2.
萌发的禾谷类种子中淀粉酶活性较强,主要有α淀粉酶和β淀粉酶.α淀粉酶不耐酸、较耐热,在pH为3.6以下时迅速失活,而β淀粉酶不耐热,在70℃条件下15min后失活.
实验材料:萌发3天的小麦种子(芽长约1cm).
主要试剂及仪器:麦芽糖标准液、质量分数为5%的淀粉溶液、斐林试剂、蒸馏水、恒温水浴锅等.
实验步骤:
步骤一:制作麦芽糖梯度液.取7支干净的具塞刻度试管,编号,按下表所示加入试剂,再将试管置于60℃水浴中加热2min,取出后按试管号顺序排列.
试剂 |
麦芽糖标准液(mL) |
蒸馏水(mL) |
斐林试剂 (mL) |
试管号 |
1 |
0 |
2.0 |
2.0 |
2 |
0.2 |
1.8 |
2.0 |
3 |
0.6 |
1.4 |
2.0 |
4 |
1.0 |
1.0 |
2.0 |
5 |
1.4 |
X |
2.0 |
6 |
1.6 |
Y |
2.0 |
7 |
2.0 |
Z |
2.0 |
步骤二:利用萌发3天的小麦种子制备淀粉酶溶液.
步骤三:将装有淀粉酶溶液的试管置于70℃水浴中15min,取出后迅速冷却.
步骤四:另取四支试管,编号A、B、C、D,向A、B试管中各加5mL质量分数为5%的淀粉溶液,向C、D试管中分别加入2mL已经处理的酶溶液(忽略其中含有的少量麦芽糖)和蒸馏水,将四支试管置于40℃恒温水浴中保温10min,然后将C、D试管中的溶液分别加入到A、B试管中,摇匀后继续在40℃恒温水浴中保温10min.
步骤五:取A、B试管中反应溶液各2mL分别加入到E、F试管中,然后向E、F试管中分别加入
______
,
______
后,观察颜色变化.
结果分析:将E试管中的颜色与步骤一中获得的麦芽糖标准液进行比较,获得该试管中麦芽糖的浓度,并计算出α淀粉酶催化效率.请回答下列有关问题.
(1)本实验的目的是测定
______
.
(2)步骤一的5~7号试管中加入蒸馏水的量(X、Y、Z)分别是
______
(单位:mL).
(3)实验中B试管所起的具体作用是
______
.
(4)请补全步骤五的做法.
(5)若要测定另一种淀粉酶的活性,则需在步骤
______
进行改变.