[生物——选修1：生物技术实践]

金黄色葡萄球菌具有高度耐盐性，在血平板(培养基中添加适量血液)上生长时，可破坏菌落周围的红细胞，使其褪色。下面是某研究小组测定自来水中金黄色葡萄球菌浓度的实验操作。请回答下列问题：

（1）金黄色葡萄球菌的培养基为7.5％NaCl牛肉膏蛋白胨培养基，此培养基能为金黄色葡萄球菌的生长提供碳源、氮源及水和无机盐。培养基中加入7.5％NaCl利于金黄色葡萄球菌的筛选，原因是_____________________________________________。

（2）上述培养基的灭菌方法是_____________。在制作血平板时需等平板冷却后，方可加入血液，以防止___________。血平板在使用前，需置于恒温培养箱中一段时间的目的是________________。

（3）取10mL自来水样，加入_____mL无菌水稀释成10^-1稀释自来水样，依次操作，制作10^-2、10^-3、10^-4稀释自来水样。

（4）将0.1 mL 10^-l～10^-4的四个稀释样液，分别接种到4组(每组3个)血平板上的方法是__________。在血平板上，金黄色葡萄球菌菌落的周围会出现___________。若在10^-3组的3个血平板上，金黄色葡萄球菌菌落数分别为39、38和37，则每升自来水中的活菌数约为____________。  

【生物技术实践】苹果园广泛使用的一种除草剂（含氮有机物）在土壤中不易被降解，长期使用可污染土壤．为修复被该除草剂污染的土壤，科学工作者按甲图程序选育能降解该除草剂的细菌（已知该除草剂在水中溶解度低，含一定量该除草剂的培养基不透明）。

（1）制备土壤浸出液时，为避免菌体浓度过高，需将浸出液进行稀释处理。现有一升土壤浸出液，用无菌吸管吸取1mL液样至盛有9mL无菌水的试管中，再稀释10³倍．各取0.1mL已稀释10³倍的水样分别接种到三个培养基上培养，记录的菌落数分别为55、56、57，则每升原土壤浸出液样中菌体数为______。

（2）科学工作者为修复被该除草剂污染土壤的目的来选择细菌，所用培养基应该_______

_____________。

（3）接种技术的核心是_________________。在划线接种时，连续划线的目的是将聚集的菌种逐步_______________，培养时，只有很少菌落出现，大部分细菌在此培养基上不能生长的主要原因是________________或有氧条件抑制了这些细菌的生长。

（4）在培养基上形成的菌落中，无透明带菌落利用的氮源主要是__________，有透明带菌落利用的氮源主要是______________，据此可筛选出目的菌。实验结果如乙图显示的A～E五种菌株中，___________是最理想菌株。

下列说法不正确的是( )

存在于蔬菜和粗加工的谷类中的纤维素（即膳食纤维）对人体的健康有着重要的作用。但纤维素不能被人体吸收，因为人体缺乏分解纤维素的酶。某校生物兴趣小组开展了以下探究纤维素酶研究的工作，请回答下列问题：

（1）纤维素酶是一种复合酶，包括C₁酶、Cx酶和葡萄糖苷酶三种，其中能将纤维素分解为纤维二糖的是________、________。

（2）土壤中不少微生物都具有分解纤维素的能力，可从枯枝落叶多的腐殖土中采样，还可以将富含________的物质埋在土壤中。取回的土样中含有多种微生物，在培养基中加入________染料来筛选纤维素分解菌，该染料可与纤维素形成________复合物，将来以培养基中________的出现做为筛选纤维素分解菌的依据。

（3）牛、羊等食草动物也具有消化纤维素的能力。若从牛的胃中分离出纤维素分解菌，与从土壤中分离出的纤维素分解菌相比较，除了要调整培养基的________外，还必须提供________环境。

[生物选修1：生物技术实践]

   甘蔗是一种高光效的植物，单位面积产量很高，目前已成为燃料酒精生产的重要原料。与化石燃料相比，酒精燃料可以再生，而且二氧化碳排放量少，具有低能耗、低污染、低排放的特点，为基础的低碳经济模式。

（1）利用甘蔗生产燃料酒精的一般工艺流程为甘蔗—榨汁（蔗糖）—酵母发酵—蒸馏—成品（燃料酒精）—蔗渣由微生物分解再利用。具有耐高糖和耐酸特性的酵母菌是理想的酒精发酵菌种，对野生酵母菌进行诱变后通过筛选可以得到具有这些特性的突变菌，诱变及筛选过程如下：

步骤1：野生菌液体培养一段时间后接受紫外线照射诱变处理。

步骤2：从野生菌液中分离出理想的酵母菌菌种，需要用到________培养基，制备该培养基时要注意________和________。加琼脂后灭菌，制成固体培养基。为防止培养皿出现冷凝水影响菌落生长，需将培养皿________。

步骤3：将紫外线照射后的菌液稀释，涂布在固体培养基的表面。接种操作一定要在酒精灯火焰附近进行，原因是________。

步骤4：根据是否能在该培养基上生长筛选出突变菌。由上述步骤筛选出的酵母菌与野生酵母菌相比，具有________的特点。

（2）利用获得的突变菌和榨汁进行酒精发酵实验，除了将培养基灭菌、保持空间洁净外，发酵过程中防止外来杂菌入侵可行的方法还有（列举一种）________。

（3）酵母菌不能分解蔗渣，因其不含有能够分解蔗渣的________酶。若从土壤中分离具有这种酶的微生物，所需要培养基中的碳源为________。

37．[生物－选修1：生物技术实践]
生物技术与我们的生活息息相关。请根据所学知识，回答下列有关问题：
（1）在泡菜腌制过程中，亚硝酸盐含量会发生变化，测定亚硝酸盐含量的方法是________。亚硝酸盐在特定的条件下会转变为________，进而可能引发人体细胞癌变。
（2）制作葡萄酒的菌种主要来源是________。检验是否产生酒精可在________条件下，用________试剂检测。
（3）若要提高果酒的产量，发酵过程中要控制好哪些条件？________（至少写出两项）。
（4）为获得一种能高效降解有机磷农药的细菌，应使用含有________的选择培养基；使用后的培养基丢弃前一定要进行灭菌处理，目的是________。

  （1）接种前要对培养基进行____________处理。在整个微生物的分离和培养过程中，一定要注意在____________条件下进行。

  （2）不同微生物的生存环境不同，获得理想微生物的第一步是从适合的环境采集菌样，然后再按一定的方法分离、纯化。如培养纤维素分解菌的菌样应从___________环境中采集。

  （3）从土壤中筛选纤维素分解菌需要配制          培养基，该培养基中需要加入纤维素粉作为             。

  （4）经过梯度稀释后，要将样品均匀涂布在用于鉴别纤维素分解菌的培养基上，在该培养基中需要加入的特殊染料是            ，当形成菌落以后可以根据菌落周围是否产生_____________来筛选纤维素分解菌。某同学在纯化土壤中的细菌时，发现培养基上的菌落连成一片，最可能的原因是____________________。

  （5）下图是利用        法进行微生物接种，把聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。

  （6）关于上图的操作方法和结果，叙述正确的是         。

A.操作前要将接种环放在火焰边灼烧灭菌

B.划线操作须在火焰上进行

C.在5区域中才可以提取到所需菌落

D.在1、2、3、4、5区域中划线前后都要对接种环灭菌

 26．2（共15分）下图表示菊花的嫩枝和月季的花药离体培养过程，请据图回答下面的问题。

（7）对于菊花来说，其组织或细胞在      条件下可以发育成完整的植株。在选取菊花茎段时要取       的嫩枝来进行组织培养。对月季来说，适宜花粉培养的时期是花粉应处于        期，为确定该花粉是否处于该时期，最常用的方法是              。

   （8）在培养菊花嫩枝组织和月季花粉的培养基中都要加入一定的植物激素，常用的植物激素有             ；在材料消毒时都要先用体积分数为           浸泡，后用质量分数为0.1%的          消毒。

     （9）月季的花药培养与菊花的嫩枝组织培养不同，从植株产生的途径来说，花粉植株产生的途径除了图中所示外，还可以通过       阶段发育而来，这两种发育途径的差别主要取决于             。

     （10）不同植物对各种条件的要求往往不同，进行菊花组织培养一般将温度控制在   ℃，并且对光照的控制为          。

   【选修Ⅲ  现代生物科技专题】(两道大题，选做选修Ⅰ不做此部分)

(1)秸杆的主要成分是纤维素，牛本身没有相应的消化酶，但胃内有一种微生物可以帮助其分解，这种微生物与牛的种间关系为                       。尿素并不是牛马的必须营养，过多甚至有害，但有经验的农民常在其草料内喷少量尿素，据此题的信息你认为尿素的作用是                            。

(2)分离纯化能分解秸秆的微生物时，需对培养基和接种针进行灭菌处理，常用的方法依次是                             。

(3)将玉米秸秆人工收获后，将其铡碎、压实、密封储藏。秸杆经此处理后，气味微酸芳香(主要由乳酸菌代谢产物造成)。上述“压实密封” 的目的是：人为造就一个             环境，利于乳酸菌的           。用这样处理后的秸杆饲喂牲畜的好处是             。

(4)下面是分离分解纤维素的微生物的实验流程图：

步骤(二)中选择培养基的营养物质的特点是             ，步骤(三)中稀释的目的是                   。

废纸主要成分是木质纤维。左下图是工业上利用废纸生产乙醇的基本工作流程。回答下列问题。

（1）自然界中①环节需要的微生物大多分布在        的环境中。②中获得的酶是        酶。
（2）若从土壤中分离出上述微生物,应以        为唯一碳源的培养基进行培养,并加入        形成红色复合物进行筛选,培养基上会出现以该菌的菌落为中心的        。
（3）接种后一个平板经培养后的菌落分布如右上图所示,推测接种时可能的操作失误是        。向试管内分装含琼脂的培养基时,若试管口粘附有培养基,需要用酒精棉球擦净的原因是        。
（4）生产中可以满足④环节的常见菌种是        。玉米秸秆中的纤维素经充分水解后的产物可为该微生物的生长提供        。从玉米胚芽中提取的胚芽油不易挥发,宜选用        法从玉米胚芽中提取。