[生物——选修1：生物技术实践]该模块暂不命题。

下表是某公司研发的一种培养大肠杆菌菌群的培养基配方，请根据表格和所学知识回答下列相关问题。

（1）在微生物的实验室培养中，获得纯净培养物的关键是_______________，因此需对培养基和培养皿进行_______，操作者的双手需要进行清洗和消毒。

（2）根据用途划分，该培养基属于_______培养基，若要分离能分解尿素的细菌需将培养基中__________换成尿素，若要鉴定分解尿素的细菌还需将伊红美蓝换成__________。

（3）若要统计大肠杆菌活菌数目，常用的方法是____________。统计结果往往比实际值偏___。原因是___________________________________。

【生物—选修1：生物技术实践】

回答下列与微生物发酵、培养以及应用相关的问题：

(1)苹果酒清香、明快，风味清爽，它是由果汁发酵产生的。果汁发酵后是否有酒精产生，可用 

              来检验。

(2)严格控制发酵条件是保证发酵正常进行的关键，这直接关系到是否能得到质量高、产量多的理想产物，通常所指的发酵条件不包括   。

 A.温度控制          B.溶氧控制        C．pH控制       D.酶的控制

(3)苹果酒在      的作用下，经过深层发酵可形成苹果醋；在此过程中要适时向发酵液中充气，原因是                  

(4)腐乳是用豆腐发酵制成，有多种微生物参与发酵，其中起主要作用的是           。在腐乳的制作过程中，从微生物培养的角度来看，豆腐应该属于           。

(5)在充足的碳源、氮源、无机盐和水的条件下，乳酸菌仍然不能正常生长，还需要在培养基中添加               。应用平板划线法分离乳酸菌时，从第二次划线操作起，每次总是要从上一次划线的末端开始划线，并划线数次，其原因是                                             。

微生物连续培养时，一部分旧的培养基以一定的速度流出，同时不断有等量的新鲜培养基流入以保证微生物对营养物质的需要。研究人员将大肠杆菌JA122菌株接种到葡萄糖含量受到限制的培养基中，连续培养多代，然后取样分析其中存在的新菌株。请回答下列问题：

（1）用于连续培养JA122大肠杆菌的培养基从物理性质看属于                  。培养基中除了含葡萄糖作为             外，还应该含有                            。

（2）样品中共发现CV101、CV103、CV116三种新菌株，产生新菌株的原因是由于JA122大肠杆菌发生了

                      导致的，产生三种不同类型的新菌株说明         。

（3）下图表示将CV101、CV103、CV116三种新菌株混合在一起培养的生长情况，三者之间互为竞争关系，并保持稳定生长水平，没有出现一种菌株生存而另外两种菌株灭绝的现象，说明它们已经具有了不同的适应能力，这是              的结果。

（4）对三种菌株的代谢差异进行分析发现，CV103对葡萄糖吸收率最高，代谢终产物是醋酸盐。进一步研究表明，CV101可以在过滤的培养过CV103的培养基中生长，据此作出的推测是：                   。请设计并完成下列实验步骤，来验证你的观点。

①配制                    的固体培养基（A组);和不含碳源的固体培养基（B组）；

②将等量的适量稀释的CV101菌液分别接种到A、B培养基中培养一段时间，并观察记录菌株的生长情况。实验过程应在          条件下进行。

③预期实验结果：                                               。

【生物——选修1生物技术实践】

由于酵母菌利用淀粉的能力很弱，有人将地衣芽孢杆菌的α-淀粉酶基因转入酵母菌中经筛选得到了可高效利用淀粉的工程菌菌种（过程如图甲所示）。

(1)图甲中，过程①需要的酶有_____________。为达到筛选目的，平板内的固体培养基应以____________作为唯一碳源。②.③过程需要重复几次，目的是______________。

(2）某间学尝试过程③的操作，其中一个平板经培养后的菌落分布如图乙所示。该同学的接种方法是_____________________；推测该同学接种时可能的操作失误是______________。

(3）以淀粉为原料，用工程酵母菌和普通酵母菌在相同的适宜条件下密闭发酵，接种________菌的发酵罐需要先排气，其原因是__________________________。

（4）用凝胶色谱法分离α一淀粉酶时，在色谱柱中移动速度较慢的蛋白质，相对分子质量较________。

多氯联苯为油状液体，污染土壤后，土壤呈现油状板结，很难清除。研究发现部分酵母菌具有分解多氯联苯的作用，为消除这种污染，科研人员计划从受污染的土壤中筛选出高效分解多氯联苯的菌株。

（1）筛选分解多氯联苯的菌株时，应将土壤样品稀释，接种到以             为唯一碳源的培养基上，从物理状态上讲，该培养基属于              。

（2）对初步提取到的菌株要进行纯化，一般操作方法有两种，下图是利用            法进行微生物接种，把聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。培养一段时间后，如果出现菌落且菌落周围       消失或减少，说明该菌落中的菌株具有降解多氯联苯的能力。

（3）若要测定培养液酵母菌的菌体数，可在显微镜下用         直接计数。若用稀释涂布平板法统计菌落数，在涂布接种前，随机取若干灭菌后的空白平板进行培养一段时间，这样做的目的是                  。

（4）将1ml酵母菌溶液稀释100倍，在3个平板上用涂布法分别接入0．1ml稀释液经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为24、25、26，据此可得出每升溶液中酵母菌活菌数为

             个。

【生物——选修1：生物技术实践】

某研究小组从牛的瘤胃中采集样本，进行分解尿素的微生物的分离与计数。实验基本步骤如下：

（1）分解尿素的微生物含有_______________，因此，配制培养基时以尿素作为唯一氮源，尿素会被分解成_________使培养基的碱性增强。

（2）配制培养基时，需添加琼脂，琼脂起________________作用；培养基中添加___________作为指示剂，可使目标菌落的周围产生红色环带。

（3）对尿素溶液进行灭菌的最适方法是___________灭菌。

  A.高压蒸汽  B.干热   C.添加抗生素  D.过滤   E.紫外线照射    F. 70﹪酒精浸泡

（4）该小组在接种前，随机取若干灭菌后的空白平板先行培养了一段时间，这样做的目的是__________________________；然后将1mL瘤胃样液稀释1000倍，在3个平板上用涂布法分别接入0.1mL稀释液；经适当培养后，3个平板的菌落数分别为49、47和45。据此可得出每升瘤胃样液中分解尿素的微生物活菌数为__________，理论上，统计的菌落数往往_____（低、等、高）于接种的实际活菌数目。

【生物—选修1：生物技术实验】

研究发现柚皮精油和乳酸菌素（小分子蛋白质）均有抑菌作用，两者的提取及应用如图所示。

（1）柚皮易焦糊，宜采用____________法提取柚皮精油，该过程得到的糊状液体可通过___________除去其中的固体杂质。

（2）筛选乳酸菌A时可选用平板划线法或____________接种。对新配制的培养基灭菌时所用的设备是_______________。实验前需对超净工作台进行____________处理。

（3）培养基中的尿素可为乳酸菌A生长提供______________。电泳法纯化乳酸菌素时，若分离带电荷相同的蛋白质，则其分子量越大，电泳速度___________。

（4）抑菌实验时，在长满致病菌的平板上，会出现以抑菌物质为中心的透明圈。可通过测定透明圈的______________来比较柚皮精油和乳酸菌素的抑菌效果。

【生物——选修1：生物技术实践】

谷氨酸棒状杆菌可用于微生物发酵工程生产谷氨酸，从而制取谷氨酸钠（味精）。下表是生物兴趣小组探究发酵条件对微生物数量和产物生产的影响。

请分析回答下列问题：

（1）谷氨酸棒状杆菌发酵的培养基中主要营养物质有________，该培养基是一种________培养基。

（2）得到谷氨酸棒状杆菌数目可采用的计数方法是________，用该方法计数过程：取第一组的102倍的稀释液0.1mL滴加到计数板（由25×16＝400个小室组成，容纳液体总体积为0.1mm³）上，记录到5个中方格（80个小室）共有菌体44个，则1mL的第一组发酵液中有

菌体________个。用该方法测定的微生物数量大于实际的活菌数，原因是________。

（3）在无氧条件下，谷氨酸棒状杆菌代谢产物是乳酸或琥珀酸，由此说明谷氨酸棒状杆菌的代谢类型是________，由上述探究可知，通过发酵得到大量谷氨酸的发酵条件是________。

【生物——选修1：生物技术实践】

从自然菌样中筛选较理想的生产菌种的一般步骤是：采集菌样→富集培养→纯种分离→性能测定。

(1)不同微生物的生存环境不同，获得理想微生物的第一步是从适宜的环境中采集菌样，然后再按一定的方法分离、纯化。筛选噬盐菌的菌样应从____________环境中采集。

(2)富集培养指创设仅适合待分离微生物旺盛生长的特定环境条件，使其数量大大增加，从而分离出所需微生物的培养方法。对产耐高温淀粉酶微生物的富集培养应选择_____________的培养基，并在__________条件下培养。

(3)如图甲、乙是采用纯化微生物培养的两种接种方法接种后培养的效果图，请分析接种的具体方法。

获得图甲效果的接种方法是________________，获得图乙效果的接种方法______________。

(4)配制培养基时各种成分在溶化后分装前必须进行____________，培养基的灭菌方法是________________。在整个微生物的分离和培养中，一定要注意在____________条件下进行。