研究发现柚皮精油和乳酸菌素(小分子蛋白质)均有抑菌作用，两者的提取及应用如图所示。请回答下列问题：

(1)通常采用压榨法提取柚皮精油，该过程得到的糊状液体可通过布袋________除去其中的固体杂质。为了提高出油率，需要将新鲜的柚皮进行________处理，并用石灰水浸泡，作用是________________________________________________________________________。

(2)筛选乳酸菌A时可选用________________________法接种。对新配制的培养基灭菌时常用的灭菌方法是________________。培养乳酸菌A的培养基中通常含有________、________、水和无机盐。

(3)抑菌实验时，在长满致病菌的平板上，会出现以抑菌物质为中心的透明圈。可通过测定透明圈的________来比较柚皮精油和乳酸菌素的抑菌效果。

苹果醋是指苹果汁经发酵而成的苹果原醋，再兑以苹果汁等原料而成的饮品。下图是苹果醋的制作流程简图，请据图回答下列问题：

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(1)过程①②所用的微生物在结构上最明显的区别是_______________。这两个过程所需发酵条件(环境因素)最明显的区别有__________、____________。

(2)过程①②中产物的检测，除了嗅味和品尝外，还可分别用____________和____________检测。

(3)若要在过程②的发酵产物中分离出所需菌种，需进行纯化培养。纯化培养的原理是：在培养基上得到____________________________，即可获得较纯的菌种。常用的接种方法有平板划线法和____________，配制固体培养基所用的凝固剂通常是________。

胡萝卜素是常用的食品色素，可以用于治疗某些疾病，甚至有使癌变细胞恢复成正常细胞的作用，因此提取胡萝卜素具有重要的意义。胡萝卜素可以从植物中提取和养殖的岩藻中获得，还可以利用微生物发酵产生。如图为提取胡萝卜素的流程示意图，请回答下列问题：

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(1)胡萝卜素在人体内可以被氧化成________，有利于治疗夜盲症、干皮症等疾病；炒胡萝卜时要多加________，以利于胡萝卜素的溶解，从而更易被人体吸收。工业生产上，用养殖的岩藻作为原料获得胡萝卜素时，________(填“需要”或“不需要”)将新鲜的岩藻干燥。

(2)新鲜胡萝卜干燥时温度不能太高、时间不能太长，目的是________________________________。萃取时一般选用的萃取剂是________，影响萃取效率的因素有_____________________________________________________________________(答出三项即可)。萃取液浓缩前需进行过滤，其目的是_________________。鉴定萃取液中是否含有胡萝卜素时，通常可采用________法，并以________________样品作为对照。

(3)利用微生物发酵生产胡萝卜素时，培养微生物的培养基中的蔗糖和硝酸盐可以分别为微生物提供________和________。采用________法接种时需要先灼烧接种环，以防止杂菌污染。

为了分离和纯化高效分解石油的细菌，科研人员利用被石油污染过的土壤进行如图A所示的实验。据此回答下列问题：

(1)配制好的培养基通常使用________________法灭菌。步骤③与步骤②中培养基成分相比，最大的区别是步骤③培养基中____________________。

(2)同学甲进行步骤④的操作，其中一个平板经培养后的菌落分布如图B所示。该同学的接种方法是________，出现图B结果可能的失误操作是____________。

(3)同学乙也按照同学甲的接种方法进行了步骤④的操作：将1 mL样品稀释100倍，在3个平板上分别接入0.1 mL稀释液；经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为56、58和57。据此可得出每升样品中的活菌数为__________个。

(4)步骤⑤需要振荡培养，原因是_________________________________________________________________________________________。

(5)步骤⑤后取样测定石油含量的目的是__________________________________________________________________________。

某同学用新鲜的泡菜滤液为实验材料分离纯化乳酸菌。分离纯化所用固体培养基中因含有碳酸钙而不透明，乳酸菌产生的乳酸能溶解培养基中的碳酸钙。回答下列问题：

(1)分离纯化乳酸菌时，首先需要用__________________对泡菜滤液进行梯度稀释，进行梯度稀释的理由是___________________________________。

(2)推测在分离纯化所用的培养基中加入碳酸钙的作用有__________________和__________________。分离纯化时应挑选出__________________的菌落作为候选菌。

(3)乳酸菌在－20 ℃长期保存时，菌液中常需要加入一定量的__________(填“蒸馏水”“甘油”或“碳酸钙”)。

纤维素分子不能进入酵母细胞．为了使酵母菌能够利用环境中的纤维素为原料生产酒精，构建了含3种不同基因片段的重组质粒，下面是酵母菌转化及纤维素酶在工程菌内合成与运输的示意图．

A．①②

B．①③

C．②④

D．③④

（3）纤维素酶基因的表达包括__________和___________过程，与菌株Ⅱ相比，在菌株Ⅲ、Ⅳ中参与纤维素酶合成和分泌的细胞器还有__________

（4）在以纤维素为唯一C源的培养基上分别培养菌株Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ，菌株__________不能存活，原因是____________________________．

（5）酵母菌生产酒精的细胞部位是_______________,产生酒精时细胞的呼吸方式是________________．在利用纤维素生产酒精时,菌株Ⅳ更具有优势，因为导入的中重组质粒含有_________，使分泌的纤维素酶固定于细胞壁，减少因培养液更新而造成的酶的流失，提高酶的利用率．

水污染是全球性的环境问题，微生物降解是水污染治理的有效手段之一。聚乙烯醇(PVA)是存在于化工污水中的一种难以降解的大分子有机物，PVA分解菌能产生PVA酶分解PVA，PVA与碘作用时能产生蓝绿色复合物，当PVA被分解时蓝绿色复合物消失，形成白色透明斑，请回答下列问题：

(1)要从土壤中筛选出能高效分解PVA的细菌，应采用以________作为唯一的碳源的选择培养基，实验中还应设置对照组。将菌液稀释相同的倍数，对照组培养基上生长的菌落数目应明显________(填“多于”或“少于”)选择培养基上的数目，从而说明选择培养基具有筛选作用。

(2)要测定土壤稀释液中微生物的数目，可在显微镜下用________计数板直接计数。若将100 mL含有PVA分解菌的土壤样品溶液稀释10⁴倍后，取0.1 mL稀释液均匀涂布在选择培养基表面，测得菌落数的平均值为160个，空白对照组平板上未出现菌落，则100 mL原菌液中有PVA分解菌________个，该方法的测量值与实际值相比一般会________(填“偏大”“偏小”或“相等”)。

(3)要鉴定分离出的细菌是否为PVA分解菌，培养PVA分解菌的培养基中除了加入必需的营养物质外还需要加入碘用于鉴别PVA分解菌。要比较不同菌株降解PVA能力的大小，用含相同PVA浓度的上述培养基来培养不同菌株，一定时间后，通过测定________________来确定不同菌株降解PVA能力的大小。

(4)提取橘皮精油，常采用________而不用水蒸气蒸馏法，原因是_________________________________________________________________。

临床使用抗生素前，有时需要做细菌耐药实验。实验时，首先要从病人身上获取少量样本（如痰液、粪便等），然后按照一定的实验步骤操作，以确定某致病菌对不同抗生素的敏感性。回答下列问题：

⑴为了从样本中分离并获取某种致病菌单菌落，可用             法或             法将人体样本接种于固体培养基表面，再经过选择培养、鉴别等步骤实现。

⑵为了检测该致病菌对于抗生素的敏感性，取该单菌落适当稀释，接种于固体培养基表面，在37℃培养箱中培养24h，使其均匀生长，布满平板。将分别含有A、B、C、D四种抗生素的滤纸片均匀置于该平板的不同位置，培养一段时间后，在四个滤纸片周围出现透明圈由大到小依次是A＞C＞D＞B。由此推断，该病人目前适合使用的是抗生素        。含D的滤纸片周围的透明圈比含A、C的小，但透明圈中出现了一个菌落，这种菌落的出现可能是由于杂菌污染导致的，也可能是由于该致病菌发生了突变；若发生了基因突变，这种突变一般是否由抗生素诱发的？         ，若要证明这种致病菌发生了基因突变，可检测和比较这类细菌细胞中        （“DNA 的碱基组成”“mRNA 的含量”“ DNA 的碱基序列”）。

⑶为防止杂菌污染，培养基的灭菌方法是         灭菌，接种环的灭菌方法是         灭菌，接种过程应该在               旁进行。