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            • 1. 为获得果胶酶,科研人员进行了下列果胶酶高产菌株的分离、筛选、鉴定及果胶酶在生产上的应用试验。
              (1)为分离果胶酶产生的某种霉菌,科研人员配制了如表所示成分的培养基,该表中应加入的成分a是______,该成分在培养基中的作用为______;在各种成分溶解配制好后应将pH调到______,再进行高压蒸汽灭菌。
              成分 K2HPO4 MgSO4 NaNO3 FeSO4 a 琼脂 蒸馏水
              质量 0.1g 0.5g 3g 0.01g 2g 15g 加至1L
              (2)将获得的菌株进行扩大培养后,再用______(工具)从滤液中获得粗提的果胶酶。如要检测获得的果胶酶活性,可先将等量的果胶酶和果胶混合处理适宜时间,再加入等量的______,最后根据沉淀物的生成量来判断。
              (3)在果汁和果酒制作过程中,常用果胶酶处理来提高相应产品的______;生产上通过明胶、海藻酸钠(包埋剂)或戊二醛(交联剂)等对果胶酶进行______处理,以减少酶的使用量,降低生产成本。
            • 2. 生物柴油是用动物植物油脂或脂肪酸与甲醇酯化合成的脂肪酸甲酯,是一种可再生的清洁能源。请回答下列相关问题:
              (1)生物柴油产业推广的难点之一在于动植物油脂原料成本较高,所以科研人员将寻找原材料的目光投向了富含脂肪酸的微藻,以下是从微藻中提取脂肪酸的简要流程:

              ①因脂肪酸具有______的性质,故选用有机溶剂萃取法进行提取。
              ②溶剂浸提之前需将材料混干的原因是______。
              (2)传统生产生物柴油是用酸或碱进行催化,会对环境造成污染。科研人员欲分离筛选能产生催化该反应的脂肪合成酶的微生物,用生物酶法生产生物柴油。
              ①自然界中产脂肪合成酶的微生物较少,应在______的环境取土样,在将样品稀释涂布到固体培养基上分离纯化前可先进行选择(富集)培养以达到______的目的。
              ②由于反应物甲醇可以使蛋白质变性而影响催化效率,要得到酶活性较高的菌种,可以在培养基中添加一定浓度的______,从培养基的用途看,这属于______培养基。
              ③分离纯化的菌种还要发酵培养检测______以确定其经济价值。
            • 3. 回答下列关于微生物的问题:
              Ⅰ.检验饮用水的细菌、病毒的含量是有效监控部分疾病发生的必要措施.请回答下列与检验饮用水中大肠杆菌有关的问题:
              (1)检验大肠杆菌的含量时,通常将水样进行一系列的梯度稀释,然后将不同稀释度的水样用涂布器分别涂布到琼脂固体培养基的表面进行培养,记录菌落数量,这种方法称为______.
              如图所示的四种菌落分布图中,图______不是由该方法得到的.

              (2)现有一升水样,用无菌吸管吸取1mL.转至盛有9mL.无菌水的试管中,依次稀释至103 稀释度.各取0.1mL 已稀释103 倍的水样分别接种到三个培养基上培养,记录的菌落数分别为55,56,57.则每升原水样中大肠杆菌数为______个.
              (3)有三种材料或用具需要清毒或灭菌:①培养细菌用的培养基与培养皿;②玻棒、试管、烧瓶和吸管;③实验操作者的双手•其中需要消毒的是______(填序号),需要灭菌的是______(填序号).
              Ⅱ如表是某公司研发的一种培养大肠杆菌菌群的培养基配方.
              成分 蛋白胨、牛肉膏 乳糖 蔗糖 K2HPO4 显色剂 琼脂
              含量(g) 10.0g 5.0g 5.0g 2.0g 0.2g 12.0g
              将上述物质溶解后用蒸馏水定容到1000mL
              (1)根据用途划分该培养基属于______培养基(填“选择”或“鉴别”).该培养基中的碳源是______.
              (2)以下微生物发酵生产特定产物时,所利用主要微生物的细胞结构与大肠杆菌相同的是______(多选)
              A.制作果酒 B.由果酒制作果醋 C.制作泡菜 D.制作腐乳.
            • 4. 为从土壤中筛选能有效降解有机化合物X的细菌,研究人员用化合物X、磷酸盐、镁盐以及微量元素配制的培养基,成功地筛选出能高效降解化合物X的细菌(目的菌).下图是从土壤中筛选出该细菌的过程示意图,下表是分离纯化的结果.请回答下列问题:
              记录项目:透明圈直径/菌落直径
              (1)培养基中的有机化合物X主要为目的菌提供 ______ 等营养要素.从土壤中富集能有效降解有机化合物X的细菌时,应选用 ______ (填“固体”或“液体”)培养基.
              (2)配制成10-1浓度稀释液时,用无菌移液管从富集液的上清液中吸取1mL,移人盛有 ______  mL无菌水的试管中,并依次配制10 -2~10 -10的梯度稀释液.
              (3)在分离、纯化过程中,图中②、③过程接种的方法分别为 ______ 在倒平板前,应对玻璃器皿和培养基灭菌,灭菌方法是 ______ .
              (4)分析菌种的分离纯化结果,应选择为 ______ 号菌落进行扩大生产,原因是 ______ .
              (5)实验过程中还需配制空白培养基作为对照,其目的是 ______ .
            • 5.
              水稻纹枯病是一种真菌性病害,在我国长江流域和南方的一些省区居水稻病害之首.土壤中某些拮抗微生物与水稻纹枯菌共培养时会形成抑菌圈,为水稻纹枯病生物防治提供了重要依据.科研人员进行了以下研究,请回答相关问题:
              (1)筛选菌株
              水稻纹枯菌的拮抗微生物可从水稻田采集水稻组织或 ______ 进行筛选,将所取样品每份称取5g放入液体培养基中培养24h后,取适量培养液涂布于琼脂平板上,培养5天后,挑选形态不同的 ______ ,对其进行编号.然后挑取少许菌株分别接种于长满水稻纹枯菌的琼脂平板上,培养3天后,观察纹枯菌的生长,根据 ______ 选出某理想菌株,编号为T4.
              (2)鉴定菌株T4所属的细菌类型
              提取菌株T4基因组DNA,扩增其16S rDNA(能体现不同菌属之间的差异,长度接近1000个碱基对).已知PCR扩增过程中,耐高温的DNA聚合酶合成子链的效率约为每分钟形成1000个磷酸二酯键,则对PCR扩增仪进行程序设定时,应将每轮循环的延伸时间定为 ______ ,对扩增产物 ______ 后确定该菌株所属细菌类型.
              (3)探究菌株T4的生长和抑菌活性物质产生的最适条件
              研究小组将菌株T4的单菌落接种至液体培养基中,振荡培养,分别于不同起始 pH、不同培养温度下测定细菌的生长量和抑菌效果,其中细菌生长量测定采用分光光度法,吸光度(OD值)和样本溶液浓度成正比.本实验于波长为640nm处记录菌液的吸光度(OD640),得到如下曲线:

              由图可知,菌株的最适生长条件为: ______ ,与其抑菌活性物质产生的最适条件 ______ .(一致/不一致)
              (4)菌种保存
              为了长期保存菌株T4,可在3mL的甘油瓶中,装入1mL甘油后 ______ 处理,再将1mL培养的菌液转移到甘油瓶中,放在冷冻箱中长期保存.
            • 6.
              下表是某种培养基的成分,据表回答:
              葡萄糖  NH4NO3  K2HPO4  KH2PO4  NaCl  MgSO4  Fe2SO4  CaCl2  H2O
               10g  5g  30g  10g  0.01g 0.5g   03g  5g  1000ml
              (1)该培养基用于培养微生物,营养物质可分 ______ 类.培养的微生物.其同化作用类型是 ______ .
              (2)如果用于培养乳酸杆菌,还需要添加 ______ .
              (3)如果用于培养霉菌,需将培养基的PH调至 ______ 性,培养细菌需将pH调至 ______ 性.
              (4)对培养基进行灭菌,应该采用的方法是 ______ .如果要观察菌落,需要添加 ______ .
              (5)若培养基中加人伊红美蓝,可以用于检测 ______ 细菌,这种培养基被称为 ______ 培养基.
              (6)植物组织培养基时,常用的培养基是 ______ 培养基.这时,需要将上述培养基中的葡萄糖换成 ______ ,另外添加其他有机物等,还常常需要添加 ______ .
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