【选修1—生物技术实践】

   在橘子成熟的季节，人们通常用它制作精油、果汁、果酒、果醋，简要流程如下：

（1）图中步骤③利用橘皮提取精油过程中，为了提高出油率需要将橘皮干燥去水后，用________浸泡处理，精油提取时一般采用________（填“蒸馏法”“萃取法”或“压榨法”）。

（2）图中步骤②制备果汁时为了提高橘子出汁率，常用________酶处理果汁，并且采用________技术来提高酶的使用效率、节约生产成本。

（3）图中步骤④酿制果酒过程中，图中步骤④酿制果酒过程中，即使有少量醋酸菌混入也因生活环境不适而不能存活，请说明理由________。

（4）工业上在进行图中步骤⑥酿制果醋时，为了提高果醋产量，需要得到纯化的醋酸菌菌种，在菌种纯化过程中使用________接种方法可以同时进行计数，获得的纯化菌种可以用________的方法进行长期保存。

(1)酵母菌在果酒制作过程中发挥重要的作用，发酵装置需短通气→密封→定时排气等流程，其中通气的目的是________，密封的目的是________。

(2)在果酒的基础上制作果醋时，主要的发酵菌是________，该菌在________条件下能将乙醇间接转化成乙酸。

(3)制备果汁类饮料吋，首先要获取能分泌高活性________酶的微生物，分离该微生物时，向固体培养基上接种微生物的常用方法是________，提取该微生物分泌的此酶可采用的方法有________。为提高该复合酶的利用率，一般不选择________法进行固定。

    葡萄酒和葡萄醋深受人们的喜爱。请根据利用葡萄汁生产葡萄酒和葡萄醋的实验，回答下列问题：

(1)某实验小组尝试使用罐头瓶在常温(21±3℃)下制作葡萄酒。开始时，向消过毒的罐头瓶中加入新鲜的葡萄汁。葡萄汁装入瓶中时，要留出大约1／3的空间，酵母菌进行呼吸作用的方式有________。在以后的过程中，每隔12h左右，要将瓶盖拧松一次(不是打开瓶盖)，此后再拧紧。这种情况下，酵母菌进行呼吸作用方式的总反应式是________。

(2)从野生酵母菌群中分离纯化酵母菌，常使用的接种方法是平板划线法和________两种。若要想计数酵母菌活菌的个数，使所得的估计值更接近实际值，除应严格操作和多次重复外，还应经过________的过程，保证待测样品的浓度比较合适。

(3)在果汁加工过程中，可添加________酶来提高出汁率和清澈度。葡萄的皮、籽中含有原花青素、葡萄皮红素和大量葡萄风味物质等，这些物质易溶于乙醇和乙酸乙酯中，因此，常采用________的方法来分离提取。

(4)醋酸杆菌是生产葡萄醋必用的菌种，可以从食醋中分离得到纯化的醋酸杆菌。扩大培养醋酸杆菌时，为了防止培养皿上凝结的水珠落入培养基上造成污染，一般愚等待平板冷却凝固后将________进行培养。

(5)酵母菌和醋酸杆菌中，属于原核生物的是________。

⑴果胶酶的基本单位是___________________,它可以将果胶分解为___________________，从而使浑浊的果汁变得澄清。

⑵在低温下贮藏果胶酶的原因是：低温不会破坏______________________________（2分）。

⑶如果果胶酶的酶促反应最适温度为45℃，最适pH为4.8，需进一步探究果胶酶的最适用量。此时，实验的自变量是___________________（2分）。合理的设置果胶酶用量的梯度后，可通过苹果泥出汁的多少来判断酶用量是否合适。根据所给材料和用具设计一下探究实验。

①材料用具：制备好的苹果泥、恒温水浴装置、试管、漏斗、滤纸、量筒、试管夹、质量浓度为2%的果胶酶溶液、体积分数为0.1%的NaOH和HCl溶液。

②实验步骤：a、取6支试管，编号1~6，分别加入5ml的苹果泥，调节pH至4.8，放入45℃恒温水浴装置中保温一段时间。  b、向1~6号试管中分别加入相同体积质量浓度为2%的果胶酶溶液，然后放在45℃恒温水浴装置中保温足够长的时间。  c、1~6号试管同时取出，过滤苹果泥（时间相同）并记录果汁体积。

③结果与讨论：（略）

上述实验步骤中有两处明显错误，请指出来：

__________________________________________________________________；（2分）

__________________________________________________________________。（2分）

 ④预测实验结果，请在坐标上画出表示果胶酶最适用量（不超过0.8ml）的曲线图。（3分）

海南椰树牌椰汁是国宴饮料，工业大规模生产果汁时，要设法提高产量、品质并降低成本，达到最佳经济效益和社会效益。回答下列相关问题：

（1）椰树集团的技术人员为了生产澄清无椰肉的果汁，用果胶酶处理了椰肉泥，技术人员想获取活性最高的果胶酶，从六种微生物中提取了该酶，进行六组实验，各组实验除酶的来源不同外，其他条件都相同，测定各组的出汁量，各组重复多次，据此计算各组果胶酶的活性的           并进行比较，达到实验的目的。

（2）现有一种新分离出来的最佳果胶酶，为探究其最适PH，技术人员设计了如下实验：取试管16支，分别加入等量的椰肉泥、果胶酶，混匀，平均分为4组，分别调节PH至1、3、4、7，在45℃下保温相同时间，然后，测定各试管中的出汁量并计算各组出汁量平均值。该实验PH设置的不足之处有＿＿＿＿＿＿和＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。如果要探究果胶酶的最适宜温度或用量，保证PH稳定就要加入等量的           。

（3）工业大规模生产的海南椰树牌椰汁口感浓厚，是因为在离心分离过滤后进行了      ，承诺不加任何防腐剂，都能保存较长时间且保持原有风味，是因为在包装前进行了                。