微生物的实验室培养要用到基础培养基，但培养不同的微生物还需满足其生长、繁殖的特殊需求。下列有关说法正确的是

（每空1分，共7分）生物技术在日常生活中应用非常广泛，请回答下列与生物技术有关的问题：

（1）消毒和灭菌是两个不同的概念。下列适用于消毒处理的是________。

①牛奶生产线②培养基③医用注射器④注射药物时的皮肤⑤接种环⑥手术刀

（2）在制备果酒过程中，发酵温度需要控制在________。利用葡萄糖制作果酒和果醋时，使用的微生物在结构上的不同点主要是________。

（3）实验室常采用________法来检测泡菜中亚硝酸盐的含量。亚硝酸盐在特定的条件下会转变成致癌物——_________，测定亚硝酸盐的含量时，需要在盐酸酸化条件下，亚硝酸盐能与___________发生重氮化反应。

（4）农作物秸秆含有丰富的纤维素，纤维素要经过纤维素分解菌分解成葡萄糖，人们常常是从土壤中分离纤维素分解菌，分离纤维素分解菌常用的方法是______________________。

微生物的实验室培养要用到基础培养基，但培养不同的微生物还需满足其生长、繁殖的特殊需求。下列有关说法正确的是

I.[生物一选修1:生物技术实践]

酵母菌是生物科学研穷中一种重要的生物材料，请回答：

（1）酵母菌的新陈代谢类型是__________，其细胞内将葡萄糖分解为酒精的酶存在于__________。

（2）某同学尝试用新鲜葡萄制作葡萄酒、为验证发酵液中含有酒精，取2mL发酵液加入试管中，滴加O.5mL浓硫酸酸化的重铬酸钾溶液并轻轻震荡，观察到溶液变__________色，则证明发酵液中含酒精。

（3）研究者利用基因工程技术改造酵母菌，得到如下四种变异菌株：①菌株Ⅰ——不能合成纤维素酶，菌株Ⅱ——合成的纤维素酶不能分泌到细胞外，菌株Ⅲ——合成的纤维素酶能分泌到细胞外，菌株Ⅳ——合成的纤维素酶分泌并固定于细胞壁。

在以纤维素为唯一碳源的培莽基上能生长繁殖形成菌落的是菌株_______，若在培养基中加入_______，则菌落周围会出现透明圈。在利用纤维素生产酒精时，与菌株Ⅲ相比，菌株Ⅳ的纤维素酶的利用率高，因为______________________________________________________________。

（4）为研究发酵罐中酿酒酵母菌的生长情况，常要取样统计分析，并测定pH值。若某研究人员将样品的次序搞乱了，那么判断取样顺序的主要依据基__________（填“酵母菌的数量”或“发酵液的pH”）。

II.[生物一选修3:现代生物科技专题]

内皮抑素是一种效果良好的新型抗癌药物，由胶原XⅤⅢ（广泛存在于肝脏等组织中）降解产生。我国科学家研制成含转入内皮抑素基因双歧杆菌的口服液，口服后，双歧杆菌在肠道定植、繁殖，双歧杆菌死亡裂解后，其产生的内皮抑素活性片段被吞噬、转运到肿瘤组织发挥作用。回答下列问题：

（1）要利用逆转录的方法合成人内皮抑素基因，应从__________组织细胞中提取mRNA，与细胞中内皮抑素基因相比，这种方法合成的cDNA没有__________、启动子、终止子等。

（2）根据内皮抑素基因的脱氧核苷酸序列设计并合成引物，利用__________技术得到大量内皮抑素基因。

（3）临床上也有通过静脉注射内皮抑素基因重组腺病毒，使肿瘤生长受到抑制。在进入临床使用前需要进行目的基因的检测与鉴定：用胰蛋白酶将血管内皮组织___________，制成细胞悬液→转入

含_____________________等天然成分的培养液中培养得到大量血管内皮细胞→用重组腺病毒感染血管内皮细胞，若抗原—抗体杂交检测呈阳性并观察到细胞凋亡，则说明_________________。

（4）口服含转入内皮抑素基因双歧杆菌口服液、静脉注射内皮抑素基因重组腺病毒，两种方法都能使肿瘤生长受到抑制，其中属于体内基因治疗的是__________（填“第一种”或“第二种”）。

氟乐灵（C₁₃H₁₆F₃N₃0₄）是播种前封杀棉田中一年生杂草的主要农药之一。氟乐灵残留大多聚集在土壤深度10～20cm，容易造成表层土壤的持续污染。为降低土壤中氟乐灵的残留，某科研团队从连作15年的棉田分离出了对氟乐灵有良好降解作用的菌株D8，并对其降解特性进行了一系列的研究。图1～3是部分研究成果，图中数据均为接种72h后测得，OD₆₀₀表示菌种在波长600nm处的吸光值，代表菌密度。请回答下列问题：

（1）土壤取样时，一般采集深度选择在10～20cm，原因是      。

（2）为分离出氟乐灵降解菌，研究人员配制了选择培养基，该培养基应以氟乐灵为唯一的     以达到分离目的。

（3）对氟乐灵降解菌D8进行分离和计数常用稀释涂布平板法，此方法测得的菌落数往往比活菌的实际数目偏      ，原因是     。

（4）分析图1可知，接种量对菌密度和降解率影响分别是     。

（5）据图2分析，在氟乐灵质量浓度较高的情况下，降解率反而较低，原因是      。

（6）图3研究过程中，为了排除PH对氟乐灵降解的影响，需设置对照，对照组的处理方式是    ，结合图1、2、3分析，菌株D8对氟乐灵进行降解的最佳条件组合是    。

茶饮料主打“健康牌”，极少添加人工合成的色素、香精等添加剂，更多利用从植物中提取的天然成分。请回答：

(1)红茶菌液是一种传统的活菌饮料，由酵母菌、醋酸菌和乳酸菌共同发酵产生。纯化菌种时，在固体培养基上常用______________法接种菌种。在接种活菌前，将红茶糖液煮沸后冷却，煮沸的目的是________。

(2)茶饮料所用的胡萝卜素，通常采用________法从胡萝卜中提取；提取后常用________法对提取物中的胡萝卜素进行鉴定。

(3)茶饮料所用的植物芳香油的提取流程如下：

茉莉花＋水→过程A→油水混合物→油层分离与粗提取→加无水硫酸钠→过滤→茉莉油

过程A表示________，向粗提精油中加入无水硫酸钠的目的是______________。

(4)酸菜制作起主要作用的微生物是____________。但是在发酵初期，很多杂菌会大量繁殖，其中导致泡菜水的表面长白膜的微生物是________。

生产实践中应用的菌种主要来土壤,从土壤中分离微生物的一般实验流程是：土壤収样—选择培养—梯度稀释—鉴別培养。请回答：

（1）欲从土壤中分离纤维素分解菌，最好选择在      环境中采集土样，所选择的培养基应以       作为唯一碳源。

（2）Taq耐热菌的发现和分离为基因工程的发展作出了突出贡献。分离Taq耐热菌所需要的特殊培养条件是             ，在生物休内进行DNA复制所必需而PCR技术中不需要的酶是             。

（3）下图是纯化微生物培养的效果图。请冋答：

①先配制好的培养基在接种前都要进行             灭菌，在整个微生物的分离和培养过程中，一定要注意在            条件下进行。

②获得图A效果的接种方法是            ,获得图B效果的接种方法是            。

蔬菜在经过腌制及调味之后可制成泡菜，有特殊的风味。现代人在食材取得无虞的生活环境中，还是会制作泡菜。请回答下列问题：

(1)制作泡菜时，为消灭杂菌，所用盐水需先       。泡菜制作过程中，乳酸发酵发生在乳酸菌细胞的        中，该过程中亚硝酸盐含量的变化为        。

(2)从开始制作到泡菜质量最佳这段时间内，泡菜液逐渐变酸，这段时间内泡菜坛中乳酸菌和其他杂菌的消长规律是                   ，主要原因是                     。

(3)为了从泡菜汁中筛选分离出发酵产酸速度快的乳酸菌，科研人员做了如下实验。

①在无菌操作下，将不同稀释度的泡菜汁涂布于添加了CaCO₃的乳酸菌培养基(MRS培养基)平板上。在适宜条件下培养后，挑选出菌落后，继续在MRS平板上用          法分离，得到单菌落。

②将分离得到的乳酸菌分别接入多个MRS液体培养基中，相同时间内间隔取样测定pH，挑选出在培养基中            的乳酸菌为最佳。