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            • 1. 天然漆酶在造纸业中常作为漂白助剂使用,但天然漆酶的稳定性较差,在应用环境条件下易失活,某研究小组采用PA、SA、MA三种化学试剂对天然漆酶进行修饰,研究酶热稳定性的变化情况。请分析回答:
              (1)漆酶可以催化木质素的降解,不能催化纤维素的降解,这表明酶具有                         

              (2)下图1表示不同温度下漆酶对纸浆中两种染料的漂白效果的差异,漂白效果最适的温度是          ,   60℃时两条曲线重合的原因是            


              (3)采用PA、SA、MA三种化学试剂对天然漆酶进行修饰,实验如下:

              步骤

              A

              B

              C

              D

              天然漆酶

              Pa修饰酶

              SA修饰酶

              Ma修饰酶

              1

              加酶液

              0.5mL

              0.5mL

              0.5mL

              0.5mL

              2

              加缓冲液

              lmL

              lmL

              lmL

              lmL

              3

              加底物

              lmL

              lmL

              lmL

              lmL

              4

              条件控制

              分别置于50℃的水浴中,每隔lh取样,冰浴冷却 至0℃后,测定酶活力(天然漆酶活力记为100%)。

              步骤2中加缓冲液的目的是                          ,步骤4中冰浴的目的是                      实验结果如上图2所示,可以看出:50℃条件下,三种化学修饰                         (填“都能提高”或“都不能提高”或“部分提高”)酶的热稳定性。

              (4)根据上述实验分析,酶制剂                   (填“能”或“不能”)在最适温度下长期保存,原因是:                                        

            • 2.

              天然漆酶在造纸业中常作为漂白助剂使用,但天然漆酶的稳定性较差,在应用环境条件下易失活,某研究小组采用PA、SA、MA三种化学试剂对天然漆酶进行修饰,研究酶热稳定性的变化情况。请分析回答:

              (1) 漆酶可以催化木质素的降解,不能催化纤维素的降解,这表明酶具有____。 

              (2) 下图1表示不同温度下漆酶对纸浆中两种染料的漂白效果的差异,漂白效果最适的温度是___,60 ℃时两条曲线重合的原因是___________________。 

              图1图2


              (3) 采用PA、SA、MA三种化学试剂对天然漆酶进行修饰,实验如下:

                    分组

              步骤      

              A

              B

              C

              D

              天然漆酶

              PA修饰酶

              SA修饰酶

              MA修饰酶

              1

              加酶液

              0.5 mL

              0.5 mL

              0.5 mL

              0.5 mL

              2

              加缓冲液

              1 mL

              1 mL

              1 mL

              1 mL

              3

              加底物

              1 mL

              1 mL

              1 mL

              1 mL

              4

              条件控制

              分别置于50 ℃的水浴中,每隔1 h取样,冰浴冷却至0 ℃后,测定酶活力(天然漆酶活力记为100%)


              步骤2中加缓冲液的目的是_________,步骤4中冰浴的目的是__________。 

              实验结果如上图2所示,可以看出:50 ℃条件下,三种化学修饰______(选填“都能提高”“都不能提高”或“部分提高”)酶的热稳定性。 

              (4) 根据上述实验分析,酶制剂____(选填“能”或“不能”)在最适温度下长期保存,原因是___________________。 

            • 3. 下列关于固定化酶和固定化细胞的叙述中,正确的是
              A.温度和pH值对固定化酶的活性没有影响
              B.作为消化酶使用,蛋白酶制剂以口服的方式给药
              C.尿糖试纸含有固定化的葡萄糖酶和过氧化氢酶,可以反复使用
              D.固定化酶和固定化细胞相比,可以催化多步连续反应
            • 4.

              为了从三种微生物中获取高性能的碱性淀粉酶,某兴趣小组制备了三种微生物的淀粉酶提取液进行实验(溶液中酶浓度相同),实验步骤和结果如表所示:

              实验步骤

              试管1

              试管2

              试管3

              pH=8缓冲液(mL)

              1

              1

              1

              甲提取液(mL)

              0.8

               

               

              乙提取液(mL)

               

              0.8

               

              丙提取液(mL)

               

               

              0.8

              淀粉溶液(mL)

              2

              2

              2

              将各试管放入45 ℃的恒温水浴锅中保温适宜时间

              取出上述三支试管,冷却后滴入碘液

              颜色深浅程度

              + +

              注:“+”表示颜色变化深浅;“-”表示不变色。

              (1)为了使实验更具科学性,应增加一组对照实验,对照组应加入的液体及各自的体积是____________________________________,对照组的颜色深浅程度为________(用“+”或“-”表示)。

              (2)该实验的自变量是________________________,无关变量有____________________(至少写出两种)。

              (3)除用碘液检测淀粉的剩余量来判断实验结果外,还可用________试剂来检测生成物的量。若用该试剂检测,还需要________处理。

              (4)根据上述结果,三种淀粉酶活性强弱的顺序为________>________>________。这三种酶活性差异的根本原因是____________________。

            • 5.

              紫杉醇是从红豆杉属植物树皮中提取分离出来的具有独特抗肿瘤作用的物质,目前靠从树皮中提取紫杉醇远远不能满足需求。回答下列问题:

              (1)研究人员从红豆杉树皮中分离出具有产紫杉醇能力的内生真菌。将获得的菌丝体分别置于不同pH或温度的培养液中,并加入适量酶X溶液,经过一系列处理后,收集纯化的原生质体,结果如下。图表结果表明,酶X在________条件下活力最佳。


              酶解温度(℃)

              原生质体产量(×106个/mL)

              25

              12

              28

              22

              32

              31

              35

              26

              (2)培养基灭菌常采用__________法,灭菌后需要冷却到______________℃左右才能用来倒平板,平板冷却凝固后倒置其原因是_______________________________。

              (3)若将收集到的原生质体培养液稀释104倍后,各取_____ mL稀释液分别均匀涂布在3个固体培养基上培养,一段时间后统计菌落数分别为18、19、17。这种接种方法是____________________________,得到的菌落数____________(填“大于”“等于”或“小于”)接种的有活力的原生质体的数量。

              (4)Rag2基因缺失小鼠不能产生成熟的淋巴细胞。科研人员利用胚胎干细胞(ES细胞)对Rag2基因缺失小鼠进行基因治疗。其技术流程如图:


              ①步骤①中,在核移植前应通过____________去除卵母细胞的__________。 
              ②步骤②中,重组胚胎培养到__________期时,可从其内细胞团分离出ES细胞。 
              ③步骤③中,需要构建含有Rag2基因的表达载体。可以根据Rag2基因的__________设计引物,利用PCR技术扩增Rag2基因片段。用HindⅢ和PstⅠ限制酶分别在片段两侧进行酶切获得Rag2基因片段。为将该片段直接连接到表达载体,所选择的表达载体上应具有________________酶的酶切位点。 
              ④ES细胞在体外不同培养条件下,可以维持不分化的状态,也可以诱导分化为不同类型的组织细胞,因而是研究_______________的理想材料。

              ⑤上述治病方法虽然操作复杂,但效果较为可靠,称为__________________。

            • 6.

              研究酶的化学性质和作用机理,有助于了解生命活动的规律并指导生产和生活实践。 请回答下列问题:

              (1)甲、乙两种酶用同一种蛋白酶处理,酶活性与处理时间的关系如图1所示。甲酶的化学本质最可能是          

              (2)在实际生产中,固定化细胞技术实质上固定的是         。制备固定化酵母细胞时,常用的方法是下图2中[  ]         (填数字序号及名称)。




              (3)在生活实践中,酶制剂在洗衣粉中被广泛应用。某研究性学习小组为探究某品牌洗衣粉中酶催化作用的最适温度,设计了如下装置进行实验,并将结果用曲线图A、B表示(如图3)。


              ①使用该加酶洗衣粉的最适宜温度为                

              ②在0℃和75℃时,酶的催化效率基本都为零。但当温度再度恢复到45℃时,后者酶的催化能力已不能恢复,这是因为                                    

              (4)在现代生物工程中,可用酶在体外处理“蛋白质-DNA复合体”以获得包裹在蛋白质中的DNA片段信息,过程如图4所示。


              ①a、b过程中,酶作用的部位依次是                         

              ②若将获得的DNA片段用PCR技术进行扩增,与细胞内的DNA复制过程相比,利用PCR技术扩增DNA时所需酶的不同之处是                                          

            • 7. 回答有关微生物的问题.
              Ⅰ、凝乳酶是奶酪生产中的关键性酶.培育产高酶活力凝乳酶微生物菌种是目前最有前途的发展方向.图1为产高酶活力凝乳酶的枯草芽孢杆菌培育过程.

              (1)枯草芽孢杆菌的芽孢是 ______ .
              A.休眠体    B.营养繁殖体    C.孢子        D.营养体
              (2)图1所示的b过程的目的是为 ______ ,接种用的平板培养基在制备时需注意的是 ______ (多选).
              A.待培养基冷却至50℃左右时进行倒平板
              B.倒好的培养基和培养皿要进行高压灭菌处理
              C.等到平板培养基冷却凝固后才可以盖上培养皿的皿盖
              D.待平板冷却凝固约5-10min后将平板倒过来放置
              Ⅱ、在35℃、40分钟内能凝固1mL10%奶粉所需的酶量为一个酶活力单位(U).图2表示图1中提取得到的各种凝乳酶活力检测结果.
              (3)据图2所示,酶催化能力最强的是 ______ 组,而各组酶催化能力存在差异的原因是 ______ .
              (4)A2、A5组酶活力与A0组芽孢杆菌相同,两位同学对此做出了推测:
              ①同学甲:A2、A5组芽孢杆菌可能未发生基因突变,用 ______ 技术检测即可证实.
              ②同学乙:A2、A5组与A0组酶活力虽然相同,但也可能存在不同的基因突变,理论上的解释是 ______ .
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