被破坏。用纸层析法分离该突变体叶片的光合色素，缺失的色素带应位于滤纸条的______________。

(2)该突变体和野生型水稻的O₂释放速率与光照强度的关系如图所示。当光照强度为n时，与野生型相比，突变体单位面积叶片中叶绿体的氧气产生速率________（填较大或者较小）。当光照强度为m时，测得突变体叶片气孔开放程度比野生型更大，据此推测，突变体固定CO₂形成________的速率更快，对光反应产生的             消耗也更快，进而提高了光合放氧速率。

(3)如果将突变体和野生型水稻分别种植在密闭小室内，在光照、温度等条件适宜的情况下，经过一段时间，小室内CO₂浓度不再发生变化时，         水稻的单位面积叶片中叶绿体的氧气产生速率更快，理由是                                 。

（1）图中①和②分别表示辣椒组织培养中细胞的_________和_________过程。

（2）图中培养外植体的培养基中常用的凝固剂是________。培养基中的生长素和细胞分裂素用量的比值______（填“高”或“低”）时，有利于芽的分化。对培养基彻底灭菌时，应采用的灭菌方法是__________。

（3）提取辣椒素过程中，萃取加热时需安装冷凝回流装置，其目的是              。

（1） 与乳酸菌相比，酵母菌在结构上的主要区别是。培养酵母菌R时，培养基中的蔗糖和硝酸盐可分别为酵母菌R的生长提供。

（2）采用平板划线法接种酵母菌R时，需先灼烧接种环，其目的是。培养基通常采用的灭菌方法是。 

（3）为了验证萃取物是否是胡萝卜素，该同学将叶绿素b、叶绿素a、叶黄素、萃取物和色素混合液(含叶绿素b、叶绿素a、叶黄素和胡萝卜素)依次点样在滤纸的1、2、3、4、5位置（如图甲所示），并进行层析，滤纸条上各色素带的位置为（填字母）时，即可说明该萃取物最可能是胡萝卜素。

（4）酵母菌R能分泌A、B两种酶，下图是某课题组关于这两种酶的实验结果：

①图中结果显示，在40℃至60℃范围内，热稳定性较好的酶是。高温条件下酶容易失活，其原因是。

②由图可知，若要从酵母菌R种群中筛选出能产生热稳定性高的酶的菌株，应在的条件下培养。

（1）图中①和②分别表示辣椒组织培养中细胞的__________和__________过程。

（2）图中培养外植体的培养基中常用的凝固剂是__________。培养基中的生长素和细胞分裂素用量的比值__________（填“高”或“低”）时，有利于芽的分化。对培养基灭菌的常用方法是_____       _____。

（3）图中外植体的消毒所用的是体积分数70%的酒精和                         。

（4）提取辣椒素过程中，萃取加热时应水浴加热，其目的是                        。

（1）从装置上看，A装置多了      、      ；B装置增加了      ，采用此装置进行加热的原因是                  。 

（2）两个装置的差别是由于提取方法不同，归根到底是由于相关试剂的分子结构不同，理化性质不同。A装置中提取物一般有很强的      。B装置中用于溶解胡萝卜素的最佳试剂为         ，此种试剂具有    沸点，不与    混溶的特点

（3）能否用A装置提取橘皮中的橘皮精油？               ，原因是                         （2分）

（4）用装置B萃取胡萝卜素,为保证萃取效果好，需要保证                         （2分）

（5）下图为装置B中胡萝卜素纸层析结果图，用数字表示图中属于标准样品的点为         

Ⅰ．【现代生物科技专题】

   鼠源单克隆抗体用于疾病的治疗时，易发生不良反应，科学家通过对鼠和人控制抗体产生的基因进行拼接，实现了对鼠源单克隆抗体的改造，生产出对人体不良反应小、效果更好的单克隆抗体。请回答：

(1)鼠源单克隆抗体是将经过免疫的小鼠________细胞与骨髓瘤细胞融合，然后筛选出________的杂交瘤细胞，并通过体内或体外培养生产的抗体。

(2)动物细胞融合常用________诱导，细胞融合体现了细胞膜的________。在体外培养杂交瘤细胞时，培养液中通常加入________等天然成分，将其置于95％空气加5％CO₂的气体环境中，CO₂的作用是________。

(3)基因拼接用到的工具有________和________。

(4)单克隆抗体的优点是________。

Ⅱ．【生物技术实践】

    近年来，纪录片《舌尖上的中国》引发全民关注美食的热潮，其中多次讲述了利用不同微生物的发酵作用制作的美味食品。请回答：

(1)腐乳生产是在严格的无菌条件下，将优良的毛霉菌种接种到豆腐上，这样可以________。腐乳制作的过程中，加盐的作用是________和________。从微生物培养的角度来看，豆腐应该属于________。

(2)在果醋制作时，醋酸菌在________供应和糖源充足时，将糖分解成醋酸；在糖源不充足时，也可以利用________生成醋酸。

(3)制作泡菜的原理是________。

(4)胡萝卜素是重要的药物和食品添加剂，在胡萝卜素的萃取中，所用的有机萃取溶剂应该具有较高的________，以便胡萝卜素能充分溶解其中。对萃取的胡萝卜素样品和标准样品进行点样层析时，如果出现________现象，则说明胡萝卜素提取成功。