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            • 1.

              下列有关固定化酶技术和固定化细胞技术的叙述中,正确的是()

              A.固定化酶和固定化细胞的目的是限制酶与反应物接触,控制反应速度

              B.酶更适合包埋法固定化,细胞更适合吸附法固定化

              C.加酶洗衣粉是含有固定化酶制剂的洗衣粉

              D.固定化细胞对酶的活性影响小,与固定化酶相比应用更广泛
            • 2. 下列有关用海藻酸钠作为载体固定酵母细胞实验的叙述,正确的是
              A.溶化海藻酸钠应采用酒精灯小火或间断加热
              B.海藻酸钠的浓度过低,形成的凝胶珠内包埋的细胞过少
              C.在酵母细胞的活化或配制CaCl2溶液时,可使用自来水
              D.利用固定化酵母细胞进行发酵,糖类的作用不只是作为反应底物
            • 3.

              下列有关用海藻酸钠铺作为载体固定酵母细胞实验的叙述,错误的是( )

              A.溶化海藻酸钠应采用酒精灯小火或间断加热
              B.海藻酸钠的浓度过低,形成的凝胶珠内包埋的细胞过少
              C.在酵母细胞的活化或配制CaCl2溶液时,可使用自来水
              D.合格的凝胶珠应该是白色的
            • 4.

              我国食品加工企业每年都会产生大量高浓度有机废水,如直接排放会造成严重污染。固定化酶技术可应用于高浓度有机废水的处理,科研人员对固定化蛋白酶进行了以下实验研究。

              实验一:研究人员选择了硅胶、活性炭和大孔树脂为载体制备固定化蛋白酶,三种载体的固定化率如图1所示。

              实验二:为探究pH对三种载体固定化酶活性的影响。研究人员将高浓度污水的pH分别调至4.5、5.0、5.5、6.0、6.5、7.0,各取500 mL。分别使其与等量不同载体的固定化酶混合,然后在37 ℃的水浴中反应6 h。测定每个反应器中氨基酸的生成速率。测定结果如图2所示。回答下列问题:

              图1 三种载体固定效果比较图2 pH对三种载体固定化酶活性的影响


              (1) 由图1可知,三种载体蛋白酶固定化率最低的是____。与水溶性酶相比,固定化酶处理高浓度污水的优点是_______________。 

              (2) 实验二的自变量是_________,无关变量是_________。(至少写两点) 

              (3) 从图2中可得出结论:________________________;_______________________。 

              (4) 结合图1和图2分析,进行高浓度污水的净化时应选择____载体的固定化酶。 

            • 5. 为了探索海藻酸钠固定化对绿球藻生长的影响,以及固定化藻对含Zn2+污水的净化作用,科研人员用筛选到的一株绿球藻进行实验,流程及结果如下。请回答下列问题:
              制备固定化绿球藻凝胶球→清洗2~3次培养液中培养柠檬酸钠溶液溶解凝胶球,测定藻数量

              图1图2


              (1) 实验中的海藻酸钠作用是_____,CaCl2的作用是_。 

              (2) 为洗去凝胶球上残余的CaCl2和其他污染物,并保持绿球藻活性,宜采用____洗涤。图1 中1.0%海藻酸钠组培养24 h 后,移去凝胶球,溶液呈绿色,原因是________________。 

              (3) 为探索固定化藻对含Zn2+污水的净化作用,应选用浓度为____海藻酸钠制备凝胶球。 

              (4) 图2中空白凝胶球组Zn2+浓度下降的原因是______。结合图1和图2分析,固定化藻的实验组2448h间Zn2+浓度下降速度较快的主要原因是______________;7296h间Zn2+浓度下降速度较慢的原因有___________________。 

            • 6.

              回答下列(一)、(二)小题:

                  (一)酶是生物体中生化反应的催化剂,在工业生产和食品加工中的应用日益广泛。为提高酶的利用率以及提高产品的纯度,一般需要对酶进行固定化处理:即将酶用物理或化学方法固定在______介质上,具体方法有______法、共价偶联法、包埋法和交联法等。

                  如图为装有固定化酶a的实验装置,其中b是反应柱,c是催化底物。


                  ①若装置中的固定化酶为α—淀粉酶,利用该装置进行淀粉水解实验时,在漏斗中加入反应液后的操作是______________________,以保证反应充分。对流出的液体用______检测,若呈现______色,说明淀粉被水解成糊精。

                  ②若a是固定化酵母,要想得到较多的酒精,加入反应液后的操作是______________________;装置中的长导管起的作用是____________________________。


                  (二)兔肝细胞中的基因E编码代谢甲醛的酶,现拟利用基因工程技术将基因E转入矮牵牛中,以提高矮牵牛对甲醛的代谢能力,请回答:

                  (1)从兔肝细胞中提取mRNA,在______酶的作用下形成互补DNA,然后以此DNA为模板扩增得到基因E。在相关酶的作用下,将基因E与Ti质粒连接在一起,形成______,再导入用氯化钙处理的______,用此农杆菌侵染矮牵牛叶片。将被侵染的叶片除菌后进行培养,最终得到转基因矮牵牛。其中培养过程正确的是______(A.叶片在含适宜浓度生长素的培养基上分化形成愈伤组织  B.愈伤组织在含细胞分裂素和生长素配比较高的培养基上形成芽  C.再生的芽在细胞分裂素含量较高的培养基上生根  D.愈伤组织在含适宜浓度植物生长调节剂的培养基上脱分化形成再生植株)。

                  (2)取转基因矮牵牛叶片,放入含MS液体培养基和适宜浓度甲醛且密封的试管中。将试管置于______上,进行液体悬浮培养液。一段时间后测定培养基中甲醛的含量,以判断基因E是否在转基因矮牵牛中正常表达。培养过程中液体培养基的作用:一是提供营养;二是______________________________________________,从而使叶片保持正常的形态。

            • 7.

              回答下列(一)、(二)小题:

                  (一)回答固定化酶有关问题

                  (1)制备固定化α-淀粉酶的过程中,将α-淀粉酶固定在石英砂上的方法是______,一定浓度的淀粉溶液经过______后,可使淀粉水解为______,遇碘显______色,此实验最适温度为______。

                  (2)关于固定化酶中的酶说法正确的是______。

                  A.酶的种类多样性,可催化一系列的酶促反应

                  B.酶被固定在不溶于水的载体上,可反复利用

                  C.酶作为催化剂,反应前后结构不改变,所以固定化酶可永远利用下去

                  D.固定化酶由于被固定在载体上,所以丧失了酶的高效性和专一性特点

                  (二)下图是培育表达人乳铁蛋白的乳腺生物反应器的技术路线。图中tetR表示四环素抗性基因,ampR表示氨苄青霉素抗性基因,BamHⅠ、HindⅢ、SmaⅠ直线所示为三种限制酶的酶切位点。

                  据图回答:

                  (1)图中将人乳铁蛋白基因插入载体,需用___________限制酶同时酶切载体和人乳铁蛋白基因。筛选含有重组载体的大肠杆菌首先需要在含______的培养基上进行。

                  (2)能使人乳铁蛋白基因在乳腺细胞中特异性表达的调控序列是______(填字母)。

                    A.ampR    B.启动子    C.终止子    D.复制原点

                  (3)过程①可采用的操作方法是______(填字母)。

                  A.农杆菌转化    B.显微注射    C.大肠杆菌转化    D.细胞融合

                  (4)过程②采用的生物技术是_____________。

                  (5)对早期胚胎进行切割,经过程②可获得多个新个体。这利用了细胞的______性。

                  (6)为检测人乳铁蛋白是否成功表达,可采用______(填字母)技术。

                  A.核酸分子杂交    B.基因序列分析    C.PCR D.抗原一抗体杂交

            • 8.
              颜色变化是生物实验结果的一项重要指标.下面学生实验操作或结果正确的是(  )
              A.检测生物组织中的还原糖时,加入斐林试剂后溶液由蓝色变为砖红色
              B.用苏丹Ⅲ染液对花生子叶薄片染色后,需用50%酒精洗去浮色
              C.取新鲜的菠菜叶,加少许SiO2和无水乙醇,研磨液呈黄绿色,由此判断菠菜叶用量太少
              D.在酵母细胞的固定化实验中,如果制作的凝胶珠颜色过浅,说明海藻酸钠的浓度偏小
            • 9. 在橘子成熟的季节,人们通常用它制作精油、果汁、果酒、果醋,简要流程如下:

              (1)图中步骤③利用橘皮提取精油过程中,为了提高出油率需要将橘皮干燥去水后,用_______浸泡处理,精油提取时一般采用________(填“蒸馏法”“萃取法”或“压榨法”)。
              (2)图中步骤②制备果汁时为了提高橘子出汁率,常用________酶处理果汁,并且采用_________技术来提高酶的使用效率、节约生产成本。
              (3)图中步骤④酿制果酒过程中,即使有少量醋酸菌混入,也因生活环境不适而不能存活,请说明理由_________________。

              (4)工业上在进行图中步骤⑥酿制果醋时,为了提高果醋产量,需要得到纯化的醋酸菌菌种,在菌种纯化过程中,使用__________接种方法可以同时进行计数,获得的纯化菌种可以用______的方法进行长期保存。

            • 10. 固定化酶具有易与反应物、产物分离,可反复利用,有利于产物的纯化等优点,因此在生产中得到广泛应用。酶在固定化过程中其活性会受固定的时间和温度影响,如下图所示。据此分析错误的是( )

              A.固定化酶更适合采用化学结合法和包埋法
              B.固定时间段相对活性较低的原因可能是酶未完全足量地被固定
              C.固定温度为50 ℃时,相对活性低的原因可能是高温使酶变性失活
              D.酶的最佳固定条件为固定时间3 h左右,温度45 ℃左右
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