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            • 1. 为获得果胶酶,科研人员进行了下列果胶酶高产菌株的分离、筛选、鉴定及果胶酶在生产上的应用试验。
              (1)为分离果胶酶产生的某种霉菌,科研人员配制了如表所示成分的培养基,该表中应加入的成分a是______,该成分在培养基中的作用为______;在各种成分溶解配制好后应将pH调到______,再进行高压蒸汽灭菌。
              成分 K2HPO4 MgSO4 NaNO3 FeSO4 a 琼脂 蒸馏水
              质量 0.1g 0.5g 3g 0.01g 2g 15g 加至1L
              (2)将获得的菌株进行扩大培养后,再用______(工具)从滤液中获得粗提的果胶酶。如要检测获得的果胶酶活性,可先将等量的果胶酶和果胶混合处理适宜时间,再加入等量的______,最后根据沉淀物的生成量来判断。
              (3)在果汁和果酒制作过程中,常用果胶酶处理来提高相应产品的______;生产上通过明胶、海藻酸钠(包埋剂)或戊二醛(交联剂)等对果胶酶进行______处理,以减少酶的使用量,降低生产成本。
            • 2. 生物柴油是用动物植物油脂或脂肪酸与甲醇酯化合成的脂肪酸甲酯,是一种可再生的清洁能源。请回答下列相关问题:
              (1)生物柴油产业推广的难点之一在于动植物油脂原料成本较高,所以科研人员将寻找原材料的目光投向了富含脂肪酸的微藻,以下是从微藻中提取脂肪酸的简要流程:

              ①因脂肪酸具有______的性质,故选用有机溶剂萃取法进行提取。
              ②溶剂浸提之前需将材料混干的原因是______。
              (2)传统生产生物柴油是用酸或碱进行催化,会对环境造成污染。科研人员欲分离筛选能产生催化该反应的脂肪合成酶的微生物,用生物酶法生产生物柴油。
              ①自然界中产脂肪合成酶的微生物较少,应在______的环境取土样,在将样品稀释涂布到固体培养基上分离纯化前可先进行选择(富集)培养以达到______的目的。
              ②由于反应物甲醇可以使蛋白质变性而影响催化效率,要得到酶活性较高的菌种,可以在培养基中添加一定浓度的______,从培养基的用途看,这属于______培养基。
              ③分离纯化的菌种还要发酵培养检测______以确定其经济价值。
            • 3. 回答下列关于微生物的问题:
              Ⅰ.检验饮用水的细菌、病毒的含量是有效监控部分疾病发生的必要措施.请回答下列与检验饮用水中大肠杆菌有关的问题:
              (1)检验大肠杆菌的含量时,通常将水样进行一系列的梯度稀释,然后将不同稀释度的水样用涂布器分别涂布到琼脂固体培养基的表面进行培养,记录菌落数量,这种方法称为______.
              如图所示的四种菌落分布图中,图______不是由该方法得到的.

              (2)现有一升水样,用无菌吸管吸取1mL.转至盛有9mL.无菌水的试管中,依次稀释至103 稀释度.各取0.1mL 已稀释103 倍的水样分别接种到三个培养基上培养,记录的菌落数分别为55,56,57.则每升原水样中大肠杆菌数为______个.
              (3)有三种材料或用具需要清毒或灭菌:①培养细菌用的培养基与培养皿;②玻棒、试管、烧瓶和吸管;③实验操作者的双手•其中需要消毒的是______(填序号),需要灭菌的是______(填序号).
              Ⅱ如表是某公司研发的一种培养大肠杆菌菌群的培养基配方.
              成分 蛋白胨、牛肉膏 乳糖 蔗糖 K2HPO4 显色剂 琼脂
              含量(g) 10.0g 5.0g 5.0g 2.0g 0.2g 12.0g
              将上述物质溶解后用蒸馏水定容到1000mL
              (1)根据用途划分该培养基属于______培养基(填“选择”或“鉴别”).该培养基中的碳源是______.
              (2)以下微生物发酵生产特定产物时,所利用主要微生物的细胞结构与大肠杆菌相同的是______(多选)
              A.制作果酒 B.由果酒制作果醋 C.制作泡菜 D.制作腐乳.
            • 4.

              存在于蔬菜和粗加工的谷类中的纤维素(即膳食纤维)对人体的健康有着重要的作用。但纤维素不能被人体吸收,因为人体缺乏分解纤维素的酶。某校生物兴趣小组开展了以下探究纤维素酶研究的工作,请回答下列问题:

              (1)纤维素酶是一种复合酶,包括C1酶、Cx酶和葡萄糖苷酶三种,其中能将纤维素分解为纤维二糖的是________、________。

              (2)土壤中不少微生物都具有分解纤维素的能力,可从枯枝落叶多的腐殖土中采样,还可以将富含________的物质埋在土壤中。取回的土样中含有多种微生物,在培养基中加入________染料来筛选纤维素分解菌,该染料可与纤维素形成________复合物,将来以培养基中________的出现做为筛选纤维素分解菌的依据。

              (3)牛、羊等食草动物也具有消化纤维素的能力。若从牛的胃中分离出纤维素分解菌,与从土壤中分离出的纤维素分解菌相比较,除了要调整培养基的________外,还必须提供________环境。

            • 5.

              [生物选修1:生物技术实践]

                 甘蔗是一种高光效的植物,单位面积产量很高,目前已成为燃料酒精生产的重要原料。与化石燃料相比,酒精燃料可以再生,而且二氧化碳排放量少,具有低能耗、低污染、低排放的特点,为基础的低碳经济模式。

              (1)利用甘蔗生产燃料酒精的一般工艺流程为甘蔗—榨汁(蔗糖)—酵母发酵—蒸馏—成品(燃料酒精)—蔗渣由微生物分解再利用。具有耐高糖和耐酸特性的酵母菌是理想的酒精发酵菌种,对野生酵母菌进行诱变后通过筛选可以得到具有这些特性的突变菌,诱变及筛选过程如下:

              步骤1:野生菌液体培养一段时间后接受紫外线照射诱变处理。

              步骤2:从野生菌液中分离出理想的酵母菌菌种,需要用到________培养基,制备该培养基时要注意________和________。加琼脂后灭菌,制成固体培养基。为防止培养皿出现冷凝水影响菌落生长,需将培养皿________。

              步骤3:将紫外线照射后的菌液稀释,涂布在固体培养基的表面。接种操作一定要在酒精灯火焰附近进行,原因是________。

              步骤4:根据是否能在该培养基上生长筛选出突变菌。由上述步骤筛选出的酵母菌与野生酵母菌相比,具有________的特点。

              (2)利用获得的突变菌和榨汁进行酒精发酵实验,除了将培养基灭菌、保持空间洁净外,发酵过程中防止外来杂菌入侵可行的方法还有(列举一种)________。

              (3)酵母菌不能分解蔗渣,因其不含有能够分解蔗渣的________酶。若从土壤中分离具有这种酶的微生物,所需要培养基中的碳源为________。

            • 6.

              [生物——选修1:生物技术实践]

              新鲜的泡菜滤液中含有乳酸菌,可作为实验材料分离纯化乳酸菌。请回答下列问题:

              (1)分离纯化乳酸菌时,首先需要用无菌水对泡菜滤液进行________,这样做的理由是________。

              (2)分离纯化所用固体培养基中因含有碳酸钙而不透明,乳酸菌产生的乳酸能溶解培养基中的碳酸钙,从而使培养基在分离纯化过程中会形成________。

              (3)若要长期保存乳酸菌,菌液中常需要加入一定量的________(填“蒸馏水”“甘油”或“碳酸钙”),且要放置在________(填“-5”“-20”或“-100”)℃的冷冻箱中。若要短期保存乳酸菌,可将菌种接种到试管的________(填“溶液中”“固体培养基表面上”或“固体斜面培养基上”),菌落长成后,将试管放置在________(填“-4”“0”或“4”)℃的冰箱中保藏。

            • 7.
              为了分离和纯化高效分解石油的细菌,科研人员利用被石油污染过的土壤进行如图A所示的实验.

              (1)配制好的培养基通常使用 ______ 法灭菌.步骤③与步骤②中培养基成分相比,最大的区别是 ______ .
              (2)同学甲进行步骤④的操作,其中一个平板经培养后的菌落分布如图B所示.该同学的接种方法是 ______ ,出现图B结果可能的操作失误是 ______ .
              (3)同学乙也按照同学甲的接种方法进行了步骤④的操作:将1mL样品稀释100倍,在3个平板上分别接人0.1mL稀释液;经适当培养后,3个平板上的菌落数分别为56、58和57.据此可得出每升样品中的活菌数为 ______ 个.
              (4)步骤⑤需要振荡培养,原因是 ______ .
              (5)步骤⑤后取样测定石油含量的目的是 ______ .
            • 8.

              (1)为了获得能合成纤维素酶的单菌落,可采用     法将初筛菌液接种在    (固体/液体)培养基上,这种培养基属于     (鉴定/选择)培养基。

              (2)关于制备固体培养基的叙述,错误的是     

              A.制作固体培养基时可以加入琼脂

              B.待平板冷却凝固约5~10min后将平板倒过来放置

              C.待培养基冷却至50℃左右时进行倒平板

              D.顺序为计算、称量、溶化、倒平板、灭菌

              (3)下表的培养液pH均为4.8,若对MC﹣1中纤维素酶的活力进行测定,则不能选择表中的哪几种培养液     ?(多选,填字母)

              培养液

              纤维素

              纤维素酶

              NaNO3

              牛肉膏

              K2HPO4

              KCl

              MgSO4•7H2O

              FeSO4

              A

              25g /L

              1g /L

              0. 5g /L

              1g /L

              0. 01g /L

              B

              3g /L

              1g /L

              0. 5g /L

              1g /L

              0. 01g /L

              C

              25g /L

              1μg/L

              3g /L

              1g /L

              0. 5g /L

              1g /L

              0. 01g /L

              D

              25g /L

              3g /L

              1g /L

              0. 5g /L

              1g /L

              0. 01g /L


              A.A   B.B   C.C   D.D

              (4)某同学发现培养基上感染了几种细菌。若在以尿素为唯一氮源的培养基中加入     指示剂培养几种菌后,指示剂变红就可以鉴定其中含有能够分解尿素的细菌;若在以纤维素为唯一碳源的培养基中加入   染料培养后,培养基中出现透明圈,就可以鉴定其中含有纤维素分解菌。

            • 9.
              水稻纹枯病是一种真菌性病害,在我国长江流域和南方的一些省区居水稻病害之首.土壤中某些拮抗微生物与水稻纹枯菌共培养时会形成抑菌圈,为水稻纹枯病生物防治提供了重要依据.科研人员进行了以下研究,请回答相关问题:
              (1)筛选菌株
              水稻纹枯菌的拮抗微生物可从水稻田采集水稻组织或 ______ 进行筛选,将所取样品每份称取5g放入液体培养基中培养24h后,取适量培养液涂布于琼脂平板上,培养5天后,挑选形态不同的 ______ ,对其进行编号.然后挑取少许菌株分别接种于长满水稻纹枯菌的琼脂平板上,培养3天后,观察纹枯菌的生长,根据 ______ 选出某理想菌株,编号为T4.
              (2)鉴定菌株T4所属的细菌类型
              提取菌株T4基因组DNA,扩增其16S rDNA(能体现不同菌属之间的差异,长度接近1000个碱基对).已知PCR扩增过程中,耐高温的DNA聚合酶合成子链的效率约为每分钟形成1000个磷酸二酯键,则对PCR扩增仪进行程序设定时,应将每轮循环的延伸时间定为 ______ ,对扩增产物 ______ 后确定该菌株所属细菌类型.
              (3)探究菌株T4的生长和抑菌活性物质产生的最适条件
              研究小组将菌株T4的单菌落接种至液体培养基中,振荡培养,分别于不同起始 pH、不同培养温度下测定细菌的生长量和抑菌效果,其中细菌生长量测定采用分光光度法,吸光度(OD值)和样本溶液浓度成正比.本实验于波长为640nm处记录菌液的吸光度(OD640),得到如下曲线:

              由图可知,菌株的最适生长条件为: ______ ,与其抑菌活性物质产生的最适条件 ______ .(一致/不一致)
              (4)菌种保存
              为了长期保存菌株T4,可在3mL的甘油瓶中,装入1mL甘油后 ______ 处理,再将1mL培养的菌液转移到甘油瓶中,放在冷冻箱中长期保存.
            • 10.
              下表是某种培养基的成分,据表回答:
              葡萄糖  NH4NO3  K2HPO4  KH2PO4  NaCl  MgSO4  Fe2SO4  CaCl2  H2O
               10g  5g  30g  10g  0.01g 0.5g   03g  5g  1000ml
              (1)该培养基用于培养微生物,营养物质可分 ______ 类.培养的微生物.其同化作用类型是 ______ .
              (2)如果用于培养乳酸杆菌,还需要添加 ______ .
              (3)如果用于培养霉菌,需将培养基的PH调至 ______ 性,培养细菌需将pH调至 ______ 性.
              (4)对培养基进行灭菌,应该采用的方法是 ______ .如果要观察菌落,需要添加 ______ .
              (5)若培养基中加人伊红美蓝,可以用于检测 ______ 细菌,这种培养基被称为 ______ 培养基.
              (6)植物组织培养基时,常用的培养基是 ______ 培养基.这时,需要将上述培养基中的葡萄糖换成 ______ ,另外添加其他有机物等,还常常需要添加 ______ .
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