[生物——选修1：生物技术实践]

根据所学知识，回答下列问题

（1）用萃取法提取胡萝卜素的原因是________。萃取的效率主要取决于萃取剂的________，同时还受原料颗粒的大小、含水量等条件的影响；在对新鲜胡萝卜进行干燥时，要注意控制________，否则会引起胡萝卜素的分解。

（2）从橘皮中能提取出橘皮油，为提高出油率，需要将橘皮干燥，并用________浸泡。为探究浸泡时间对出油率的影响，应设置________作为对照。

（3）酒精发酵时，当酒精含量达到12～16％时，发酵就停止了。为获得耐酒精的酵母菌，用涂布器在含高浓度酒精的培养基上进行________操作。这种培养基只允许耐酒精的微生物生长，该培养基称作________培养基。再根据菌落的________、隆起程度和颜色等菌落特征获得酵母菌。

下图是实验室使用某种接种方法在培养基上培养某种微生物的结果，相关叙述不正确的是（ ）

能合成脲酶的微生物所需要的碳源和氮源分别是

分离筛选降解纤维素能力强的微生物，对于解决秸秆等废弃物资源的再利用和环境污染问题具有重要意义。研究人员用化合物A、硝酸盐、磷酸盐、硫酸盐、KCl、酵母膏以及水解酪素配制的培养基，成功地筛选到能产生纤维素酶的微生物。请回答下列问题：

(1)培养基中加入的化合物A是________。本实验将样品稀释涂布到鉴别培养基之前要进行选择培养，目的是______________________。

(2)为了筛选出能产生纤维素酶的微生物，向培养基中加入________溶液，等培养基上长出菌落后，能产生纤维素酶的菌落周围会出现________。

(3)为在培养基表面形成单个菌落，若以接种环为工具，则用________法进行接种。若用稀释涂布平板法进行接种，在涂布平板时，滴加到培养基表面的菌悬液量不宜过多的原因是________________________________________________________________________。

(4)用三种菌株对秸秆进行处理，并在第5天和第10天对秸秆和秸秆中含有的纤维素、半纤维素以及木质素等组分的降解情况进行了测定(结果如图)。

据图分析可知，三种菌株对________的降解作用最强。与第5天结果相比，第10天秸秆各组分中________的降解率变化最大。

耐冷菌是生活在低温环境下的一类微生物，在0～5℃可生长繁殖，最高生长温度一般在30℃左右。关于耐冷菌的下列选项中错误的是(　　)

(1)要从土壤中筛选出能高效分解PVA的细菌，应采用以______________作为唯一碳源的选择培养基，实验中还应设置对照组。将菌液稀释相同的倍数，对照组培养基上生长的菌落数目应明显______________ (填“多于”或“少于”)选择培养基上的数目，从而说明选择培养基具有筛选作用。

(2)要测定土壤稀释液中微生物的数目．可在显微镜下用______________计数板直接计数。若将100 mL含有PVA分解菌的土壤样品溶液稀释10⁴倍后，取0.1mL稀释液均匀涂布在选择培养基表面，测得菌落数的平均值为160个，空白对照组平板上未出现菌落，则100 mL原菌液中有PVA分解菌_________个，该方法的测量值与实际值相比一般会___________(填“偏大”“偏小”或“相等”)。

(3)要鉴定分离出的细菌是否为PVA分解菌，培养PVA分解菌的培养基中除了加入必需的营养物质外还需要加入______________，用于鉴别PVA分解菌。要比较不同菌株降解PVA能力的大小，用含相同PVA浓度的上述培养基来培养不同菌株．一定时间后，通过测定______________来确定不同菌株降解PVA能力的大小。

苯酚及其衍生物广泛存在于工业废水中，对环境有严重危害。小明同学准备依据下图操作步骤，从处理废水的活性污泥中分离筛选酚降解高效菌株。请回答下列问题：

（1）酚降解菌富集培养基含有蛋白胨、K₂HPO₄、MgSO₄、苯酚和水，其中可作为碳源的有________________。

（2）将采集到的样品接种培养，苯酚用量应随转接次数增加而逐渐____________，

以达到富集酚降解菌的目的。若上图平板中菌落过于密集，应进一步_____________，以便于菌落计数与分离。制备平板培养基时除了需要水、营养物质外，还必须添加_____________。

（3）下图为连续划线法示意图，在图中__________（填图中序号）区域更易获得单菌落。

（4）采用比色测定法（使用苯酚显色剂）检测降解后的废水中苯酚残留量。先制作系列浓度梯度并进行显色反应，下表中1～5号比色管的苯酚浓度应分别为________________。

如果废水为50mg／L苯酚溶液，降解后约有21％的苯酚残留，则需将残留液稀释_____________（填序号：①5②10③20）倍后，再进行比色。

酸菜，古称菹，《周礼》中就有其大名。制作酸菜的初衷是为了延长蔬菜保存期限。请回答： 

（1）酸菜制作起主要作用的微生物是_____________。但是在发酵初期，很多杂菌会大量繁殖，其中导致泡菜水的表面长白膜的微生物                      。 

（2）实验室可采用                           法进行菌种纯化，所用培养基需经_________________法进行灭菌。 

（3）为了保持所获得菌种纯净，需要进行菌种的保藏。对获取的菌种通常是在_________条件下短时间保藏，也可以利用____________的方法长期保存。

（4）市场上购买的真空包装酸菜，在没有发生漏气状态下发生了“胀袋”现象，A同学怀疑是杂菌污染导致的，B同学怀疑是乳酸菌大量繁殖导致的，说出你支持谁的观点并说出理由。支持            ，(1分)理由是                     。 

(1)人们常从土壤中分离纤维素分解菌，对应的实验流程是：土壤取样→选择培养→梯度稀释→将样品接种到________培养基上→挑选产生________的菌落．

(2)微生物培养时，将微生物接种到固体培养基上的方法有________和________，这两种方法所用的接种工具在使用前应分别进行________处理．

(3)葡萄糖 酒精，该阶段常用的发酵菌是________．发酵期间，培养液温度应控制在________，发酵装置必须密封的原因是________．