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            • 1.

              土壤中含有大量的难溶性磷酸盐,为了从土壤中筛选出能够将难溶性磷酸盐转化为植物能吸收的可溶性磷的优良解磷菌株,以便将其添加到有机肥中,改善植物磷元素供应。科研人员进行如下实验:

              实验原理:固体培养基中难溶性磷酸盐在微生物的作用下溶解,会在菌落周围形成透明圈(如右图),透明圈直径(D)与菌落直径(d)的比值( D/d)代表微生物溶解磷的能力大小。

              实验步骤:

              步骤1 取某地区土样5 g制得土壤溶液后稀释,取稀释液1 mL接种到基础培养基A上,在适宜温度下培养72 h。

              步骤2 在基础培养基A上用接种环挑取代表性菌落再次接种,培养3~4 d后观察菌落特征和透明圈的大小,初步筛选出三种优良解磷菌株(如下表)。

              菌株

              透明圈直径(D)

              菌落直径(d)

              D/d

              M-3-01

              18.8

              12.3

              1.5

              B3-5-6

              20.7

              8.0

              2.6

              T1-4-01

              9.1

              6.5

              1.4

              分析回答:

              (1)从物理形态看,培养基A属于________培养基。培养基中磷源应该是________。

              (2)步骤1中接种方法是________,步骤2中接种环的灭菌方法是________。

              (3)根据实验结果可以确定溶解磷能力最强的菌株是________。

              (4)为进一步测定初步筛选的三种菌株实际溶解磷的能力,研究人员将它们接种到基础培养基B中,并在37℃、200 r·min1摇床培养,定期取上清液,测定溶液中可溶性磷含量,得到如图所示曲线。  

              ①用摇床进行培养的好处是__________________。

              ②结果表明最优良的解磷菌株是________。

            • 2. 红梨醋饮属于绿色健康饮品,其制作流程如图:

              请回答:
              (1)可在酸性条件下用 ______ 与发酵产物反应,检测①过程是否成功.
              (2)在①过程进行旺盛时,②过程往往不能进行,原因是 ______
              (3)对②过程所用的微生物进行分离和纯化时,常用的划线工具是 ______ .在固体培养基上划线4次,至少需要灼烧划线工具 ______ 次.
              (4)为检测生产用水中的大肠杆菌含量,每次将200ml水样过滤后,取滤膜放在伊红美蓝培养基上,重复三次.将3个平板置于37℃恒温箱中培养24h后挑选 ______ 色的菌落进行计数.平板上目的菌菌落数分别为32、292和36,据此可计算出每升水样中的大肠杆菌数为 ______ 个.若采用显微镜直接计数法,计数结果会偏高,原因是 ______
              (5)桉树油对大肠杆菌有抑制作用,也可作为食品添加剂,其挥发性强,难溶于水,用桉叶提取桉树油常用
              ______ 法.
            • 3. 有些细菌可分解原油,从而消除由原油泄漏造成的土壤污染.某同学欲从污染的土壤中筛选出高效降解原油的菌株.回答问题:
              (1)无菌操作是微生物实验中重要的一项技术,下列常用的无菌操作中错误的是 ______
              A.用酒精擦拭双手
              B.用氯气消毒水源
              C.实验操作应在酒精灯火焰附近进行
              D.玻璃器皿(吸管、培养皿)可用酒精擦拭
              (2)在筛选过程中,应将土壤样品稀释液接种于以 ______ 为唯一碳源的固体培养基上,从功能上讲,该培养基属于 ______ 培养基.
              (3)纯化菌种时,为了得到单菌落,常采用的接种方法有两种,即 ______ ______
              (4)为了筛选出高效菌株,可比较单菌落周围分解圈的大小,分解圈大说明该菌株的降解能力 ______
            • 4. 洗衣粉是生活的必需用品,某实验小组为探究洗衣粉加酶后的洗涤效果,将一种无酶洗衣粉分成3等份,进行3组实验.甲、乙组在洗衣粉中加入1种或2种酶,丙组不加酶,在不同温度下清洗同种化纤布上的2种污渍,其他实验条件均相同,下表为实验记录.请回答下列问题.
              温度/℃ 10 20 30 40 50
              组别
              清除血渍时间/min 67 66 88 52 51 83 36 34 77 11 12 68 9 11 67
              清除油渍时间/min 93 78 95 87 63 91 82 46 85 75 27 77 69 8 68
              (1)本实验的自变量是 ______
              (2)甲、乙组洗涤效果的差异,说明酶的作用具有 ______
              (3)甲组在洗衣粉中加入了 ______
              乙组在洗衣粉中加入了 ______
              (4)如果甲、乙和丙3组均在水温为80℃时洗涤同一种污渍,请比较这3组洗涤效果之间的差异并说明理由. ______
              (5)添加蛋白酶的加酶洗衣粉不适宜洗涤下列哪些衣料 ______
              ①棉织品  ②毛织品   ③腈纶织品   ④蚕丝织品  ⑤涤纶织品  ⑥锦纶织品
              (6)该加酶洗衣粉用后要彻底洗手,其主要原因是 ______
            • 5. (12分)酵母菌是来源于自然界的菌种,它种类繁多、分布很广、繁殖极快。如何筛选、纯化、诱导对葡萄酒发酵有利的酵母菌种,是酿酒师们长期研究的课题。

              (1)像其他微生物一样,酵母需要适当的营养和合适的环境条件,培养时培养液中的营养物质主要有                     等。(要求回答4种营养物质)

              (2)当酵母繁殖时,没有糖转化为酒精,此时酵母菌为                 呼吸.

              (3)从含有酵母菌、醋酸菌、蓝藻的培养液中分离出酵母菌,最简单的培养方法是:在              并且                条件下进行培养.

              (4)葡萄酒制作是否成功,发酵后需用             来鉴定,在             条件下,该物质与酒精反应呈现            色。

              (5)为筛选和纯化酵母菌,根据用途应选用                   培养基,常用的接种方法                                .扩大培养过程中需要对酵母菌进行计数,取0.2mL样品,用固体培养基对其培养,最后统计了三个平板,菌落数分别是200、180、220.则样品中微生物的数量为               个/mL.该统计结果             (低于、高于)实际值。

            • 6. 47、(14分)在农业用地中发现一种广泛使用的除草剂(含氮有机化合物 )在土壤中不易降解,长期使用可污染土壤。为修复被该除草剂污染的土壤,可按下面程序选育能降解该除草剂的细菌(已知该除草剂在水中溶解度一定,该除草剂的培养基不透明)。

              (1)制备土壤浸出液时,为避免菌体浓度过高,需将浸出液进行________处理。

              (2)要从长期使用该除草剂的土壤中分离目的菌,上述培养皿中培养基的特点是:固体培养基________________。若需要调节培养基pH,应该在各种成分都溶化后且分装________(填“前”或“后”)进行。对培养基进行灭菌,常采用的方法是________。

              (3)培养后发现,只有很少菌落出现,大部分细菌在此培养基上不能生长的主要原因是________________或有氧条件抑制了这些细菌的生长。

              (4)在固体培养基上形成的菌落中,无透明带菌落利用的氮源主要是________,有透明带菌落利用的氮源主要是________,据此可筛选出目的菌。

              (5)若要统计某土壤样品中该活菌数目,宜采用__________________法。

              ①测定该菌数时,在对应稀释倍数为106的培养基中,得到以下几种统计结果,正确可信的是____________,理由是_______________________________________。

              A.一个平板,统计的菌落数是230

              B.两个平板,统计的菌落数是220和260,取平均值240

              C.三个平板,统计的菌落数分别是210、50和520,取平均值260

              D.四个平板,统计的菌落数分别是210、300、240和250,取平均值250

              ②一同学在稀释倍数为105的培养基中测得平板上菌落数的平均值为234,那么每毫升样品中的菌落数是__________个(涂布平板时所用稀释液的体积为0.1 mL)。

              ③用这种方法测定的大肠杆菌菌落数比实际活菌数量_________,因为_________________                                      _。(2分)

            • 7. 根据所学知识,回答下列有关生物技术实践的问题:
              (1)葡萄酒的自然发酵过程中,菌种主要来自附着在 ______ 的野生酵母菌.如果要从中分离纯化酵母菌,最常用的接种方法是 ______ ______ .葡萄酒制作成功与否,经发酵后需用 ______ 来检测.若要制作葡萄醋,则需要在 ______ 条件下.
              (2)提取玫瑰花精油常采用 ______ 法,原理是利用 ______ 将其携带出来.
              (3)要鉴定分离得到的微生物,常需要借助生物化学的方法.如在以尿素为唯一碳源的培养基中加入 ______ ,可用来鉴定分解尿素的细菌;在以纤维素为唯一碳源的培养基中加入 ______ ,可用来鉴定纤维素分解菌.
            • 8. ______ ______ 是利用物理或化学方法将酶或细胞固定在一定空间内的技术.细胞个大,多采用 ______ 固定化;酶分子很小,更适合采用 ______ 和物理吸附法固定化.
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