【加试题】回答下列（一）（二）小题

（一）请回答黄花蒿植物组织培养的有关问题：

（1）黄花蒿的植物组织培养研究在我国已有数年历史。选取黄花蒿的茎段后，通常用体积分数为70%的酒精等药品对茎段进行________，然后再放入________溶液中浸泡，最后用无菌水冲洗。若外植体不慎被细菌感染，采用划线分离法纯化细菌，在4个区域内划线需要将接种环灼烧灭菌________次。

（2）植物组织培养的培养基可采用________灭菌。形成愈伤组织的过程中，除需无菌、营养和激素外，________等外界条件也很重要。

（3）2-3周后将生长健壮的丛壮苗在________（A.LB培养基+适宜浓度BA  B.LB培养基+适宜浓度NAA C.MS培养基+适宜浓度BA  D.MS培养基+适宜浓度NAA）上继续生根，形成完整植株。定植前，还需逐渐________进行炼苗。

（二）世界首个细胞核移植“三父母”婴儿已于2016年4月诞生，引起全球广泛关注。医生首先从母亲的卵细胞取出细胞核，并将其注入已去掉细胞核的捐赠者的卵细胞内，重组细胞就拥有了母亲的核DNA以及捐赠者的线粒体DNA，最后再利用精子进行体外受精。请回答：

（1）医生用这一方法同时培育了5个胚胎，因此母亲的卵巢事先需经________处理以获得更多的卵细胞；体外受精前，精子需经培养达到________状态。

（2）下列关于体外受精及胚胎工程的叙述，错误的是________

A．精子和卵细胞表面有特异性相互识别的蛋白

B．2-8细胞期的卵裂球每一个细胞都具有全能性

C．中胚层是由外胚层的细胞增殖分裂形成的

D．体外受精使用的培养液和早期胚胎培养液成分相同

（3）受精卵需经早期发育培养，才能完成植入或着床，通常移植的最适宜时期是________。胚胎发育到一定阶段，会形成滋养层细胞，这部分细胞将发育成________。

（4）在英国获得批准的 “三父母”技术则不同，是捐献者的卵细胞与父亲的精子经体外受精形成的受精卵去核后，注入父、母亲所形成受精卵的核，以剔除母亲线粒体中有缺陷的基因信息。该过程涉及的生物技术有体外受精、________、________和胚胎移植。

[生物——选修1：生物技术实践]

现有紫色不甜玉米（基因型为AABB）和白色甜玉米（基因型为aabb）两个品种，两对基因自由组合，如果要尽快培育出紫色甜玉米，可用单倍体育种的方法，请回答有关问题：

（1）可将两个品种的玉米进行杂交得到F₁，用F₁的花药进行离体培养，可得到________倍体花粉幼苗，这些花粉幼苗的基因型包括________，再经过人工诱导，即可获得所需的品种。与杂交育种相比该育种技术的最大优点是________。

（2）通过花药培养产生花粉植株一般有两种途径，一种是花粉通过________发育为植株，另一种是花粉在诱导培养基上形成愈伤组织，再将其诱导分化成植株，愈伤组织的特点是________。

（3）在花粉发育的过程中，只有某一个时期对离体刺激敏感。一般来说，在________期，花药培养成功率高。为确定花粉发育时期，常用________法染色，若花粉细胞核不易着色，需采用________法染色。

(1)图中A是__________ ，B是______。菊花茎尖培养成植物体的根本原因是______________________________________________________________。

(2)菊花的组织培养过程中，细胞增殖通过______分裂来完成。试管苗形成过程中要给予一定光照，其目的是________________________。要促进茎尖细胞分裂和生长，培养基中应有____________和____________两类激素。

(3)脱分化是指____________________________________________，脱分化和再分化这两个过程的进行还需要维持一定的外界条件，一是要有适宜的____________，二是要避免____________。否则植物组织培养就不能成功。

(4)这样培养成的试管苗的基因型是____________，这种繁殖方式是___________。

(1) 植物组织培养所用到的是固体培养基，原因是培养基中添加了________，培养基的主要成分是________、________和有机物。

(2) 培养基中添加有机物，说明外植体的“代谢”类型为________型。

(3) 菊花茎段组织培养过程中，配制MS固体培养基时，____________(必需添加、不必添加)植物激素。

(4) 应选用生理状况好的菊花嫩枝茎段作为______________，这是因为其更容易被诱导_____________________和_____________________这两个过程。

(5) 菊花茎段在接种前要用适当浓度的________________、_______________溶液进行表面消毒。

(6) 接种前，工作台要用体积分数为70%的酒精擦拭一遍，之后所有的接种操作都必须在________旁进行，并且每次使用器械后，都需要用________________灭菌。

(7) 接种后的锥形瓶最好放在________中培养。培养期间应注意: 定期________、控制好培养温度，并每日给予适当时间光照。

(1)对菊花来说,要选取　　　　的嫩枝来进行组织培养。对月季来说,适宜花粉培养的时期是　　　　期；为了选择该期的花药，通常选择_____  _______的花蕾。为确定花粉是否处于该时期,最常用的方法是　　　　。 

(2)在培养花粉的培养基中要加入一定的植物激素,常用的植物激素有　　　　　　　　。 

(3)某同学在培养过程中发现培养基上感染了几种细菌。若在以尿素为唯一氮源的培养基中加入　　　　指示剂培养几种菌后,指示剂变红就可以鉴定其中含有能够分解尿素的细菌。为了避免其他微生物对培养造成的影响,所以在进行接种时应注意　　　　。 

①接种室要消毒     ②只要戴口罩,操作时便可说话

③外植体可预先用体积分数为70%的酒精浸泡,取出用无菌水冲洗后,再用0.1%的氯化汞溶液消毒,并用无菌水冲洗干净    ④接种操作要在酒精灯火焰旁进行   ⑤接种完毕应立即盖好瓶盖

A.①②③④⑤            B.①②③④      C.①③④⑤         D.②③④⑤

(4)若要进行月季无病毒植株的培育，首先选择月季的____________作为外植体。从外植体到无病毒植株试管苗，要人为控制细胞的____________和____________过程。

(5)月季的花药培养与菊花的嫩枝组织培养不同,从植株产生的途径来说,花粉植株产生的途径除了图中所示外,还可以通过　　　　阶段发育而来,这两种发育途径的差别主要取决于               　。 

(6)不同植物对各种条件的要求往往不同,进行菊花组织培养一般将温度控制在　　　℃,并且对光照的控制为　　　　　　。 

如图表示菊花的嫩枝和月季的花药的离体培养过程，请回答：

（1）对菊花来说，要选取生长旺盛的嫩枝来进行组织培养，其原因是                          ；对月季来说，花粉发育的过程中适宜花粉培养的时期是单核期。为确定花粉是否处于该时期，最常用的镜检方法是                                  。

（2）在植物组织培养常用的培养基名称为                  。培养基中都要加入一定的植物激素，在培养过程中，使用激素的顺序和比例都影响细胞的发育，细胞分裂素／生长素的比值     （高，低，相当）有利于根的分化。

（3）两种植物组织培养都需要接种，接种前为确定培养基是否灭菌彻底，检测的方法是                    。

（4）月季的花药培养与菊花的嫩枝组织培养不同，从植物产生的途径来说，花粉植株产生的途径除了图中所示外，还可以通过          阶段发育而来，这两种发育途径的差别主要取决于                        。