2.
下图是利用工程菌(大肠杆菌)生产人生长激素(由人垂体细胞产生的一种蛋白质类激素)的实验流程。所用的pBR322质粒含有限制酶pstⅠ、EcoRⅠ和HindⅢ的切点各一个,且三种酶切割形成的黏性末端各不相同,而Ampr表示青霉素抗性基因,Tetr表示四环素抗性基因。请据图回答以下相关问题:
(1)过程①所用细胞是 ,过程②所用的原料和酶分别是 。
(2)人生长激素基因在经③处理之前需经过PCR扩增,扩增前需要人工合成 种引物备用,扩增时应在PCR扩增仪中加入 用以催化互补链的合成。
(3)若人生长激素基因两端具有限制酶pstⅠ识别序列,切割人生长激素基因和pBR322质粒时只用限制酶pstⅠ的目的是确保产生 ,切割时断开的键是 。
(4)过程④所用的酶是 ;过程⑤应选择 型的大肠杆菌作为受体细胞,为提高转化率,首先用 处理大肠杆菌使其成为感受态细胞。
(5)若用限制酶PstⅠ切割,完成过程④、⑤后,将三角瓶内的大肠杆菌先接种到甲培养基上,再将甲培养基上的单个大肠杆菌接种到丙培养基上,待形成12个菌落后,将相应菌落的一部分转接到乙培养基的相同位置上。一段时间后,菌落的生长状况如图乙、丙所示。将三角瓶内的大肠杆菌接种到甲培养基上的目的是筛选含 基因的大肠杆菌;接种到培养基乙上能存活的是导入含 质粒的大肠杆菌。生产人生长激素的工程菌应从丙培养基的菌落中选取,选取的依据是 。