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            • 1.

              传统发酵技术和微生物分离、纯化过程中,无菌操作是微生物接种技术的关键。某实验小组欲从污水污染的污泥中筛选出脲酶细菌(脲酶可将尿素分解为氨)。回答下列问题:

              (1)配制培养基时各种成分在溶化后分装前一般需要先_______;平板冷却凝固后一般要_______放置,这样操作的目的是____________________。

              (2)在菌株筛选过程中,应将污泥样品稀释液接种于______________固体培养基上;并加入_________指示剂加以鉴别。平板划线法时在第二次及其后的划线操作时,总是从____________开始划线,原因是_______________________________ 

              (3)如何设计实验判断培养基是否被污染?_________________________________________________________

              (4)对于频繁使用的菌种,可以采用______的方法进行保藏,但该方法具有________________________缺点。

            • 2.

              磷是植物生长发育的必需元素,土壤中存在大量溶磷微生物,能够将难溶性磷酸盐转化为植物可吸收利用的有效磷,这种微生物统称为溶磷微生物,溶磷微生物主要包括溶磷细菌和溶磷真菌,溶磷真菌的溶磷效率远远高于细菌,某实验小组通过制备含有难溶性磷酸盐的培养基,根据微生物溶磷后形成的溶磷圈筛选出溶磷真菌,回答下列问题:

              (1)和液体培养基相比,用于分离溶磷真菌的培养基需要加入的特殊物质(成分为多糖)是__________,其作用是_________________,实验室对培养基灭菌的常用方法是______________;菌落是指_______________,菌落特征包括菌落的______________等(至少答出3个)。配制培养大肠杆菌的培养基,一般都含有水、碳源、无机盐和氮源等四类营养物质。试从细胞的元素组成分析,其原因是____________。配制培养基时除了满足基本的营养条件外,还需满足微生物生长对特殊营养物质、____________的要求。由于实验中使用的平板较多,为避免混淆宜在使用前用记号笔在培养皿__________做好标记。

              (2)该实验小组先制备一定稀释梯度的土壤悬浮液,将土壤悬浮液涂布于含有难溶磷酸盐的培养基中进行培养,然后分离出产生溶磷圈的菌株,在该培养基中还需要加入一定的抗生素,其作用是______________,分离时要每隔24h统计一次溶磷圈的数目,直至溶磷圈的数目不再发生变化,其目的是防止_____________________;分离出来的溶磷微生物可利用______________法进行长期保存,需在温度为______________条件下保存。

              (3)接种时可选用的工具是_______,接种过程中应采用无菌技术,其目的是防止______________。若涂布后培养一段时间后,发现培养基上的溶磷圈连接成一片,则导致该现象的可能原因是___________________________________。

              (4)该实验小组筛选出两株溶磷真菌,溶磷真菌在培养基上形成的菌落的直径(d)和溶磷圈的直径(D)大小如下表所示,据表分析溶磷能力较强的菌株是_______,最容易被真菌利用的磷酸盐是_______。

              菌株

              磷酸盐

              Ca3(P04)2

              Zn3(P04)2

              FePO4

              D

              d

              D/d

              D

              d

              D/d

              D

              d

              D/d

              P1

              5.9

              3.7

              1.59

              2.6

              0.9

              2.89

              6.4

              5.2

              1.23

              P2

              5.8

              3.3

              1.76

              3.8

              1.2

              3.17

              6.6

              5.1

              1.29

            • 3.

              某同学配制含琼脂的牛肉膏蛋白胨培养基后,对培养基和培养皿进行高压蒸汽灭菌,当培养基温度下降到50℃时,在酒精灯火焰附近倒平板,待培养基冷却至室温,按下表处理。将处理完毕的培养皿置于适宜温度下培养2~3天,观察每个培养皿中的菌落特征和数目。回答下列问题:


              (1)上述实验的实验目的是             。若E组的培养基表面有菌落生长,说明了         
              (2)培养基中的牛肉膏和蛋白胨主要为微生物生长提供             。 “在酒精灯火焰附近”进行相关操作是为了         
              (3)实验过程特别强调温度控制,请简要说明下列温控措施的目的:
                ①“待培养基冷却至室温”的目的有         
                ②“将处理完毕的培养皿置于适宜温度下培养”的目的是         
              (4)培养微生物时将培养皿倒置的目的是           。实验结束后,对使用过的培养基应进行     处理。
            • 4. 某些农作物秸秆富含纤维素,纤维素经过水解可以形成葡萄糖,葡萄糖再经过发酵可以生产酒精.如图是利用农作物秸秆生产酒精的大致流程,请回答下列问题:

              (1)纤维素分解菌能合成纤维素酶,纤维素酶是一种复合酶,一般认为它至少含有三种组分,其中前两种酶使纤维素分解成    ,第三种酶将它分解成葡萄糖.
              (2)图中发酵阶段常用的菌种是酵母菌,在酒精发酵时一般将温度控制在    ℃,方程式可表示为    ,发酵后是否有酒精产生可以用    来检验.
            • 5. (2016•大庆一模)纤维素为白色、无气味的纤维状结构物质,不溶于水,也不溶于一般有机溶剂,而纤维素分解菌能够产生纤维素酶分解纤维素.下表为鉴别纤维素分解菌的培养基配方,如图为培养菌落的染色结果,根据以下设问,回答相关问题:
              CMC-Na酵母膏KH2PO4琼脂土豆汁
              5g~10g1g0.25g15g100mL
              (1)由配方表可知,培养微生物通常需要        、水、无机盐和生长因子五类成分.从土壤中分离纤维素分解菌,最好选择在富含    的环境中采集土样.
              (2)纤维素分解菌可分泌纤维素酶,其为一种复合酶,至少包括三种组分,即    酶、Cx酶和    酶.
              (3)参考图,在筛选纤维素分解菌的过程中,通常用    染色法,这种方法可通过是否产生    来对纤维素分解菌进行初步筛选,因该染料并不和纤维素水解后的    和葡萄糖发生颜色反应.
              (4)某研究小组培养纤维素分解菌,接种时应通过    法,才可得到右图所示结果.若已知2菌落中为淀粉分解菌,而1和3两种菌为纤维素分解菌或色素分解菌.请你设计一个简便的方法来鉴别1和3.
                  
            • 6. 有些微生物能合成纤维素酶,通过对这些微生物的研究,使人们能够利用秸秆等废弃物生产酒精,用纤维素酶处理服装面料等.研究人员用化合物A、硝酸盐、磷酸盐以及微量元素配制的培养基,成功地筛选到能产生纤维素酶的微生物.分析回答问题:
              (1)培养基中加入的化合物A是    ,为微生物的生长提供    ,这种培养基属于    培养基.
              (2)为了筛选出能产生纤维素酶的微生物,向培养基中加入    
              (3)在筛选出能产生纤维素酶的微生物之前,可用液体培养基培养,增加微生物的浓度.若获得纯净的菌株,常采用平板划线的方法进行接种,此过程所用的接种工具是    ,操作时采用    灭菌的方法;还可用    方法操作.
              (4)实验结束后,使用过的培养基应该进行灭菌处理才能倒掉,这样做的目的是    
            • 7. 某生物兴趣小组打算进一步探究纤维素分解菌的作用,请帮助完成相关实验设计:
              (1)问题:纤维素分解菌能否分解淀粉呢?
              (2)假设:    
              (3)实验步骤
              ①配制两份相同的含淀粉的且适合纤维素分解菌生长的液体培养基.
              ②向其中一组培养基    ,另一组不做处理.
              ③将上述两组培养基置于相同且适宜条件下培养一段时间.
              ④向两组培养基中分别滴加3滴碘液,观察颜色变化.
              (4)实验结论:
              ①若    ,则假设成立.
              ②若    ,则假设不成立.
            • 8. 美国科学家发现了一种能将溶解在水中的铀还原成难以溶解的铀的地杆菌,可缩小铀污染的范围,而其他的细菌则不能在含铀的环境中生存.科学家为了研究这种地杆菌的生理特性,需对其进行分离和培养.请回答:
              (1)培养基中一般含细菌生长所需的水、无机盐、 等.制备培养基时常用的灭菌方法是 灭菌.接种时使用的接种环灭菌方法是 灭菌.
              (2)为分离出能够还原铀的地杆菌,可在培养基中加入  , 从用途上看,这种培养基称为 培养基.
              (3)对地杆菌计数时,常采用的方法是 法.在稀释倍数为106倍下涂布了三个平板(每次取0.1mL),统计菌落数分别为240、250、260,则稀释前1mL菌液中所含细菌为 个.
              (4)获取地杆菌后如要临时保存,可将其接种在 培养基上,等长成菌落后放在4℃的冰箱中保存.
            • 9. 炭疽杆菌是一类需氧芽胞杆菌,其代谢过程会将大量的代谢产物排出胞外.由炭疽杆菌引起的炭疽病是一种人畜共患、死亡率较高的急性传染病.对炭疽病疑似患者,可根据噬菌体的宿主专一性,通过如图所示的实验确诊.请据图回答下列问题:

              (1)噬菌体的主要化学成分是 ,上述实验中噬菌体与炭疽杆菌的种间关系属于
              (2)微生物接种的方法很多,最常用的是 ,经上述方法获得的纯种微生物如需长期保存,可采用 的方法.
              (3)②是将分离培养获得的可疑菌挑选出来进行接种,此过程中对配制的液体培养基等需采取的灭菌方法是 ,该培养基所用的碳源为 (无机碳/有机碳).
              (4)在过程⑧中细菌大量繁殖,并因为 的积累而使液体培养基变浑浊.取培养后的等量菌液加入A、B试管,再将如图处理后的两试管放在35℃环境下培养6小时后观察,若实验组液体培养基的浑浊度比对照组 (高或低),则证明疑似患者被炭疽杆菌感染;反之则排除.
            • 10. 下列关于应用生物技术获得生物产品的过程,请回答下列问题:
              (1)酿酒时某同学尝试用罐头瓶制作果酒,在培养过程中,每隔12h左右将瓶盖拧松一次,此后再拧紧,这样做的主要目的,一是 ,二是避免氧气进入和杂菌污染.在酸性条件下,可用 来检测果酒发酵是否成功.如下图是采用纯化酵母菌培养的两种接种方法接种后培养的效果图.

              判断图A所用接种方法的依据是 ,图B的接种方法是
              (2)大量扩增DNA时可用PCR技术,该技术利用了DNA的 原理,通过控制 来控制双链的解聚与结合.PCR扩增得到的DNA序列长度是固定的,原因是 .
              (3)玫瑰在人们生活中具有多种用途.某同学在进行玫瑰组织培养时,可以选取生长旺盛的嫩枝做 , 并要进行 处理.
              (4)在玫瑰精油的提取实验中用(方法)提取,收集的乳浊液水油分层,需向其中加入 . 要除去分液得到的油层中的水分,还需向其中加入无水 .
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