[生物——选修1：生物技术实践]

生物兴趣小组试图探究牛和山羊的瘤胃中的微生物对尿素是否有分解作用，设计了以下实验，并成功筛选到能降解尿素的细菌（目的菌）。培养基成分如表所示，实验步骤如图所示。请分析回答问题：

（2）实验需要振荡培养，原因是                  。转为固体培养时，常采用              的方法接种，获得单菌落后继续筛选。

（3）在实验过程中：①培养基、培养皿；②玻棒、试管、锥形瓶、吸管；③瘤胃中液体．其中需要灭菌是    填序号）．

（4）分离分解尿素的细菌实验时，甲同学从培养基上筛选出大约150个菌落，而其他同学只选择出大约50个菌落．甲同学实验结果差异的原因可能有       （填序号）①取样不同②培养基污染③操作失误④没有设置对照

（5）以尿素为唯一氮源的培养基培养“目的菌”后，加入指示剂后变红色，说明“目的菌”能分解尿素．理由是                                       。

【生物——选修1生物技术实践】

  人们希望能借助纤维素酶将地球上最丰富、最廉价的可再生资源纤维素转化为能直接利用的能源和资源。纤维素酶可以从能分解纤维素的细菌培养液中提取．某同学设计了如下分离土壤中纤维素分解菌的实验流程：土壤取样→选择培养→（      ）→鉴别培养。

（1）请补充题干“（ ）”中的实验流程： ；找不到合适的取样环境，可采取的办法是                                                。

（2）选择培养的目的是                              ；研究人员用纤维素、硝酸盐、磷酸盐以及微量元素配制的培养基进行培养，其中加入的纤维素为微生物的生长提供 。

（3）为了鉴别纤维素分解菌和进一步纯化菌种，可以培养基上加入刚果红染液，将筛选获得的菌液稀释后用 法接种到鉴别培养基上，然后挑选产生                            的菌落作为菌种进行扩大培养。

（4）扩大培养过程中需要对微生物进行计数。取0.2mL样品，用固体培养基对其培养，最后统计三个平板，菌落数分别是180、200、160。则样品中微生物的数量为                       个/mL。该统计结果                  (低于、高于)实际值。

[生物——选1生物技术与实践]某同学配制含琼脂的牛肉膏蛋白胨培养基后，对培养基和培养皿进行高压蒸汽灭菌，当培养基温度下降到50℃时，在酒精灯火焰附近倒平板，待培养基冷却至室温，按下表处理：

将处理完毕的培养皿置于适宜温度下培养2～3天，观察每个培养皿中的菌落特征和数目。回答下列问题：

（1）上述实验的实验目的是          。若E组的培养基表面有菌落生长，说明了               。

（2）培养基中的牛肉膏和蛋白胨主要为微生物生长提供          和      。在酒精灯火焰附近”进行相关操作是为了                 。

（3）实验过程特别强调温度控制，请简要说明下列温控措施的目的：                                         

①“待培养基冷却至室温”的目的有                                             。

②“将处理完毕的培养皿置于适宜温度下培养”的目的是                                   。

（4）培养微生物时将培养皿倒置的目的是                                            。实验结束后，对使用过的培养基应进行                      处理。

[生物——选修1：生物技术实践]

已知尿素分解菌合成的脲酶能将尿素分解成氨。回答下列问题：

(1)从土壤中分离尿素分解菌时，首先要进行选择培养，该过程使用的培养基中要添加____________作为唯一氮源；制备上述培养基时，在倒平板之前要进行灭菌处理，常用的灭菌方法是____________；而对接种环等金属用具常用的灭菌方法则是____________。

(2)接种尿素分解菌后的培养基需要倒置培养，原因是____________。若采用稀释涂布平板法检测土壤样液中的尿素分解菌含量，在涂布接种前，应随机选取若干个灭菌后的空白平板先培养一段时间，这样做的目的是____________；然后，将1mL样液稀释100倍，在3个平板上用涂布法分别接入0.1mL稀释液，经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为56、58和60，据此可得出每升土壤样液中的活菌数为____________。

(3)鉴别培养基中是否存在尿素分解菌时，可在培养基中加入____________指示剂；如果有尿素分解菌存在，则培养基中该菌落的周围会出现红色。

[生物—选修1 生物技术实践]

   某生物兴趣小组的同学，利用洗衣机内桶背面的污垢进行了相关实验。下图是某同学分离和培养洗衣机中微生物的部分操作步骤和实验结果示意图。

（1）图1所示的是制各固体培养基时的实验操作步骤之一，该操作称为________。

（2）在培养洗衣机中细菌的实验中，应在接种前检测固体培养基是否被污染，具体检测的方法是________。

（3）图2是平板划线法接种操作示意图，操作顺序是A→B→________（用字母和箭头表示）；以上操作中存在错误的步骤是________（用字母表示）。

（4）将以上接种后的平板置于培养箱中培养时需倒置，原因是________。

（5）在检测洗衣机的污垢中是否含微生物时，也有同学先将污垢制成一定浓度的水样溶液，然后用移液枪取0.1ml菌液滴入平板，并用涂布器涂布到固体培养基的表面进行培养，这种方法称为________。经一段时间培养后，图3中发现有纤维素分解菌，筛选纤维素分解菌的方法是________。

[生物——选修1：生物技术实践]

金黄色葡萄球菌具有高度耐盐性，在血平板(培养基中添加适量血液)上生长时，可破坏菌落周围的红细胞，使其褪色。下面是某研究小组测定自来水中金黄色葡萄球菌浓度的实验操作。请回答下列问题：

（1）金黄色葡萄球菌的培养基为7.5％NaCl牛肉膏蛋白胨培养基，此培养基能为金黄色葡萄球菌的生长提供碳源、氮源及水和无机盐。培养基中加入7.5％NaCl利于金黄色葡萄球菌的筛选，原因是_____________________________________________。

（2）上述培养基的灭菌方法是_____________。在制作血平板时需等平板冷却后，方可加入血液，以防止___________。血平板在使用前，需置于恒温培养箱中一段时间的目的是________________。

（3）取10mL自来水样，加入_____mL无菌水稀释成10^-1稀释自来水样，依次操作，制作10^-2、10^-3、10^-4稀释自来水样。

（4）将0.1 mL 10^-l～10^-4的四个稀释样液，分别接种到4组(每组3个)血平板上的方法是__________。在血平板上，金黄色葡萄球菌菌落的周围会出现___________。若在10^-3组的3个血平板上，金黄色葡萄球菌菌落数分别为39、38和37，则每升自来水中的活菌数约为____________。  

[生物选修模块1：生物技术实践]

请回答下列与大肠杆菌有关的问题。

（1）从生态系统的成分上看,大肠杆菌属于____它的同化作用类型是____。

（2）下表是某公司研发的一种培养大肠杆菌菌群的培养基配方。

根据用途划分该培养基属于       (选择、鉴别）培养基。该培养基中的碳源是     。

（3）在微生物培养操作过程中,为防止杂菌污染，需对培养基和培养皿进行     (消毒、灭菌）操作者的双手需要进行清洗和       。静止空气中的细茵可用紫外线杀灭，其原因是紫外线能使蛋白质变性，还能       。培养大肠杆菌时，常用的接种方法是平板划线法和                  。通常,对获得的纯菌种还可以依据菌落的形状、大小等菌落特征对细菌进行初步的        。培养大肠杆菌时，在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固体培弃基应采用的检测方法是               。若用大肠杆菌进行实验,使用过的培养基及其培养物必须经过            处理后才能丢弃，以防止培养物的扩散。

（4）以下微生物发酵生产特定产物时,所利用主要微生物的细胞结构与大肠杆菌相同的是________

A、制作果酒     B、由果酒制作果醋    C、制作泡菜    D、制作腐乳

（5）利用培养基不仅可以分离培养微生物，也可以进行植物组织培养。在植物组织培养的过程中,也要对外植体等进行一系列的消毒、灭菌，并且要求无菌操作,原因是         

［生物——选修1：生物技术实践］据生物技术相关知识回答：

⑴灭菌是使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，包括            。以下操作属于灭菌的有        （选代号，不定项），属于消毒的有      （选代号，不定项）。

①用70%的酒精擦拭双手          ②用适宜浓度的氯气处理水源

③将牛奶在70—75℃下煮30分钟  ④将沾有少量酒精的涂布器末端在火焰上引燃

⑤将试管口、接种环通过酒精灯充分燃烧层

⑥将平板倒置（皿盖在下、皿底在上）放入培养箱

⑵若要测定某培养液中的活菌数，既可经染色后在显微镜下用           直接计数，也可不染色直接选用                 法统计活菌数目，一般前者得到的结果           （填“大于”、“等于”、“小于”）后者。

⑶用新鲜的泡菜滤液为实验材料分离纯化乳酸菌时，首先需要用无菌水对泡菜滤液进行梯度稀释，进行梯度稀释的理由是                  。

牛奶中富含蛋白质，长期饮用有助于增强体质，但牛奶同时也是多种疾病的传播载体。国家标准是每毫升牛奶中细菌数小于30000个。以下是牛奶消毒及细菌检测实验。

                                                    图1

                                          图2

                             表1

(1)图1步骤①称为          消毒法，步骤②是                 。

(2)培养基中的蛋白胨可以为微生物提供        ；进行步骤③操作时，应选图2中的哪种工具进行涂布         ；为了避免杂菌污染，此步骤应在      附近进行。

[生物——选修1：生物技术实践]

   某小组同学为了调查湖水中细菌的污染情况而进行了实验。实验包括制备培养基、灭菌、接种及培养、菌落观察与计数。请回答与此实验相关的问题：

（1）培养基中含有的蛋白胨、淀粉分别为细菌培养提供了________和________。除此之外，培养基还必须含有基本成分是________和________。

（2）对培养基进行灭菌，应该采用的方法是________。

（3）为了尽快观察到细菌培养的实验结果，应将接种了湖水样品的平板置于________中培养，培养的温度设定在37℃。要使该实验所得结果可靠，还应该同时在另一平板上接种________作为对照进行实验。

（4）如果提高培养基中NaCl的浓度，可以用于筛选耐________细菌，这种培养基被称为________。