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            • 1． 反刍动物，如牛和山羊，具有特殊的器官--瘤胃，在瘤胃中含有多种微生物，其中许多微生物能以尿素作唯一氮源．以下示意图是从瘤胃中分离出能够分解尿素的微生物流程．

              （1）进行①过程的目的是    ；②过程所使用的接种方法是    ．用该接种方法对微生物进行计数时，统计的菌落数往往比活菌的实际数目，原因是    ．
              （2）从用途上来说，Ⅰ号培养基属于    培养基，制备该培养基的步骤是：计算→    →灭菌→倒平板．由于瘤胃中的微生物多为厌氧菌，接触空气后会死亡，因此分离其中能分解尿素的微生物除了需要准备Ⅰ号培养基外，还要提供    的条件．
              （3）酶对化学反应的催化效率称为酶活性，图示的酶活性的高低可用    中    的减少量来表示．
              （4）萃取胡萝卜素的过程应避免明火加热，采用水浴加热的原因是    ．
              （5）如果要对具有优良性状的植物进行大规模种植可采用    方法，在对外植体进行接种前，需要进行制备MS 固体培养基和    两项工作．培养基中的生长素和细胞分裂素用量的比值    （填“高”或“低”）时，有利于芽的分化．
              难度：中等
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            • 2． 常见的酿酒酵母只能利用葡萄糖而不能利用木糖来进行酒精发酵，而自然界中某些酵母菌能分解木糖产生酒精，但是对酒精的耐受能力差．科学家利用基因工程培育了能利用这两种糖进行发酵且对酒精耐受能力强的酿酒酵母．
              （1）酿酒酵母代谢类型是    无氧呼吸的反应式为    
              （2）将自然界中采集到的葡萄带回实验室，用无菌水将葡萄皮上的微生物冲洗到无菌的三角瓶中，然后将瓶中的液体用    法接种于固体培养基上，在适宜的条件下培养，获得各种菌落．在葡萄酒酿造过程中，葡萄也需要冲洗，其主要目的是    ．
              （3）将培养基上的酵母菌菌株转接到    的培养基中，无氧条件下培养一周后，有些酵母菌死亡，说明这些酵母菌不能利用木糖发酵．从存活的酵母菌中提取DNA，经PCR技术获得目的基因，PCR技术获得同一种目的基因的原理是    ．
              （4）将目的基因连接到质粒上，该质粒具有尿嘧啶合成酶基因作为标记基因．将重组质粒导入酵母菌时，应选择缺乏    能力的酿酒酵母作为受体菌．
              （5）将上述获得的转基因酿酒酵母接种在以葡萄糖和木糖为碳源的培养基中进行发酵能力测试．随着发酵的持续进行，若该酿酒酵母能够存活，说明它能    ，即说明所需菌株培育成功．
              难度：中等
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            • 3． （2016春•遵义期中）某化工厂的污水池中，含有一种有害的、难于降解的有机化合物A．研究人员用化合物A、磷酸盐、镁盐以及微量元素配制的培养基，成功地筛选到能高效降解化合物A的细菌（目的菌）．实验的主要步骤如图所示．请分析回答问题．
              （1）接种前需要对培养基及培养皿等进行灭菌，常用的灭菌方法是    ．培养基中加入化合物A的目的是筛选    ．
              （2）实验需要振荡培养，由此推测“目的菌”的代谢类型是    ．
              （3）培养若干天后，应选择培养瓶中化合物A含量    的培养液，接入新的培养液中连续培养，使“目的菌”的数量    ．
              （4）转为固体培养时，为获得单菌落进行继续筛选，常采用平板划线法或    法，接种后，应将培养皿    （填“正放”或“倒置”）．
              （5）实验结束时，使用过的培养基应该进行    处理后，才能倒掉．
              难度：中等
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            • 4． 某化工厂的污水池中，含有一种有害的、难以降解的有机化合物A，研究人员用化合物A、磷酸盐、镁盐以及微量元素配制的培养基，成功地筛选到能高效降解化合物A的细菌（“目的菌”）．实验的主要步骤如下．请分析回答问题：
              （1）培养基中加入化合物A的目的是筛选    ，这种培养基属于    培养基．
              （2）“目的菌”生长所需的氮源和碳源是来自培养基中的    ，实验需要振荡培养，由此推测“目的菌”的代谢类型是    ．
              （3）培养若干天后，应选择培养瓶中化合物A含量    的培养液，接入新的培养液中连续培养，使“目的菌”的数量    ．
              （4）转为固体培养时，常采用    的方法接种，获得单菌落后继续筛选．
              （5）实验结束时，使用过的培养基应该进行    处理后，才能倒掉．
              难度：中等
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            • 5． 尿素是一种重要的农业肥料，但是不经过细菌的分解，就不能更好地被植物利用．生活在土壤中的微生物种类和数量繁多，同学们试图探究土壤中微生物对尿素是否有分解作用，设计了以下实验，并成功筛选到能高效降解尿素的细菌（目的菌），培养基成分如表所示，实验步骤如图所示，请回答下列问题：
              KH2PO41.4g
              Na2HPO42.1g
              MgSO4•7H2O0.2g
              葡萄糖10g
              尿素1g
              琼脂15g
              将上述物质溶解后，用自来水定容到1000m3
              （1）此培养基能否用于植物组织培养？    ，理由是    ．
              （2）培养基中氮源是    ，这种培养基在功能上属于    培养基，目的是只允许能合成的微生物生长，其他微生物均不能生长．
              （3）欲从土壤中分离获取上述特定微生物，可采用    法进行接种．
              （4）在以尿素为唯一碳源的培养基中加入    ，使指示剂变红色，而筛选纤维素分解菌的方法是    法．
              难度：中等
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            • 6． （2016秋•成都校级月考）微生物的分离、培养和计数是现代生物工程应用中的重要环节．图为大肠杆菌分离和培养过程中部分操作示意图．请分析回答下列问题：
              （1）实验过程中对培养基、培养皿、实验操作者的双手所采用的灭菌、消毒方法依次是    、    、    ．
              （2）培养大肠杆菌时，在接种前需要检测培养基是否被污染．对于固体培养基应采用的检测方法是    ．
              （3）图示是利用    法进行微生物接种，把聚集的菌种逐步    分散到培养基的表面．在灼烧接种环之后，要等其冷却后再进行划线的原因是    ．
              （4）关于图示的操作方法和结果，叙述正确的是    ．
              A．操作前要将接种环放在火焰边灼烧灭菌．
              B．划线操作须在火焰上进行．
              C．在5 区域中才可以提到所需菌落．
              D．在1、2、3、4、5 区域中划线前后都要对接种环灭菌．
              （5）植物组织培养所用的MS培养基和微生物培养所配制的培养基的主要区别是    ．某同学在进行组织培养过程中，发现只分裂而不分化出芽和根，可能原因是    ．
              难度：中等
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            • 7． 普通酵母菌直接利用淀粉的能力很弱，有人将地衣芽孢杆菌的a-淀粉酶基因转入酵母菌中，经筛选得到了可高效利用淀粉的工程酵母菌菌种（过程如图甲所示）．

              （1）图甲中，过程①需要的酶有    ．为达到筛选目的，平板内的固体培养基应以    作为唯一碳源．②、③过程需重复几次，目的是    ．
              （2）某同学尝试过程③的操作，其中一个平板经培养后的菌落分布如图乙所示．该同学的接种方法是    ；推测该同学接种时可能的操作失误是    ．
              （3）以淀粉为原料，用工程酵母菌和普通酵母菌在相同的适宜条件下密闭发酵，接种菌的发酵罐需要先排气，其原因是    ．
              难度：中等
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            • 8． 利用紫外线诱变选育高产β━胡萝卜素的三孢布拉霉负菌（单细胞真菌），未突变菌不能在含有浓度为10-5M的β━紫罗酮的培养基上生长．菌体随β━胡萝卜素含量增加从黄色加深至橙红色．图甲为选育及提取获得β━胡萝卜素流程．

              （1）三孢布拉霉负菌与细菌共同具有的细胞器是    ．
              （2）培养基中的葡萄糖为菌体生长提供    ；为选出高产突变菌种，还应在培养基中添加    ．
              （3）进行③过程时，应选取    色的菌落接种至液体培养基．为筛选纯化β━胡萝卜素产量高的菌种，采取重复    （填图甲中数字）过程．
              （4）固体平板培养基经过程②接种培养后的菌落分布如图乙所示．该同学的接种方法是    ；只有少数菌能生长形成菌落的根本原因是    ．
              （5）过程⑥是    ，用纸层析法鉴定提取的胡萝卜素粗品，结果发现颜色较浅，导致该现象的原因可能是萃取时，萃取剂使用量    ，提取的色素少．
              难度：中等
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            • 9． 为了检测饮用水中是否含有某种细菌，配制了如表培养基配方：
              蛋白胨乳糖蔗糖K2HPO4伊红美蓝蒸馏水pH
              10g5g5g2g0.4g0.065g100mL7.2
              （1）该培养基所含的碳源有    ，其功能是    ．
              （2）该培养基所含的氮源有    ，其功能是    ．
              （3）该培养基除含碳源、氮源外，还有微生物需要的营养物质是    ．
              （4）该细菌的同化作用类型是    ．
              （5）该培养基可用来鉴别哪种细菌？    
              A．霉菌        B．大肠杆菌        C．酵母菌        D．乳酸菌．
              难度：中等
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            • 10． 在农业生产中发现一种广泛使用的除草剂（含氮有机化合物）在土壤中不易降解，长期使用可污染土壤．为修复被该除草剂污染的土壤，可按下面程序选育能降解该除草剂的细菌（已知该除草剂在水中溶解度低，含一定量该除草剂的培养基不透明）．

              （1）制备土壤浸出液时，为避免菌体浓度过高，需将浸出液进行    处理．
              （2）要在长期使用该除草剂的土壤中分离目的菌，从物理性质、用途方面来看，上述培养皿中的培养基应具有的特点是：在     的培养基中加入    ．
              （3）在划线培养时，只有很少菌落出现，大部分细菌在此培养基上不能生长的主要原因是    ．
              （4）在固体培养基上形成的菌落中，无透明带菌落利用的氮源主要是    ，有透明带菌落利用的氮源主要是    ，据此可筛选出目的菌．
              （5）若实验接种时用的是稀释涂布平板法，在统计菌落数目时得到4个平板，统计的数目分别为21、213、257、278，则对数据处理后取平均值计数为    ，该方法往往比活菌的实际数目偏    （高/低）．
              难度：中等
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