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            • 1. (13分)同学们为了探究土壤中的微生物对尿素是否有分解作用,设计了以下实验,并成功筛选到能高效降解尿素的细菌(目的菌)。培养基成分如下表所示,实验步骤如下图所示。请分析回答问题:

              KH2PO4

              1.4 g

              Na2HPO4

              2.1 g

              MgSO4·7H2O

              0.2 g

              葡萄糖

              1 g

              尿素

              10 g

              琼脂

              15 g

              将上述物质溶解后,用蒸馏水定容到1 000 mL

              (1)简述土壤中可分解尿素的细菌的鉴定方法及原理:在以尿素为唯一氮源的培养基中加入________指示剂,细菌合成的________将尿素分解为________,pH升高,使指示剂变为红色。

              (2)培养基中加入尿素的目的是筛选目的菌, 这种培养基属于_____培养基。

              (3)“目的菌”生长所需的氮源和碳源分别来自培养基中的________和________,实验中需要振荡培养,原因是______________________。

              (4)下图是利用________法进行微生物接种,把聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。

              (5)关于下图的操作方法和结果,叙述正确的是    __。

              A.操作前要将接种环放在火焰边灼烧灭菌

              B.划线操作须在火焰上进行

              C.在5区域中才可以提到所需菌落

              D.在1、2、3、4、5区域中划线前后都要对接种环灭菌

            • 2. (10分).在农业生产研究上,常常需要进行微生物的培养和计数。

              (1) 下图是利用              法进行微生物接种,把聚集的菌种逐步       分散到培养基的表面。

              (2) 分析下面培养基的配方:NaNO3、KH2PO4、NaH2PO4、MgSO4•7H2O、KCl、H2O。若此培养基用于培养分解尿素的细菌,则应除去上述        成分,并加入       物质,以补充       源。若用于培养纤维素分解菌,应加入            物质,为检测纤维素分解菌的存在与否,还应加入          染料,将呈            反应。

              (3) 三位同学用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中细菌数量。在对应稀释倍数为106的培养基中,得到以下统计结果:

              甲同学涂布了两个平板,统计的菌落数是236和260,取平均值248;

              乙同学涂布了三个平板,统计的菌落数是210、240和250,取平均值233;

              丙同学涂布了三个平板,统计的菌落数是21、212和256,取平均值163;

               在三位同学的统计中,只有一位同学的统计是正确的,指出另两位同学的统计为什么不正确?

                                                                                                                                                      

            • 3.

              31.高温淀粉酶在大规模工业生产中有很大的实用性。研究者从热泉中筛选了高效产生高温淀粉酶的嗜热菌,其筛选过程如下图所示。

              (1)从用途上来说,Ⅰ号培养基属于________培养基,仅以淀粉作为________源;从物理状态上来说,Ⅱ号培养基属于固体培养基,配制时一般加入________作为凝固剂。

              (2)进行①过程的目的是________;②过程所使用的接种方法是________法。

              (3)Ⅰ、Ⅱ号培养基配制和灭菌时,灭菌与调节pH的先后顺序是________;一般对配制的培养基采用________法灭菌。

              (4)部分嗜热菌在Ⅰ号培养基上生长时可释放________分解培养基中的淀粉,在菌落周围形成透明圈;应挑出透明圈________(大或小)的菌落,接种到Ⅱ号培养基。

            • 4. (10分)下表是某公司研发的一种培养大肠杆菌菌群的培养基配方,请根据表格和所学知识回答下列相关问题。

              (1)从生态系统的成分上看,大肠杆菌属于           

              (2)若根据用途划分,该培养基属于             (填“选择”或“鉴别”)培养基。若要用上述培养基来筛选出土壤中的尿素分解菌,培养基的营养成分必需怎样更改?                     ,并用        作为指示剂。

              (3)在微生物培养的过程中,为防止杂菌污染,需要对培养基和培养皿进行       ;操作者的双手需要进行清洗和          

              (4)图1和图2是培养某细菌的结果图,其对应的接种方法分别是:           和              ,这两种方法接种后培养基上都可以得到由单个细胞繁殖所形成的           。图1所用的接种方法可用来对活菌进行计数。此外,测定微生物数目的另一种方法是                 

            • 5. 33、 (12分)为了检测某桶装纯净水中的细菌含量,某研究小组测定了水样中的细菌含量,并进行了细菌的分离等工作。下图A、B是实验过程中的部分操作步骤,C、D是经过培养后的实验结果。请回答下列问题:

               

              (1)研究中,首先要配制培养基,培养基中一般应含有__________________等四类营养物质,配制好之后,应该用 __________灭菌法进行灭菌。

              (2)操作A的目的是 _____ ,操作B的接种法培养出的结果应该如图 ___ 所示。

              (3)分析下面培养基的配方:NaNO3、KH2PO4、NaH2PO4、MgSO4·7H2O、KCl、H2O。若此培养基用于培养分解尿素的细菌,则应除去上述_______成分,并加入葡萄糖和______。

               (4)该小组将得到的菌株接种到液体培养基中并混匀,一部分进行静置培养,另一部分进行振荡培养。结果发现:振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度快。其原因是振荡培养能 __________________________________________。

               (5)纤维素分解菌可用于农作物秸秆还田,用__________染色法鉴别纤维素分解菌时,培养基上的菌落周围会出现透明圈,其大小能反映______________ 。

            • 6. 41、(6分)请回答下列与发酵技术和植物组织培养有关的问题:

              (1)腐乳的制作过程中发挥作用的主要微生物合成脂肪酶的场所是         。各地腐乳风味迥异,在原料和菌种相同时,可通过                                           制作出不同风味的腐乳。

              (2)制作泡菜过程中亚硝酸盐的含量变化趋势是                       

              (3)植物花药离体培养产生花药植株时,选材非常重要。对某些不易着色的花粉细胞核,采用的染色方法是                       

              (4)无菌技术中,获得纯净培养物的关键是                                    

              (5)能使纤维素分解成纤维二糖的酶是                            

            • 7. (8分)、植物秸秆中的纤维素可被某些微生物分解,回答下列问题:

              (1)分解秸秆中纤维素的微生物能分泌纤维素酶,该酶是由3种组分组成的复合酶,其中的葡萄糖苷酶可将           分解成          

              (2)在含纤维素的培养基中加入               ,该染料可与纤维素形成红色复合物。用含有该染料的培养基培养纤维素分解菌时,培养基上会出现以该菌的菌落为中心的                 

              (3)为从富含纤维素的土壤中分离获得纤维素分解菌的单菌落,某同学设计了甲、乙两种培养基(成分见下表):

                    

              注:“+”表示有,“-”表示无。

              据表判断,培养基甲         〔填“能”或“不能”〕用于分离和鉴别纤维素分解菌,原因是                                          ;培养基乙      〔填“能”或“不能”〕用于分离和鉴别纤维素分解菌,原因是                                                         

            • 8. (8分)酸菜,古称菹,《周礼》中就有其大名。制作酸菜的初衷是为了延长蔬菜保存期限。请回答: 

              (1)酸菜制作起主要作用的微生物是__________。但是在发酵初期,很多杂菌会大量繁殖,其中导致泡菜水的表面长白膜的微生物是_________________。

              (2)在对该菌种进行培养时,与常规培养基相比还需要额外在培养基中添加______________;在泡菜的腌制过程中,要注意控制腌制的时间、温度和_____________,否则容易造成细菌大量繁殖。

              (3)为了保持所获得菌种纯净,需要进行菌种的保藏。若采用临时保藏,则应将菌种接种到试管的__________________上,放入4℃冰箱中可保藏3~6个月;若要长期保存,可将菌液与灭菌的_____________混匀,放在-20℃的冷冻箱中保存。

              (4)市场上购买的真空包装酸菜,在没有发生漏气状态下发生了“胀袋”现象,A同学怀疑是杂菌污染导致的,B同学怀疑是乳酸菌大量繁殖导致的,说出你支持谁的观点并说出理由。支持_____________,理由是___________________________________________________。

            • 9. 35、(9分) 乳酸菌常用于制作酸奶等发酵食品。研究发现,乳酸菌还可产生乳酸菌素,抑制肉制品中致病菌和腐败菌的生长,起到生物防腐的作用。请回答:

               (1)制作酸奶是利用乳酸菌在            (填“有氧”或“无氧”)条件下,将牛奶中的葡萄糖、乳糖分解成乳酸,同时将奶酪蛋白水解为短肽和     ___     ,不仅容易被人体吸收,也适用于乳糖不耐症人群。若牛奶中含有抗生素,会影响酸奶的制作效果,原因是         _____   ______________         

              (2)纯化乳酸菌时还需要设置未接种乳酸菌的培养基作为对照,若对照组培养基表面没有菌落生长,说明         ______       

               (3)为探究不同种乳酸菌的抑菌效果,将稀释倍数相同的等量乳酸菌培养液滴加在长满致病菌的平板上,一段时间后,会出现以滴点为中心的抑菌圈,实验结果如下表。    

               ①该实验的自变量是       ___________________________________            。    

               ②由实验结果可知,乳酸菌对     ________________     (填致病菌)的抑菌效果比较突出;在生产应用中,不宜采用  _____  号菌株进行防腐。

            • 10. (10分) 有机农药苯磺隆是一种除草剂,长期使用会污染环境。研究发现,苯磺隆能被土壤中某些微生物降解。分离降解苯磺隆的菌株和探索其降解机制的实验过程如图甲、乙所示。

              (1)微生物生长繁殖所需的主要营养物质有碳源、水、___________________四类,该实验所用的选择培养基只能以苯磺隆作为唯一碳源,其原因是________________________________________________________________。

              (2)纯化菌株时,通常使用的划线工具是____________。划线的某个平板培养后,第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌,第二划线区域所划的第一条线上无菌落,其它划线上有菌落。造成划线无菌落可能的操作失误有___________________________________________________________。

              (3)为探究苯磺隆的降解机制,将该菌种的培养液过滤离心,取上清液做图乙所示实验。该实验的假设是_____              

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