现有两种淀粉酶A与B,某生物兴趣小组为探究不同温度条件下这两种淀粉酶的活性,设计实验如下。

实验原理:温度等条件可以影响酶的活性;淀粉在淀粉酶的催化作用下产生麦芽糖;用分光光度计测量溶液的吸光度时,物质含量越多,其吸光度越大,因此可测出物质的相对含量。

实验材料:一定浓度的淀粉溶液、相同浓度的淀粉酶A和淀粉酶B溶液、水浴缸、温度计等。

实验过程:如下表所示。

实验结果:用分光光度计对各组淀粉含量进行检测,结果如下图所示。

(1)该实验的自变量是           ,无关变量有           (至少写出2种)。 

(2)根据实验结果分析,下列叙述正确的是( )

A.酶A在20℃条件时活性较高

B.酶A的活性小于酶B的活性

C.酶B在40℃条件时活性较高

D.大于50℃条件时,酶A部分失活

(3)此实验用分光光度计检测底物淀粉的剩余量来表示酶的活性,能不能用斐林试剂检测生成物麦芽糖的含量来表示?           ,原因是               。 

(4)若要进一步探究酶B的最适温度,实验设计的主要思路应是              

某研究性学习小组利用“荧光素——荧光素酶”生物发光法，测定人参愈伤组织中ATP的含量，以研究人参细胞能量代谢的特点。

实验原理：荧光素在荧光素酶、ATP等物质参与下，进行反应发出荧光；用分光光度计可测定发光强度；当荧光素和荧光素酶都足量时，在一定范围内，ATP的含量与发光强度成正比。

实验步骤：

步骤一：ATP的提取：称取一定量的人参愈伤组织，研磨后沸水浴10 min，冷却至室温，离心，取上清液。

步骤二:ATP的测定：吸取一定量的上清液，放入分光光度计反应室内，并注入适量的所需物质，在有氧等适宜条件下进行反应，记录发光强度并计算ATP含量。

请回答下列问题：

（1）步骤一中的沸水浴处理，使酶的____________________被破坏而失活。

（2）步骤二注入的物质中，属于反应物的是____________________；分光光度计反应室内能量形式的转换是____________________。

（3）荧光素酶价格昂贵，为能准确测定出ATP的含量，又能节省酶的用量，学习小组探究了“测定ATP时所需荧光素酶溶液的最佳浓度”，实验结果如图。

①学习小组配制了1×10^－8mol/L ATP标准液、70 mg/L荧光素溶液（过量）和浓度分别为0 mg/L、10 mg/L、20 mg/L、30 mg/L、40 mg/L、50 mg/L、60 mg/L的荧光素酶溶液进行实验。

②结果表明：图中____________________点所对应的荧光素酶浓度为最佳浓度。e、f、g点所对应的荧光素酶浓度不同，但发光强度相同，这是因为____________________。

（4）ATP测定对食品卫生监控有重要意义。食品卫生检验人员利用上述生物发光法测定某熟食品样品中细菌的ATP总含量，测算出了细菌的数量，从而判断食品污染程度。作出上述判断的理由是：每个细菌细胞中ATP的含量____________________。

在有氧气和ATP的条件下，荧光素酶能催化荧光素的氧化而发出荧光。请根据以下提供的实验材料，完善实验思路，并回答有关问题。

实验材料：

荧光素甲溶液，荧光素乙溶液，荧光素酶A溶液，荧光素酶B溶液，ATP溶液。

（1）现欲探究“不同的荧光素酶是否都能催化不同的荧光素氧化”。请完善实验思路。

实验步骤：

①取4支试管，编号1、2、3、4。

②1、2号试管加入适量荧光素甲溶液，3、4号试管加入等量荧光素乙溶液。

③________号试管加入适量荧光素酶A溶液，________号试管加入等量荧光素酶B溶液。

④4支试管加入适量且等量的________溶液。

⑤在暗处观察各试管是否发出荧光。

实验结果预测及结论：

若实验结果为________，支持“不同的荧光素酶都能催化不同的荧光素氧化”。否则，不支持。

（2）在有一定量的某种荧光素——荧光素酶混合液的测试管中，加入适量不同浓度的ATP溶液，然后把测试管放入荧光光度仪测荧光素发出的荧光强度。结果如图。上述方法可用来测量各种细胞内的ATP含量，衰老细胞的荧光强度应比同类正常细胞________。在测定细胞内ATP含量时需制备细胞匀浆，必须注意____________________________________________________。

（2）如果两支试管的现象均不明显，从实验材料角度分析，原因可能是               。

（3）过氧化物酶能催化H2O2的分解，产生的[O]能使溶于水的无色焦性没食子酸氧化生成橙红色沉淀。为了鉴定马铃薯块茎是否含有过氧化物酶，设计了如下实验。

①3号试管内加入的物质是                                           。

②设计2号试管作为对照的具体目的是                                      。

③如果2号试管未产生颜色反应，则出现橙红色沉淀的是第        号试管。