如图表示微生物的接种实验中的一些步骤。请回答下列有关问题：

（1）步骤①前的一步操作是________。，该操作用到的主要仪器是________。

（2）实验步骤②的目的是________，步骤②、③之间还需要将接种环________。

（3）指出步骤④操作不当的地方________。

（4）分别用三个平板培养三种细菌（E.coli、S.albus、B.subtilis），然后在培养基上打出直径为3mm的孔，并在孔中加入一定浓度的甲抗生素，经过一定时间培养后，可以在孔的周围观察到一圈清晰区，此乃抑制细菌生长所致。测量清晰区的直径（如图所示），数据如下表。

①s.albus和B.subtilis对甲抗生素敏感的区别是________。

②有人感染E.eoli而患病，医生使用20μg／mL甲抗生素给予治疗，试用生物进化理论解释这种不明智的做法________。

③采养殖池中的水样1mL稀释100倍，吸取稀释后的水样1mL，接种于E.coli选择性培养基上培养。一段时间后观察菌落并计数，重复三次实验结果如图。该养殖池每mL水含有E.coli________个。

根据下面的实验装置图（图甲、乙）和果酒的生产工艺流程简图（图丙）回答问题：

（1） 图甲所示装置可用于提取________（填“橘皮精油”、“玫瑰精油”或“胡萝卜素”）。

（2） 制作果酒时可选用图乙的装置。为适当提高果酒的生产速率，进气口应_________；排气口要通过一个长而弯曲的胶管与瓶身相连，这样做的原因是_____________。

金黄色葡萄球菌是一种耐高浓度食盐的致病菌,为探究某天然植物抗菌液对金黄色葡萄球菌的抑菌作用,某兴趣小组利用高压蒸汽灭菌锅(如下图)等器材进行了相关实验。请分析回答下列问题:

（1）实验用的培养皿常用的两种灭菌方法是          ；为了减少灭菌后器皿被污染，灭菌前应该          。

（2）上图是灭菌锅及其局部剖面示意图，图中甲、乙、丙指示的依次是     。(填序号)

①安全阀、放气阀、压力表              ②放气阀、安全阀、压力表

③安全阀、放气阀、温度表              ④放气阀、安全阀、温度表

（3）下列关于高压蒸汽灭菌法的叙述错误的是         。

A.将装有培养基的灭菌包装入灭菌锅时,注意不要太挤,以免因影响蒸汽流通从而影响灭菌的效果

B.拧紧固定盖子的螺栓,要同时旋紧相对的两个螺栓,使螺栓松紧一致,不漏气

C.加热初期,必须把灭菌锅内的冷空气排尽

D.灭菌结束后,切断热源,旋松螺栓,打开盖子,取出灭菌物品

（4）将灭菌后的多组培养基均分为甲、乙两组,甲组加入适量的天然植物抗菌液,乙组加入等量的蒸馏水。将金黄色葡萄球菌菌液进行一系列的         后,采用       法分别接种到甲乙两组对应的培养基上,在适宜条件下培养一段时间后,观察比较不同组别的菌落数。由于金黄色葡萄球菌具有致病性,因此严格进行无菌操作,一方面是防止培养基被外界环境中的杂菌污染,另一方面也是为了防止         。

（5）在基本培养基中加入         可筛选出金黄色葡萄球菌。按照培养基的功能分类,

该培养基属于         培养基。

(一)酵母菌是来源于自然界的菌种，它种类繁多、分布很广、繁殖极快。如何筛选、纯化、诱导对葡萄酒发酵有利的酵母菌种，是酿酒师们长期研究的课题。

(1)像其他微生物一样，酵母需要适当的营养和合适的环境条件，培养时培养液中的营养物质主要有_____________________等。(要求回答4种营养物质)

(2)从含有酵母菌、醋酸菌、蓝藻的培养液中分离出酵母菌，最简单的培养方法是：在_______并且________条件下进行培养．

(3)为筛选和纯化酵母菌，根据用途应选用________培养基，常用的接种方法____________和 ____________．扩大培养过程中需要对酵母菌进行计数，取0.2mL样品，用固体培养基对其培养，最后统计了三个平板，菌落数分别是200、180、220．则样品中微生物的数量为_________个/mL．该统计结果_______（低于、高于）实际值,原因是___________________________________________。

(二)某植物园中种植的有菊花、玫瑰等花卉，还有葡萄、橘子等水果，其中玫瑰、橘子都可以作为植物芳香油提取的原料。请回答下列问题:

(1)植物芳香油的提取方法有___________、压榨和___________等。

(2)玫瑰精油适合用________法提取，其理由是玫瑰精油具有易挥发、难溶于水、化学性质稳定的特点。蒸馏时收集的蒸馏液不是纯的玫瑰精油，而是_______。

(3)橘皮精油的提取原料是橘皮，但橘皮易焦糊，宜采用_____法提取橘皮精油，其中将柑橘皮干燥去水，并用石灰水浸泡，其目的是_________________。

分离筛选降解纤维素能力强的微生物对于解决秸秆等废弃物资源的再利用和环境污染问题具有理论和实际意义。研究人员从土壤和腐烂的秸秆中分离筛选出能高效降解纤维素的菌株，并对筛选出的菌株进行了初步研究。

（1）对培养基进行灭菌的常用方法是___________。为在培养基表面形成单个菌落，若以________为接种工具，则用稀释涂布平板法进行接种。

（2）先将样品悬液稀释后涂在放有滤纸条的固体培养基上进行筛选得到初筛菌株。再将初筛菌株接种到以_________为唯一碳源的培养基培养2～5天，加入__________溶液后，依据出现的颜色反应进行筛选，观察菌落特征并测量______________。同时将初筛菌株制备成的菌液放入加有滤纸条的液体培养基中，恒温振荡培养8天，观察滤纸条的破损情况。结果见表。由表可知，8种菌株中1、3、7号菌株产酶能力较强，原因是___________。

注：①D_P=（D/d）²，其中d表示菌落直径（cm），D表示透明圈直径（cm）②“+”为滤纸边缘膨胀，“++”为滤纸整齐膨胀并弯曲，“+++”为滤纸不定形“++++”为成团糊状“+++++”为半清状

酵母菌是一种真菌，与人们的日常生活密切相关，也是现代生物技术研究常用的模式生物，请回答下列有关问题：

(1)土壤中富含各种微生物，将其浸出液接种到特定培养基上，可得到酵母菌。这一过程叫做_____________________；

不同培养基的具体配方不同，但一般都含有______________________________等营养物质。

(2)无菌操作是微生物培养最基本的要求，在培养酵母菌的过程中，对培养基、接种环所采用的灭菌方法分别是_________________________________。

(3)制作果酒时，将酵母菌加入到葡萄汁中，控制好发酵条件，10 d后得到散发着酒香的成品，此过程的原理是________________________________________________。

(4)某同学在做微生物实验时，不小心把圆褐固氮菌和酵母菌混在了一起（混合菌）。请你设计实验，分离得到纯度较高的圆褐固氮菌和酵母菌。

①实验原理：_____________________________________________________________

__________________________________________________________________。

②材料用具(略)

③主要实验步骤：

第一步：制备两种培养基，一种是不加________的培养基，另一种是加入________的培养基。分别分成两份，依次标上A、A'和B、B'，备用。

第二步：分别向A、B培养基中接种_____________。

第三步：接种后，放在恒温箱中培养3～4天。

第四步：分别从A、B培养基的菌落中挑取生长良好的菌种，接种到A1和B1培养基中。

第五步：接种后，把A1和B1培养基放入恒温箱中培养3～4天。

④回答问题：

为保证无菌，接种操作时应在_____________进行。

生物技术在日常生活中应用非常广泛，请回答下列与生物技术有关的问题：

（1）消毒和灭菌是两个不同的概念。下列适用于消毒处理的是___________。

①牛奶的工业生产      ②培养基    ③医用注射器 

④注射药物时的皮肤    ⑤接种环    ⑥手术刀

（2）对能分解尿素的细菌做进一步鉴定时，需要借助生物化学方法，在培养基中加入_________指示剂，细菌合成的________酶将尿素分解为氨，改变了培基的PH，使指示剂变红。

（3）实验室常采用_______法来检测泡菜中亚硝酸盐的含量。采用________法来鉴定提取的胡萝卜素粗品。

（4）从混杂的细菌中分离纯化所需菌种，常采用的接种方法有__________和__________。

（5）橘皮精油的提取一般采用__________法。

牛奶是微生物生长的良好培养基，未经消毒处理的牛奶中往往存在多种细菌，有些细菌可引起相关疾病，如具有高度耐盐性的金黄色葡萄球菌，可引起人类患肺炎、肠炎等疾病。因此，牛奶在饮用前需对其进行消毒，并对消毒后的牛奶中的细菌进行检测。已知金黄色葡萄球菌在血平板(培养基中添加适量血液)上生长时，可破坏菌落周围的红细胞，使其褪色。如图1所示为定性检测鲜牛奶中是否存在金黄色葡萄球菌的操作流程，请回答下列问题：

                                                                  图1

(1)对于生鲜牛奶可用巴氏消毒法进行消毒，使用这种方法的好处是           。功能上看该培养基属于____________培养基，用此培养基进行培养的主要目的是                      。

(2)在检测牛奶中细菌含量变化时进行了如图2所示操作：

                                             图2

若用该方法培养设置了3个培养皿，菌落数分别为35、33、34，则可以推测每毫升生牛奶中含细菌__________个，运用这种方法统计的结果往往较实际值________(填“偏大”或“偏小”),原因是__________________________________________________________________________________。

(3)金黄色葡萄球菌在血平板(培养基中添加适量血液)上生长时,可破坏菌落周围的红细胞,使其褪色。图1所示操作中在血平板上的接种方法是___,_______,经多次规范操作,重复实验,血平板上均出现____________的菌落,可初步证明鲜牛奶中存在金黄色葡萄球菌,但鲜牛奶供应商仍认为此菌并非鲜牛奶所携带,因此,要对本操作进行完善,完善的方案是                                 。

金黄色葡萄球菌是人类化脓感染中最常见的病原菌，可引起食物中毒、肺炎、肠炎等。某研究小组的同学用所学的微生物的实验室培养的方法进行“变质牛奶中金黄色葡萄球菌的分离和计数实验”，部分实验处理和结果如下图。（注:培养皿旁的数字代表菌落数目；实验室条件满足金黄色葡萄球菌的生长繁殖；实验操作规范；实验过程严格做好各项防护防扩散等工作）

请回答相关问题

（1）在实验室培养微生物，获得纯净培养物的关键是                    。

（2）据图，研究小组采用的是_______法分离和计数金黄色葡萄球菌。由样品到4号试管的操作中，第一步，将分别盛有9mL生理盐水的4支试管______，并编号1—4号；第二步，用移液管从样品中吸取1mL牛奶，注入1号试管中，充分摇匀；第三步，重复第二步骤操作，以此类推，4号试管的稀释倍数是_____。

（3）资料显示，金黄色葡萄球菌有高度的耐盐性，可在10%—15%NaCL的肉汤中生长;本实验可配制含10%氯化钠的培养基，使之成为_______培养基，以利金黄色葡萄球菌的生长，抑制或阻止其他微生物的生长

（4）通过观察菌落特征可区分不同种类微生物，这些特征包括菌落的________、     、     和     等方面；在统计菌落数目时，需按照菌落计数的要求计数，以保证计数结果准确。据图可得出1mL牛奶样品中金黄色葡萄球菌的活菌数为_____。