基因工程是在现代生物学、化学和工程学基础上建立和发展起来的，并有赖于微生物学理论和技术的发展运用。基因工程基本操作流程如下图，请据图分析回答： 

（1）图中A是______；在基因工程中，②拼接过程所使用的DNA连接酶有两类。既可以“缝合”黏性末端，又可以“缝合”平末端的是____DNA连接酶。只能连接黏性末端的是_____DNA连接酶。 

（2）在上述基因工程的操作过程中，遵循碱基互补配对原则的步骤有_____。（用图解中序号表示） 

（3）将基因表达载体导入动物的受精卵中常用_____法。如果受体细胞是大肠杆菌，需要用____处理细胞，使之成为_____，才能吸收DNA分子。

（4）研究中发现，番茄体内的蛋白酶抑制剂对害虫的消化酶有抑制作用，导致害虫无法消化食物而被杀死，人们成功地将番茄的蛋白酶抑制剂基因导入玉米体内，玉米获得了与番茄相似的抗虫性状，玉米这种变异的来源可以看成是_____。 

（5）科学家在某种植物中找到了抗枯萎病的基因，并用基因工程的方法将该基因导入金茶花叶片细胞的染色体DNA上，经培养长成的植株具备了抗病性，这说明_____，若把目的基因导入该植物的叶绿体DNA中，则其产生的配子中____（填“一定”或“不一定”）含有该基因。

（6）假如用得到的二倍体转基因抗枯萎病植株自交，子代中抗病与不抗病植株的数量比为3：1时，则可推测该抗病基因整合到了____上（填“同源染色体的一条上”或“同源染色体的两条上”）。  

［生物一选修3：现代生物科技专题］

    现代生物科技不断发展，在治疗人类疾病方面发挥着越来越重要的作用。请回答下列相关问题：

    (1)囊性纤维病是一种遗传病，科学家们设计出基因治疗方法，利用经过修饰的腺病毒作为________，将治疗囊性纤维病的正常基因转入患者的肺组织中，这种直接向人体组织细胞中转移基因的治疗方法叫作________________。

    (2)胰岛素是治疗糖尿病的有效药，天然胰岛素注射后会堆积在皮下，需较长时问才能进入血液，科学家利用______________技术对胰岛素进行改造使其成为速效药，提高了胰岛素的治疗效果。

    (3)单克隆抗体的出现能有效解决传统抗体产量低、特异性差的问题。在其制备过程中，需要进行两次筛选，第一次筛选的目的是筛选出________________；如果将抗癌细胞的单克隆抗体与化学药物结合制成“生物导弹”，注入体内，借助单克隆抗体的________作用，能将药物定向带到癌细胞所在位置，在原位杀死癌细胞。

    (4)ES细胞的形态特征有_____________________________，功能上具有___________________。ES细胞可以治疗由于细胞坏死、退化和功能异常引起的人类疾病，如帕金森综合征，利用ES细胞可以被____________形成新的组织细胞的特性，移植ES细胞可使坏死或退化部位得以修复。

回答下列有关基因工程、细胞工程的问题：

（1）基因工程自20世纪70年代兴起后，飞速发展，目前已经成为生物科学核心技术，在农牧业、工业、环境和医药卫生等方面展示出美好的前景。

①植物基因工程：主要用于提高农作物的________以及改良农作物的品质和利用植物生产药物。

②动物基因工程：可以用转基因动物生产药物，科学家将药用蛋白基因与________等调控组件重组在一起，导入哺乳动物的受精卵中，进而培育出转基因动物，在其进入泌乳期后，通过分泌的乳汁获得所需药品，称之为________。

③医药卫生方面：可以利用基因工程生产药物，还可以治疗疾病。治疗遗传病最有效的手段是________。

（2）随着生物科技的进步，植物细胞工程作为一门新兴的生物技术，已经普遍应用于社会生产的方方面面。

①微型繁殖：植物组织培养技术不仅可以保持优良品种的________，还可以高效快速实现种苗的快速繁殖，选取植物________（部位）进行组织培养可获得脱毒植株，实现作物增产。

②作物新品种的培育：常规育种培育出一个可以稳定遗传的农作物优良品种，一般需要经过5～6年的连续筛选，而________可极大地缩短育种年限；在植物的组织培养过程中，由于培养细胞一直处于________状态，因此容易产生突变。

③神奇的人工种子：人工种子就是以植物组织培养得到的________（至少答两种）等为材料，经过人工薄膜包装得到的种子，人工种子在适宜条件下同样能够萌发长成幼苗。

去年冬季我国北方再次爆发流感，专家指出接种流感病毒疫苗仍是预防的有效措施。流感病毒为RNA病毒，M基因编码流感病毒表面抗原（M蛋白）。请回答下列问题：

（1）由病毒RNA通过________________可获得病毒DNA，若要通过PCR技术扩增M基因，前提是设计M基因对应的_____________ 。

（2）构建M基因表达载体所用的工具酶是 ____________________ 。若要将M基因表达载体导入到大肠杆菌细胞内，以大量生产疫苗，通常先用钙离子处理大肠杆菌，其目的是 _______________________。检测M基因是否转录出mRNA的具体方法是使用__________________与提取出的______做分子杂交。

（3）新型疫苗—“DNA疫苗”是将含M基因的重组表达载体直接导入人体内，在人体细胞内通过M基因的表达产生__________，刺激机体通过免疫过程产生_________，以提高机体的免疫能力。

癌症是一种由于基因突变的细胞发生异常大量累积而形成的。癌症基因疗法几乎没有耐药性，因此即使患者在化疗和放疗过程免疫力低下的情况下，也同样可以接受基因治疗。研究人员设计了三种治疗方案：

(1)方案一：研究人员从病人体内提取“T细胞”，利用______________技术在体外完成基因的转移，然后将成功转移的细胞进行______________增加细胞的数量，最后将这些改变了的“T细胞”成功移植回到患者体内，这些改变了的“T细胞”识别攻击癌细胞。

(2)方案二：研究人员利用修饰的腺病毒5号作为______________，将Endostatin基因和Interferon基因等有治疗效果的基因导入癌细胞内。对腺病毒进行修饰的目的是使病毒______________，但能够复制增加相关基因的数量。

(3)方案三：新型基因疗法JG-1是结合CDC6shRNA活性基因和癌抑制基因pl6这两种基因的强有力的疗法。“CDC6shRNA活性基因”的使用原理着眼于癌细胞具有______________的特性，它能消灭在癌细胞里存在的一种被称为CDC6的DNA的复制因子。然后通过pl6来修复抑癌基因Rb路径上的起效机制，并促使癌细胞在刚开始增殖阶段即停止增殖。

(4)对癌细胞进行体外培养时，可以形成_____________________________________________层细胞，这是由于癌细胞的细胞膜表面的糖蛋白减少的原因，使癌细胞培养时不具有原代培养的____________和______________的特点。

20世纪50年代，科学家受达尔文进化思想的启发，广泛开展了人工动植物育种的研究，通过人工创造变异选育优良的新品种。这一过程人们形象地称为“人工进化”。

(1)某农民在水稻田中发现一矮秆植株，将这株水稻连续种植几代，仍保持矮秆，这种变异主要发生在细胞分裂的________________________________________期。

(2)我国科学家通过航天搭载种子或块茎进行蔬菜作物的育种，用空间辐射等因素创造变异，这种变异类型可能属于________、________。与诱变育种方法相比，DNA重组技术最大的特点是________________。

(3)若以某植物抗病高秆品种与感病矮秆品种杂交，选育抗病矮秆品种，其依据的遗传学原理是________________________________。假设该植物具有3对同源染色体，用杂种一代花药离体培养获得单倍体，其单倍体细胞中的染色体(遗传物质)完全来自父本的概率为________。

(4)“人工进化”和自然界生物进化一样，它们的实质都是________________________。

科学家在研究玉米的粒色、糯性、甜性性状的遗传规律时，做了如下杂交实验。以紫冠、非糯质、非甜质（AABBDD)为母本,非紫冠、糯质、甜质（aabbdd）为父本，F₁表现出紫冠、非糯质、非甜质（AaBbDd），让F₁自交产生F₂，F₂代具体表现如下表，请分析回答：

（1）研究过程中发现，玉米种植区有些玉米早熟、生长整齐而高大、果穗大、籽粒多。由此分析，这些植株最可能是________。

A.单倍体 B.三倍体 C.杂交种

（2）已知籽粒颜色是由细胞中的色素决定的，但该色素不是蛋白质，那么从基因控制形状的角度分析，籽粒的紫色是通过____________________________________________途径实现的。

（3）根据上表，玉米的粒色和甜性的遗传________（填“符合”或“不符合”）基因的自由组合定律。让F₂中紫冠非甜质性状的个体间自由交配，后代中紫冠甜甜质性状个体所占的比例为________。

（4）由于玉米含赖氨酸较少，科学家采用了__________技术，将富含赖氨酸的蛋白质编码基因导入玉米体内，在玉米植株内成功表达的标志是_______________________________。

家蚕细胞具有高效表达外源基因能力。将人干扰素基因导入家蚕细胞并大规模培养，可以提取干扰素用于制药。

(1)干扰素的化学本质是____________。

(2)为使干扰素基因在家蚕细胞中高效表达，需要把来自cDNA文库的干扰素基因片段正确插入表达载体的_________和___________之间。

(3)基因表达载体除具备上述条件外，还需具有__________和________等元件。

(4)培养家蚕细胞时，贴壁生长的细胞会产生接触抑制。通常将多孔的中空薄壁小玻璃珠放入反应器中，这样可以_________________，增加培养的细胞数量，也有利于空气交换。

(5)“桑基鱼塘”生态系统能充分利用废弃物中的能量，形成“无废弃物农业”，这主要是遵循生态工程的_________________原理。同时，通过饲养家禽、家畜，栽培食用菌，提高农民经济收入，使保护环境和发展经济相互协调，这又体现了生态工程的___________原理。

如图所示为用农作物①和②两个品种分别培养出④⑤⑥⑦四个品种的过程．



（1）用①和②通过Ⅰ和Ⅱ过程培育出⑤的过程中，由③自交产生的后代中AA bb占的比例为____．
（2）通过Ⅲ和Ⅴ培育出⑤，该方法培育出的个体都（是/不是）______纯合体．
（3）由③培育出的⑥．该个体体细胞中的染色体组数目是________________个．IV过程需要的处理是_______________________________________。
（4）⑤通过Ⅵ过程培育出⑦的过程所依据的遗传学原理___________________．

下图是用多种生物学工程的方法来培育牛奶中含人乳铁蛋白的奶牛的过程。请回答：

(1)图中的A、B分别代表的技术是            _______________，A中所用培养液的成分除一些无机盐和有机盐外，还需添加维生素、激素、氨基酸、核苷酸等营养成分，以及          等物质。

(2)为了快速繁育产人乳铁蛋白的奶牛，通过对筛选子代进行核移植。获取的卵母细胞要培养到________________时期才能进行核移植，得到的动物称作_______________________

 (3)在体外胚胎培养时，应选用囊胚的________进行DNA分析，用于选择雌性胚胎。此期的胚胎也适于胚胎分割移植，同时获得更多的相同转基因奶牛，该过程应选择__________________的囊胚或桑椹胚进行操作。若对囊胚进行操作，应注意___________________。

(4)检测人乳铁蛋白基因是否成功表达的方法是                              。