[生物——选修1：生物技术实践]

生活中，部分食品或饮料与微生物的发酵密不可分。回答下列关于微生物的培养及其运用的问题：

（1）不同微生物对营养的需求存在一定差异，但都能归纳为4类营养，即水、________、氮源和________。

（2）为增加分泌高效果胶酶的微生物的浓度，应该用________（填写物理状态）培养基。探究不同微生物分泌的果胶酶的活性实验，所用材料是果汁，那么该实验的自变量是________。

（3）制备果酒时，发酵菌为________，该发酵菌能将葡萄糖转化成酒精和CO₂，如图是某同学设计的发酵装置，该装置的优点有________。

（4）制备果醋时，发酵菌在________（填“有氧、无糖”“无氧、有糖”或“有氧、有糖”）条件下，能将乙醇转化成________，进而转化成乙酸。

[生物——选修1：生物技术实践]

   β—胡萝卜素可在人体的小肠、肝脏等器官转化成维生素A，因此β—胡萝卜素可用于治疗因缺乏维生素A而引起的疾病。回答下列有关制备β—胡萝卜素和纯化三孢布拉霉的问题：

（1）工业生产上，提取天然β—胡萝卜素的方法主要有三种，一是从植物中提取，二是从大面积养殖的________中获得，三是利用微生物的发酵生产。

（2）胡萝卜中富含β—胡萝卜素，从胡萝卜提取β—胡萝卜素的方法为________。影响该方法的主要因素是________，同时还受到原料颗粒的大小、紧密程度、含水量、________等条件的影响。

（3）三孢布拉霉是一种可用于生产β—胡萝卜素的霉菌，培养三孢布拉霉时，培养基中一定要含有水________、________和无机盐等营养成分。

（4）纯化兰孢布拉霉时，固体培养基上菌落的分布情况如下图1、图2所示，则图1、图2分别是采用________法和________法接种的。

[生物——选修1：生物技术实践] （略）

人们希望能借助纤维素酶将地球上最丰富、最廉价的可再生资源纤维素转化为能直接利用的能源和资源。纤维素酶可以从能分解纤维素的细菌培养液中提取．某同学设计了如下分离土壤中纤维素分解菌的实验流程：土壤取样→选择培养→（      ）→鉴别培养。

（1）请补充题干“（　）”中的实验流程：　　　　　　　　　　；找不到合适的取样环境，可采取的办法是　　　　　　　　　　　　　　　　　　　。

 （2）选择培养的目的是　　　　　　　　　　　　；研究人员用纤维素、硝酸盐、磷酸盐以及微量元素配制的培养基进行培养，其中加入的纤维素为微生物的生长提供　　　　　。

 （3）为了鉴别纤维素分解菌和进一步纯化菌种，可以培养基上加入刚果红染液，将筛选获得的菌液稀释后用　　　　　　　法接种到鉴别培养基上，然后挑选产生　　　　　　　　的菌落作为菌种进行扩大培养。

（４）扩大培养过程中需要对微生物进行计数。取0.2mL样品，用固体培养基对其培养，最后统计三个平板，菌落数分别是180、200、160。则样品中微生物的数量为　　　　　个/mL。该统计结果　　　　　 (低于、高于)实际值。

1．生物乙醇是以生物为原料生产的可再生能源。我国利用农作物废弃物（秸秆）生产乙醇，其技术流程为：纤维素酶分解→酵母菌发酵→蒸馏→成品。纤维素酶可以从能分解纤维素的细菌培养液中提取。某同学设计了从土壤中分离纤维索分解菌的实验流程：土壤取样→选择培养→梯度稀释→鉴别培养。请分析回答下列问题：

（1）最好选择       环境采集土样。

（2）配置培养基时，各种成分在熔化后分装前必须进行       ，接种前要进行       。

在整个微生物的分离和培养中，一定要注意在无菌条件下进行。在制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的倒平板操作时，平板冷凝后，应将平板       放置，这样做的目的是       。

（3）以下是A、B两种培养基配方：

A培养基配方：

B培养基配方：

如果要分离提纯土壤中的纤维素分解菌，应选择   （填编号）培养基配方，从功能看该培养基属于___   ____培养基。该培养基能增加样品中纤维素分解菌的浓度，其原理是                  。

（4）为了鉴别纤维素分解菌和进一步纯化菌种，可以在鉴别培养基中加入       ，将筛选获得的菌液稀释后用      法接种到鉴别培养基上，然后挑选产生     的菌落作为菌种进行扩大培养。

（5）乙醇是酵母菌的发酵产物，发酵时酵母菌直接利用的物质是               。

2.科学家从某些能无限增殖细胞的细胞质中分离出无限增殖调控基因（prG），该基因能激发许多动物细胞分裂，这为单克隆抗体的制备提供了更为广阔的前景。请回答下列问题：

（1）利用细胞融合技术制备单克隆抗体的过程中，促进动物细胞融合常用的诱导剂是       ，植物体细胞杂交在细胞融合之前要用           处理。

（2）利用细胞融合技术制备单克隆抗体时有两次筛选，第1次筛选的目的是       ，第2次筛选的目的是           。

（3）有人提出，可以直接通过基因工程导入该调控基因来制备单克隆抗体，其思路如图所示。请回答下列问题：

①．酶A是指       ，酶B是指       。

②．对已导入重组质粒的Ⅱ进行“检测”的目的是         ；题目中Ⅱ所指的细胞是       ，Ⅲ所9指的细胞具有的特点是           。

（4）也有人提出用细胞核移植技术构建重组细胞来生产单克隆抗体，试用相关的图示及文字表示该过程：（图中·和▲代表细胞核，○代表细胞质）

生物技术实践与人们生产和生活密切相关。请回答下列有关问题：

(1)无菌技术主要通过消毒和灭菌来避免杂菌污染。常用的灭菌方法有灼烧灭菌、________灭菌和________灭菌。某实验小组欲从豆油污染的土壤中筛选出能高效降解脂肪的菌株，应将土壤样品稀释液接种于以________为唯一碳源的同体培养基上，从功能上讲，该培养基属于________培养基。进行微生物的计数时，运用活菌计数法统计的菌落数往往比活菌的实际数目低，原因是________。

(2)提取天然胡萝卜素的方法主要有三种，一是从植物中提取，二是从养殖的岩藻中获得，三是________。工业生产上，用养殖的岩藻作为原料提取胡萝卜素时，________(填“需要”或“不需要”)将新鲜的岩藻干燥。

(3)胡萝卜素是________(填“挥发性”或“非挥发性”)物质。乙醚、四氯化碳和石油醚三种有机溶剂中，应选择石油醚来提取胡萝卜素，不选择乙醚的理由是________；不选择四氯化碳的理由是________。

生产实践中应用的菌种主要来土壤,从土壤中分离微生物的一般实验流程是：土壤収样—选择培养—梯度稀释—鉴別培养。请回答：

（1）欲从土壤中分离纤维素分解菌，最好选择在      环境中采集土样，所选择的培养基应以       作为唯一碳源。

（2）Taq耐热菌的发现和分离为基因工程的发展作出了突出贡献。分离Taq耐热菌所需要的特殊培养条件是             ，在生物休内进行DNA复制所必需而PCR技术中不需要的酶是             。

（3）下图是纯化微生物培养的效果图。请冋答：

①先配制好的培养基在接种前都要进行             灭菌，在整个微生物的分离和培养过程中，一定要注意在            条件下进行。

②获得图A效果的接种方法是            ,获得图B效果的接种方法是            。

（1）研究中，首先要配制培养基，培养基中一般应含有                 等四类营养物质，配制好之后，应该用        灭菌法进行灭菌。

（2）操作A的目的是        ，操作B的接种法培养出的结果应该如图         所示。

（3）为了检测水样中的细菌，在接种前，随机取若干灭菌后的空平板先行培养了一段时间，这样做的目的是                   ；然后，将1mL水样稀释100倍，在3个平板上用涂布法分别接入0.1mL稀释液；经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为39、38和37。据此可得出每升水样中的活菌数为         个。

 （4）该小组将得到的菌株接种到液体培养基中并混匀，一部分进行静置培养，另一部分进行振荡培养。结果发现：振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度快。其原因是振荡培养能                   。

科学家发现家蝇体内存在一种抗菌活性蛋白。分别在加入和未加入该抗菌蛋白的培养基中接种等量金黄色葡萄球菌，培养一定时间后，比较两种培养基中菌落的数量，可确定该蛋白质的抗菌效果。
（1）抗菌实验所用培养基中的牛肉膏和蛋白胨主要为细菌生长提供         。灭菌与调节pH的先后顺序是　    。抗菌蛋白需在灭菌        （填“前”或“后”）加入。
（2）对新配制的培养基灭菌时所用的设备是             。实验前需对超净工作台进行             处理。
（3）该实验接种金黄色葡萄球菌的方法是             。
（4）实验中的自变量和因变量分别是             。
（5）有人认为抗菌蛋白本身具有极强的抗菌能力，因此，该实验操作不需要在无菌条件下进行，请你谈谈自己的观点，并简要说明理由                     。