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            • 1． 牛的食物主要是草茎类，其中含有大量的纤维素．牛胃内的微生物，在帮助消化和利用植物纤维素方面起了决定性的作用．回答下列问题：
              （1）纤维素是地球上含量最丰富的多糖类物质，组成纤维素的单体为 ______ ．牛胃中某些微生物能够产生纤维素酶，这种酶是一种复合酶，其中的 ______ 能使纤维素分解成纤维二糖．    
              （2）实验室培养牛胃内的微生物，分离得到高纯度纤维素分解菌的关键环节是 ______ ．为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在 ______ 附近进行；倒平板用的培养皿需要保持干燥，可以采用 ______ 法进行灭菌．
              （3）为了从牛胃的食麋中分离出纤维素分解菌，配制的选择培养基要以 ______ 作为唯一碳源．筛选纤维素分解菌时，常用的刚果红染色法有两种，一种是先培养微生物，再加入刚果红进行颜色反应，另一种是 ______ ．在涂布乎板时滴加到培养基表面的菌悬液量不宜过多，原因是 ______ ．
              难度：较易
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            • 2．
              牛的食物主要是草茎类，其中含有大量的纤维素．牛胃内的微生物，在帮助消化和利用植物纤维素方面起了决定性的作用．回答下列问题：
              （1）纤维素是地球上含量最丰富的多糖类物质，组成纤维素的单体为 ______ ．牛胃中某些微生物能够产生纤维素酶，这种酶是一种复合酶，其中的 ______ 能使纤维素分解成纤维二糖．    
              （2）实验室培养牛胃内的微生物，分离得到高纯度纤维素分解菌的关键环节是 ______ ．为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在 ______ 附近进行；倒平板用的培养皿需要保持干燥，可以采用 ______ 法进行灭菌．
              （3）为了从牛胃的食麋中分离出纤维素分解菌，配制的选择培养基要以 ______ 作为唯一碳源．筛选纤维素分解菌时，常用的刚果红染色法有两种，一种是先培养微生物，再加入刚果红进行颜色反应，另一种是 ______ ．在涂布乎板时滴加到培养基表面的菌悬液量不宜过多，原因是 ______ ．
              难度：较易
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            • 3．

              （1）芳香油溶解性的特点是不溶于水，易溶于有机溶剂，因此可用            法提取芳香油。柠檬芳香油的提取常用            法。

              （2）玫瑰精油的提取过程中，分离油层和水层的器皿是            。

              （3）鉴定尿素分解菌的方法是在以尿素为唯一氮源的培养基中加入                    （试剂），鉴定纤维素分解菌的方法是         法。

              （4）制作果酒和果醋的实验流程：挑选葡萄→            →榨汁→            →醋酸发酵

              （5）灭菌是指使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，包括                    。

              难度：中等
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            • 4． 尿素是一种重要的农业肥料，但是不经过细菌的分解，就不能更好地被植物利用．生活在土壤中的微生物种类和数量繁多，同学们试图探究土壤中微生物对尿素是否有分解作用，设计了以下实验，并成功筛选到能高效降解尿素的细菌（目的菌），培养基成分如下表所示，实验步骤如图所示，请回答下列问题：

              KH2PO4 1.4g
              Na2HPO4 2.1g
              MgSO4•7H2O 0.2g
              葡萄糖 10g
              尿素 1g
              琼脂 15g
              将上述物质溶解后，用自来水定容到1000m3
              （1）此培养基能否用于植物组织培养？ ______ ，理由是 ______ ．
              （2）培养基中氮源是 ______ ，这种培养基在功能上属于 ______ 培养基，目的是只允许能合成 ______ 的微生物生长，其他微生物均不能生长．
              （3）欲从土壤中分离获取上述特定微生物，可采用 ______ 法进行接种．
              （4）在以尿素为唯一碳源的培养基中加入 ______ ，使指示剂变红色，而筛选纤维素分解菌的方法是 ______ 法．
              难度：中等
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            • 5． 根据原料不同，生物乙醇可分为以淀粉类物质为原料的第1代生物乙醇和以秸秆等纤维素为原料的第2代生物乙醇．两者的生产过程都需要多种微生物参与，且在较高温度下反应能提高产率．
              （1）生产第1代生物乙醇时，首先利用微生物或酶将淀粉材料彻底水解为 ______ ，才能利用酵母菌在 ______ 条件下将其转化为乙醇．
              （2）生产第2代生物乙醇时需要纤维素分解菌，为此，某同学设计了两种培养基．甲培养基含纤维素粉5g、酵母膏0.5g、水解酪素0.5g、无机盐适量；乙培养基含CMC-Na10g、酵母膏1g、琼脂15g、土豆汁100mL、无机盐适量．
              ①在上述 ______ （填“甲”或“乙”）种培养基上能够筛选出纤维素分解菌的单菌落，筛选该菌落时常需要向该培养基中添加 ______ ；另外一种培养基的作用是 ______ ．
              ②从生态系统的成分上看，纤维素分解菌属于 ______ ；它的同化作用类型是 ______ ．
              （3）在纤维素分解菌培养过程中，除考虑营养条件外，还要考虑 ______ 、酸碱度和渗透压等条件．
              （4）培养纤维素分解菌时，在接种前需要检测培养基是否被污染．对于固体培养基应采用的检测方法 ______ ．
              （5）若用大肠杆菌进行实验，使用过的培养基及其培养物必须经过 ______ 处理后才能丢弃，以防止培养物的扩散．
              难度：较易
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            • 6． 如图是工业上利用微生物由纤维素生产乙醇的基本工作流程，请回答下列问题：

              （1）上述工作流程中①环节需要的微生物大多分布在富含纤维素的土壤环境中，要从土壤中分离获取这种微生物，应采用具有 ______ 作用的培养基，培养基中的碳源为 ______ ．
              （2）为了进一步鉴别该微生物是否是纤维素分解菌，在培养基中需加入 ______ 染料进行鉴定．
              （3）生产中可以满足④环节的常见菌种是 ______ ．
              （4）制作腐乳的实验流程是： ______ →加盐腌制→加卤汤装瓶→密封腌制．
              难度：中等
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            • 7． 利用微生物分解淀粉生产糖浆具广阔的应用前景．某同学为了从长期种植马铃薯的土壤中分离出能够高效分解淀粉的细菌，进行了如下实验．
              实验步骤：
              ①配置以 ______ 为唯一碳源的固体培养基，为了使培养基凝固成固体，应该向培养基中加入的物质是 ______ ．
              ②将土壤样品接种到已灭菌的培养基上，在恒温培养箱中培养一段时间，培养基上出现 ______ ．
              ③将接种针灭菌后，从②中的培养基上挑取一定量细菌，接种入 ______ （填“固体”、“半固体”或“液体”）培养基，在恒温摇床上培养24h，使细菌大量繁殖．
              ④配制与①相同的培养基，并加入少量碘液，用 ______ 法将上一步大量繁殖后的细菌接种到已灭菌的培养基上．
              ⑤培养一段时间后，观察菌落周围培养基的颜色变化和变化范围的大小．周围出现 ______ 现象的菌落即为初选菌落，经进一步分裂、纯化后即可达到实验目的．
              难度：较易
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            • 8． 醋酸菌和纤维素分解菌是工业中常用的微生物．请分析回答下列问题：
              （1）在 ______ 和糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸；当缺少糖源时，醋酸菌可将乙醇氧化为 ______ ，进而生成醋酸．
              （2）为了从某细菌样品中筛选出纤维素分解菌，可采用 ______ 染色法进行筛选．如果样品中细菌浓度较低，可以通过 ______ 培养来增加纤维素分解菌的浓度，该过程所用的培养基为 ______ （固体/液体）培养基．为了纯化纤维素分解菌，某同学采用平板划线法进行接种，在做第二次以及其后的划线操作时，应该从上一次划线的 ______ 开始划线．为了避免环境中微生物的污染，实验操作应在 ______ 附近进行．
              （3）将菌种进行临时保存时，可在低温下使用试管斜面保存，但该方法除保存时间短外，菌种还易 ______ ；若需较长时间保存菌种，可用的方法是 ______ ．
              难度：中等
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            • 9． 分离分解纤维素的微生物的实验流程：土壤取样→选择培养→梯度稀释→将样品接种到鉴别纤维素分解菌的培养基上→挑选符合要求的菌落．请回答下列问题．
              （1）“土壤取样”一般选择 ______ 的环境．进行选择培养的目的是 ______ ．
              （2）分解秸秆中纤维素的微生物能分泌纤维素酶，该酶是由3种组分组成的复合酶，其中的葡萄糖苷酶可将 ______ 分解成 ______ ．
              （3）在含纤维素的培养基中加入刚果红（CR）时，CR可与纤维素形成 ______ 色复合物，但不和水解后的纤维二糖和葡萄糖发生这种反应．用含有CR的该种培养基培养纤维素分解菌时，培养基上会出现以该菌的菌落为中心的 ______ ．据此可以筛选纤维素分解菌．
              （4）为从土壤中分离获得纤维素分解菌的单菌落，某同学设计了甲、乙两种培养基（成分见下表）：
              酵母膏 无机盐 淀粉 纤维素粉 琼脂 CR溶液 水
              培养基甲 + + + + - + +
              培养基乙 + + + - + + +
              注：“+”表示有，“-”表示无．
              据表判断，培养基甲 ______ （填“能”或“不能”）用于分离和鉴别纤维素分解菌，原因是 ______ ；培养基乙 ______ （填“能”或“不能”）用于分离和鉴别纤维素分解菌，原因是 ______ ．
              （5）将样品用 ______ （填“划线法”或“涂布法”）接种到鉴别纤维素分解菌的培养基上，具体操作都要在 ______ 附近进行．
              难度：较易
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            • 10． （14分）

              Ⅰ．转基因克隆猪已在我国培育成功。研究组首先从猪胚胎皮肤细胞中分离出纤维细胞，进行体外培养。通过电穿孔的方法将构建好的基因表达载体转入纤维细胞，经筛选后将转基因纤维细胞进行体细胞克隆，再将重组胚胎移入代孕母猪子宫内，最终获得转基因克隆猪。请回答：

              （1） 在对猪纤维细胞进行培养时，需要在细胞培养液中添加一定量的           ，以防止培养过程的污染。此外，应定期更换培养液，防止              对细胞自身造成危害。

              （2） 筛选转基因细胞时，需要用到基因表达载体中的                。

              （3） 在进行体细胞克隆前，先要从屠宰场收集猪卵巢，采集             ，并在体外培养成熟。然后将转基因纤维细胞核注入           中，再经过一系列过程获得含有目的基因的重组胚胎。

              （4） 为了提高重组胚胎的利用率，可对处于           阶段的胚胎进行均等分割，再将重组胚胎移入代孕母猪子宫中继续发育成转基因克隆猪。一般地，代孕母猪需要用激素处理，促使其           以利于受孕。

              Ⅱ．土壤中有些细菌含有脲酶，可通过降解尿素作为其生长的氮源。现对土壤中的这类细菌进行分离实验，请回答：

              （1） 分离培养细菌时必须进行无菌操作，包括培养基和各种器皿都必须是无菌的，常用的灭菌方法有              （至少答2种）。

              （2） 可用                法分离纯化得到能降解尿素的菌种。在接种活菌的过程中，要在          旁进行操作，接种后的培养皿            于37℃的            中培养。

              （3） 用含有酚红指示剂的培养基筛选能分泌脲酶的细菌，若培养基中存在分解尿素的细菌，其菌落周围会出现红色环带，这是由于尿素被分解产生的            使PH升高，使酚红指示剂产生颜色变化，从而证明这一菌株以尿素为氮源。变色区域越大，表明该菌株利用尿素的能力                 。

              难度：中等
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