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            • 1．

              某化工厂的污水池中含有一种有害的难以降解的有机化合物A。研究人员用化合物A、磷酸盐、镁盐以及微量元素配制的培养基，成功筛选到能高效降解化合物A的细菌（目的菌）。实验的部分步骤如下图所示。请回答下列问题：

              （1）培养基中的化合物A能为目的菌的生长繁殖提供________，筛选过程中所用的培养基的常用灭菌方法是________。

              （2）实验中“重复多次”的目的是________，为了达到分离纯化目的菌的目的，在固体培养基上接种的方法可以是________。

              （3）实验过程中振荡培养，“振荡”的目的是________。

              （4）实验结束后，使用过的培养基应该进行灭菌后才能倒掉，目的是________。

              （5）某同学计划统计污水池中“目的菌”的数目，需要设计________作为对照组，此对照组的目的是证明________。

              难度：较难
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            • 2． （每空2分，共18分）有些细菌可分解原油，从而消除由原油泄漏造成的土壤污染。某同学欲从受原油污染的土壤中筛选出高效降解原油的菌株。回答问题：

              （1）在筛选过程中，应将土壤样品稀释液接种于以 ________________为唯一碳源的固体培养基上，从功能上讲，该培养基属于___________培养基。

              （2）纯化菌种时，为了得到单菌落，常采用的接种方法有平板划线法和稀释涂布平板法,这两种方法的共性都是将_______________________________________,从而能在培养基表面_______________________________________。

              （3）为了筛选出高效菌株，可比较单菌落周围分解圈的大小，分解圈大说明该菌株的降解能力_________。

              （4）通常情况下，在微生物培养过程中实验室常用___________法对培养皿等进行灭菌、____________________法对培养基进行灭菌。无菌技术要求实验操作应在酒精灯                __________附近进行，以避免周围环境中微生物的污染。

              （5）实验室培养微生物过程中，对于不再使用的菌液或培养基要经过_______处理后，才能进行清洗。

              难度：较难
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            • 3． 回答有关微生物的问题．
              Ⅰ、凝乳酶是奶酪生产中的关键性酶．培育产高酶活力凝乳酶微生物菌种是目前最有前途的发展方向．图1为产高酶活力凝乳酶的枯草芽孢杆菌培育过程．

              （1）枯草芽孢杆菌的芽孢是    ．
              A．休眠体    B．营养繁殖体    C．孢子        D．营养体
              （2）图1所示的b过程的目的是为    ，接种用的平板培养基在制备时需注意的是    （多选）．
              A．待培养基冷却至50℃左右时进行倒平板
              B．倒好的培养基和培养皿要进行高压灭菌处理
              C．等到平板培养基冷却凝固后才可以盖上培养皿的皿盖
              D．待平板冷却凝固约5-10min后将平板倒过来放置
              Ⅱ、在35℃、40分钟内能凝固1mL10%奶粉所需的酶量为一个酶活力单位（U）．图2表示图1中提取得到的各种凝乳酶活力检测结果．
              （3）据图2所示，酶催化能力最强的是    组，而各组酶催化能力存在差异的原因是    ．
              （4）A2、A5组酶活力与A0组芽孢杆菌相同，两位同学对此做出了推测：
              ①同学甲：A2、A5组芽孢杆菌可能未发生基因突变，用    技术检测即可证实．
              ②同学乙：A2、A5组与A0组酶活力虽然相同，但也可能存在不同的基因突变，理论上的解释是    ．
              难度：较难
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            • 4． （2016•奉贤区一模）I．培养基的配制与培养是微生物实验中的一个重要环节．
              （1）图1所示的是制备固体培养基时的实验操作步
              骤之一，一般称为    ．配制培养基时各种成分在熔化后分装前必须进行    ，培养基在接种前要进行    灭菌，灭菌是否彻底或是否被污染需要检测，方法是    ．
              Ⅱ．从自然菌样中筛选理想菌种的步骤是：采集菌样    富集培养    纯种分离．
              （2）不同微生物的生存环境不同，获得理想微生物的第一步是从适合的环境采集菌样，然后再按一定的方法分离、纯化．培养嗜盐菌的菌样应从    环境采集．
              （3）富集培养指创设仅适合待分离微生物旺盛生长的特定环境条件，使其群落中的数量大大增加，从而分离出所需微生物的培养方法．对产耐高温淀粉酶微生物的富集培养应选择    的培养基，并在    条件下培养．
              （4）图2和图3是采用纯化微生物培养的两种接种方法接种后培养的效果图解，获得图2效果的接种方法是    ，获得图3效果的接种方法是    ．
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            • 5． 纤维素是地球上含量最丰富的多糖类物质，下列是关于分离土壤中能够分解纤维素的微生物的相关问题，请回答：
              （1）自然界中纤维素含量最高的天然产物是    ．某些微生物能分解纤维素，因为他们能产生纤维素酶，纤维素酶至少包括三种组分，即    ．
              （2）实验室中筛选微生物的原理是    ．筛选纤维素分解菌应先将从土壤中获得的微生物，在以纤维素为唯一碳源的    （填“固体”或“液体”）培养基上进行选择培养，选择培养的目的是    ．
              （3）用刚果红染色法对分离出的微生物进行筛选，刚果红可以与纤维素形成    ，当纤维素被纤维素酶分解后，培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的    ．从培养基的用途上分类，刚果红培养基属于    培养基．
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            • 6． 生物技术的广泛应用，不仅带来了较好的经济效益和社会效益，更使人们的生活变得更加丰富多彩．
              （1）工业生产上通常采用微生物发酵技术获得果胶酶，选用的微生物通常是    ，在提取果胶酶后，首先要检测    ，以便将其更好的应用与生产实践和科学研究．
              （2）微生物在果酒、果醋、腐乳、泡菜等食品加工方面应用广泛，其中与泡菜制作有关的微生物是    ．在果酒基础上酿制果醋的过程中，除需接种     （微生物）外，还必须保持    条件．
              （3）配制固体培养基时各种成分在溶化后分装前必须进行    ，接种前要进行    ，在整个微生物的分离和培养中，一定要注意在    条件下进行．
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            • 7． 尿素是一种重要的农业肥料，但是不经过细菌的分解，就不能更好地被植物利用．生活在土壤中的微生物种类和数量繁多，同学们试图探究土壤中微生物对尿素是否有分解作用，设计了以下实验，并成功筛选到能高效降解尿素的细菌（目的菌），培养基成分如下表所示，实验步骤如图所示，请回答下列问题：

              KH2PO41.4g
              Na2HPO42.1g
              MgSO4•7H2O0.2g
              葡萄糖10g
              尿素1g
              琼脂15g
              将上述物质溶解后，用自来水定容到1000m3
              （1）此培养基能否用于植物组织培养？    ，理由是    ．
              （2）培养基中氮源是    ，这种培养基在功能上属于    培养基，目的是只允许能合成    的微生物生长，其他微生物均不能生长．
              （3）欲从土壤中分离获取上述特定微生物，可采用    法进行接种．
              （4）在以尿素为唯一碳源的培养基中加入    ，使指示剂变红色，而筛选纤维素分解菌的方法是    法．
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            • 8． 运用所学知识回答下列与生物技术实践相关的问题．

              （1）自古酒就与人类生活息息相关．在图甲所示两发酵瓶中装入等量的葡萄汁进行果酒制作实验，若在A装置的通气口补充无菌空气，那么一段时间后，能获得葡萄酒的是    装置，发酵是否成功可用    对发酵产物进行检验确认．
              （2）图乙是胡萝卜素提取粗品鉴定结果示意图．点加提取样品的是    点，点加标准样品的是    点，该鉴定实验的方法叫做    ．
              （3）微生物培养时，如果想让培养基内只生长真菌，则可用含    的培养基；后期进行菌落统计时，一般选择菌落数在    间的平板进行计数．
              （4）与微生物培养相比，植物组织培养的培养基常需添加的植物激素是    ．
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            • 9． 某小组同学为了调查垃圾处理场附近土壤中细菌污染情况，做了包括制备培养基、灭菌、接种及培养、菌落观察计数等系列实验操作，请回答与此实验相关的问题．
              （1）培养基中含有的蛋白胨、淀粉分别为细菌培养提供了    和    ．
              （2）对培养基进行灭菌，应该采用的方法是    ．
              （3）将取自不同区域的土壤浸出液分别稀释涂布到不同的平板上，置于37℃    培养20小时后，观察到平板上有形态和颜色不同的菌落，这说明土壤样品中有    种细菌．一般说来，菌落总数越多，土壤遭受细菌污染的程度越    ．
              （4）如果要分离土壤中的纤维素分解菌，经常用     的选择培养基，若要鉴别是否分离出了纤维素分解菌则应使用加入了    的鉴别培养基．
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