下面是获取某种二倍体抗虫植株的技术流程图：

请完成下列问题：

（1）上图中二倍体植物愈伤组织是外植体在适宜的_________________及温度、PH等条件下培养形成的，这一过程被称为___________。

（2）在获取抗虫植物的技术流程中，______________ 、__________________和工具酶等物质均来自微生物。

（3）下图中A、B、C、D四段DNA单链是根据毒蛋白基因对应片段合成的。假定在该DNA复制中，其中以a链为模板的复制，其子链是由左向右延伸的。

则在流程图的过程①中应选择___________（填字母）作为引物。如果选取的引物，使过程①的效率很低，则所选的引物中可能存在___________和_______________。

（4）如果要获取检测毒蛋白的单克隆抗体，通常要在动物细胞工程中_________和__________ 等技术的支持。

下图表示“华恢l号”抗虫水稻主要培育流程，据图回答：

（1）杀虫基因（crylA）是根据几种Bt毒蛋白的分子结构，设计并人工合成的，这属于______________工程技术范畴。

（2）组建理想的载体需要对天然的质粒进行改造。下图是天然土壤农杆菌Ti质粒结构示意图（示部分基因及部分限制酶作用位点），据图分析：

①人工改造质粒时，要使抗虫基因能成功表达，还应插入________________。

②人工改造质粒时，用限制酶Ⅰ处理，其目的是：第一，去除质粒上的____________（基因），保证T－DNA进入水稻细胞后不会促进细胞的分裂和生长；第二，使每种限制酶在质粒上只有单一作用位点，有利于__________。第三，使质粒大小合适，可以提高转化效率等。

③若用限制酶Ⅱ分别切割经过②过程改造的理想质粒和带有抗虫基因的DNA分子，并构成重组Ti质粒。分别以含四环素和卡那霉素的培养基培养已成功导入抗虫基因的水稻胚细胞，观察到的细胞生长的情况是：在含四环素的培养基中____________，含卡那霉素的培养基中______________。

（3）“华恢l号”抗虫水稻主要培育流程④过程中，需使用的生物技术是__________。要确定杀虫基因（crylA）导入受体细胞后，是否能表达，需进行检测和鉴定，请写出在个体水平上的鉴定过程：________________________________。

请回答：

（1）培育转基因奶牛时，需要在生长激素编码序列前插入      的启动子。

（2）由基因表达产物无法推知启动子碱基序列，其原因是      。

（3）过程①需选择的限制酶是      ，过程③需选择的限制酶是      。过程④需要使用的工具酶是      。

（4）过程④中可以根据编码序列两端的部分碱基序列设计      进行扩增。扩增过程中，在第      轮循环产物中开始出现两条脱氧核苷酸链等长的DNA片段。

（5）过程⑤中克隆的启动子与外源基因编码序列连接时，原引物a所在的P片段的碱基对数目应是3的整数倍，目的是      （2分）。

如表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点，图1、图2中箭头表示相关限制酶的酶切位点．

（1）限制酶SmaⅠ和XmaⅠ作用的不同点是_______________________．

（2）图2中的目的基因D需要使用_______________剪切才能获得，因而需要对图1所示的运载体进行改造，构建新的限制酶酶切位点，试帮助完成构建过程（填括号中物质的序号）：首先用__________处理质粒；然后用__________处理质粒，使被切开的质粒末端连接上相应的脱氧核苷酸；再用

__________处理质粒，形成相应的限制酶酶切割位点，它可被_______识别．（构建需要的所有条件如下：①EcoRⅠ②MseⅠ③PstⅠ④DNA连接酶⑤DNA聚合酶）

（3）检测筛选是一个重要步骤，图3表示在一系列培养皿的相同位置上能出现相同菌落的一种接种方法与培养方法，以检测基因表达载体是否导入大肠杆菌，培养基除了含有细菌生长繁殖必需的成分外，培养基A和培养基B分别还含有______和_______．从筛选结果分析，含目的基因的是_______（填图中编号）菌落中的细菌．

下面甲图中DNA决定某一多肽链中的酪氨酸和丙氨酸过程示意图，乙图示DNA样品经PCR技术(聚合酶链式反应)扩增，可以获取大量DNA克隆分子。分析回答：

（1）甲图中含有     种核苷酸；丙氨酸的遗传密码子是         。该图表示了DNA中遗传信息的                过程。

（2）有一种贫血症是血红蛋白分子的一条多肽链上，一个酪氨酸被一个苯丙氨酸所替代造成的。此种贫血症的根本原因是            ，即          发生了改变。

（3）乙图的“PCR”与人体内的DNA复制相比有何特殊之处?                。

（4）现在要通过“PCR”得到甲图中DNA片段的1024个克隆片段，则至少要向试管中加入         个腺嘌呤脱氧核苷酸。

在20世纪初，科学家用植物细胞杂交方法，将白菜的原生质体和甘蓝的原生质体融合，成功地培育出了“白菜—甘蓝”杂种植株，据图回答下列问题：

（1）过程b完成的标志是      。要促进杂种细胞的分裂生长，培养基中应有营养物质和激素，其中激素包括        和           两类植物激素。

（2）在利用杂种细胞培育成为杂种植株的过程中，依据的原理是          ，c涉及的分裂方式为                  。

（3）若白菜细胞内有m条染色体，甘蓝细胞含n条染色体，则“白菜—甘蓝”细胞内含     条染色体；若杂种细胞培育成为“白菜—甘蓝”植株为四倍体，则此杂种植株的花粉经离体培育得到的植株属于几倍体植株？       。

（4）利用基因工程菌生产药物目前已经成为了一项成熟技术，如图所示为将人类的白细胞介素2基因（白细胞介素2是一种具有免疫活性的可溶性蛋白质）导入到大肠杆菌体内，获得能够生产白细胞介素2的“工程菌”的示意图，结合所学知识回答下列问题：

为了培育含有人类的白细胞介素2基因工程菌，需要大量的目的基因，这可利用________技术在体外进行，该项技术是利用DNA复制的原理，使基因数量呈指数方式增加。

（5）在构建基因表达载体过程中，需要利用到的基因工程工具有________，图中构建好的基因表达载体中作为标记基因的是________。

（6）基因工程制药中经常采用细菌、酵母菌等微生物作为受体细胞的原因是________。以细菌为转化对象时，要用Ca2＋处理细胞，使之处于感受态，这种状态下细胞的特点是________。

（7）在筛选已经成功导入目的基因的细胞时，可以利用含有________的培养基进行，最终确定目的基因成功转化，即产生白细胞介素2则可采用________技术。

下列是有关基因工程和细胞工程的问题，请据图分析回答。

科学家通过基因工程，成功培育出能抗棉铃虫的棉花植株——抗虫棉，其过程大致如图所示。

 (1)细菌的基因之所以能“嫁接”到棉花细胞内，原因是                 。

 (2)上述过程中，将目的基因导入棉花细胞内使用了            法，这种导入方法较经济、有效。目的基因能否在棉株体内稳定维持和表达其遗传特性的关键是           ，还需要通过检测才能知道，检测采用的方法是         。

 (3)利用基因工程技术培育抗虫棉，相比诱变育种和传统的杂交育种方法，具有           和            等突出的优点，但是目前基因工程仍不能取代传统的杂交育种和诱变育种。与基因工程技术相比，杂交育种和诱变育种方法主要具有          的优点。

 (4)某棉农在食用该抗虫棉种子压榨的棉籽油炒芹菜后，出现鼻塞流涕，皮肤骚痒难忍症状。停用一段时间后这些症状会自然消失，该现象很可能是           。

请回答下列有关基因工程和细胞工程方法的问题：

（1）培育转基因植物过程的核心步骤是         ，其目的是使目的基因在受体细胞中              ；基因表达载体中的启动子是                识别和结合的部位。

（2）用两种限制酶XbaI和SacI（两种酶切出的黏性末端不同）切割某DNA分子，获得含目的基因的片段，若用该片段构建基因表达载体，适合选用的Ti质粒是上图中的             。

（3）细胞工程是通过细胞水平和              水平上的操作，按照人的意愿来改变细胞内的遗传物质或获得细胞产品的一门综合科学技术。

（4）植物细胞工程的基本技术包括：植物组织培养和      。其中，后者的原理是                  。

(1)比较图一与图二，所需要的条件除模板有所不同之外，          和          也不同，图二过程进行时碱基之间遵循          原则。

(2)与图一中A链相比，C链特有的化学成分是          和          。

(3)图三所示的是遗传信息传递和表达的规律，被命名为          。过程②必需的酶是                 ，其中可在人体正常细胞内发生的过程有             。（填序号）

(4)图四中Bt为控制晶体蛋白合成的基因，将Bt基因导入棉花细胞后，普通棉花变成了转基因抗虫棉。c过程对应于图三中               过程(填序号)。活化的毒性物质应是一种          分子。

MagaininmⅡ是非洲爪蟾皮肤分泌的一种抗菌肽，能对细菌、真菌、肿瘤细胞等产生明显的抑制效果。科学工作者通过基因工程技术获得能表达该种抗菌肽的大肠杆菌。请回答下列问题：

(1) MagaininmⅡ基因能与运载体能结合，是由于它们在结构上具有                                 等共同点；能在大肠杆菌细胞中表达出相同抗菌效果的抗菌肽，其原因是                                   。

(2)用PCR技术对MagaininmⅡ基因进行扩增时,加热至       ℃使MagaininmⅡ基因解链为单链，            与该单链中的相应互补序列结合，然后在Taq酶的作用下进行延伸。

(3)下图为某质粒的示意图,若目的基因插入b位点，则筛选出导入重组质粒的受体菌的方法是                                                                 。