2.
定点突变技术是指通过聚合酶链式反应(PCR)向目的基因片段中引入所需变化.GFP(绿色荧光蛋白)的发光基团是第65至67位的三个氨基酸(丝氨酸-酪氨酸-甘氨酸),该发光基团可利用定点突变技术使第66位酪氨酸换成组氨酸,即可发出更明亮的蓝光,成为蓝色荧光蛋白.
(1)定点突变第一步得把突变位点设计在引物上,据图1中信息人工合成短DNA引物应包含的序列是
______
,突变位点一般设计在引物中间位置的理由是
______
,该定点突变技术是否成功的标志是
______
,该技术属于
______
工程的范畴.
(2)如下所示,如果要用PCR扩增以下DNA模板中的基因1(左),一位同学设计了一对引物如下(右),该设计不合理的理由是
______
.
5′------基因1------3′引物1 5′--AGATCT---3′
3′------基因1------5′引物2 5′--TCTAGA---3′
(3)如图2表示引物修正后PCR扩增目的基因(基因1)的第
______
轮循环的示意图.若再进行一轮循环,仅有基因1(含引物)的DNA片段有
______
个.