I.如表所示配方的培养基可筛选某种细菌，该细菌可以在该培养基上生长，进而形成菌落．回答下列问题：

（3）如果需要对该细菌进行计数，则应用______法接种．为了确定该细菌确实属于所要分离的细菌，需要在培养基中加入______指示剂。另一种接种细菌的常用方法是____________。该方法在操作时，每一次划线前都要进行灼烧，目的是________________________。

（1）转基因技术的核心步骤是______。为获得较多的目的基因可采用______技术进行扩增，该技术的原理是_______________。

（2）将植物体细胞用纤维素酶和果胶酶处理得到______，再将目的基因导入其中，最后通过______ 技术培养可得到相应的转基因幼苗。

（3）对大多数高等植物而言，与传统的细胞核转基因相比，叶绿体转基因更稳定，其遗传方式______  （填“遵循”或“不遵循”）孟德尔遗传定律，不会随______（填“花粉”或“卵细胞”）传给后代，从而保持了母本的遗传特性。

（4）来自原核生物中有重要价值的外源基因，无需改造和修饰就可在叶绿体中高效表达，原因是 _________________。

请分析回答下列问题：(1)无菌技术主要通过消毒和灭菌来避免杂菌的污染。常用的灭菌方法有____________灭菌、干热灭菌和________灭菌。

(2)稀释涂布平板法分离纯化土壤中微生物的正确操作步骤是        (        )

①土壤取样  ②称取10 g土壤加入盛有90 mL无菌水的锥形瓶中制备土壤提取液 

③吸取0.1 mL溶液进行平板涂布  ④依次稀释至10¹、10²、10³、10⁴、10⁵ 、10⁶、10⁷稀释度

A．①②③④         B．①③②④     C．①②④③         D．①④②③

(3)利用酵母菌将葡萄汁发酵后是否有酒精产生，可以用重铬酸钾来检验，在酸性条件下，重铬酸钾与酒精反应呈______色。在发酵过程中，随着酒精度的提高，发酵液逐渐呈现深红色，原因是______________________．

(4)酵母菌适合生活在偏酸性环境，而放线菌则适合生活在偏碱性环境中，分离二者所用的培养基称为____________。

(5)在腐乳制作的过程中，起主要作用的微生物是____________。

(6)腐乳制作过程中影响其风味和品质的因素有哪些 (        )

①盐的用量  ②酒的种类和用量③发酵温度  ④发酵时间  ⑤香辛料的用量

A．①②③④⑤     B．①②③     C．①②⑤       D．③④

大肠杆菌是寄生于人和动物肠道中的细菌，是一种常用的生物学实验材料，其代谢产物能与染料伊红美蓝反应，使菌落呈黑色

（1）下表是某公司研发的一种培养大肠杆菌菌群的培养基配方。

根据用途划分，该培养基属于__________（填“选择”或“鉴别”）培养基，若要分离能分解尿素的细菌需将培养基中__________换成__________，若要鉴定是否为分解尿素的细菌还需将伊红美蓝换成________________。

（2）为检测严重污染水体中大肠杆菌数量，将水样适当稀释后，取样涂布在上述平板培养基中，应选择颜色为_____________的菌落进行计数。该方法是通过统计平板上的菌落数来推测样品中的活菌数，其原理是_________________________________________。

如表是某微生物固体培养基的配方。请回答下列问题：

    （1）根据培养基的成分分析，所培养微生物的同化作用类型是____________，表中的“？”应该是________________________。

    （2）如图所示在用稀释涂布平板法进行接种时，不能得到的是图____________。统计饮用水中大肠杆菌数目时，____________（填“需要”或“不需要”）设置对照，原因是___________________。

    （3）若要分离分解尿素的细菌需将培养基中的____________换成____________；若要鉴定分解尿素的细菌还需在培养基中添加____________指示剂。

下图表示微生物培养与利用的相关实验技术，请回答下列问题：

（1）在培养基的制备过程中，A表示      ，B表示灭菌，常用的方法是      。

（2）D是微生物接种最常用的方法之一，它包括         和         两步操作。

（3）在筛选土壤中分解尿素的细菌时，所用培养基以尿素作为       ；在统计菌落数目时，一般选择菌落数在       的平板进行计数。若要对分离的菌种作进一步的鉴定，可在选择培养基中加入       指示剂，若指示剂变       ，则可初步鉴定该种细菌能够合成       ，分解尿素。

(1)柚皮易焦糊，宜采用________法提取柚皮精油，新鲜的柚皮干燥去水并用________浸泡处理，该过程得到的糊状液体可通过________除去其中的固体杂质。

(2)培养基中的尿素可为乳酸菌A生长提供________。电泳法纯化乳酸菌素时，若分离带电荷相同的蛋白质，则其分子量越大，电泳速度________。

(3)抑菌实验时，在长满致病菌的平板上，会出现以抑菌物质为中心的透明圈。可通过测定透明圈的来比较柚皮精油和乳酸菌素的抑菌效果。

(4)柚皮油也可用萃取法来提取，原因是________。分析上图，提高萃取效果的方法是________、________。

(1)采样与培养：将采集的土样混匀后称取1g，置于经过灭菌处理的________(填“固体”或“液体”)培养基中，28℃振荡培养。

(2)接种与选择：为避免培养液中菌体浓度过高，需将培养液进行________处理。之后，将菌液涂布接种于以________为唯一碳源的固体培养基上，30℃条件下培养。为避免污染，需将培养皿呈________状态放置。此外，为排除其他因素的影响，提高实验可信度．本步骤需设计________作为空白对照。

(3)筛选与纯化：将适量的碘液滴加在平板中的菌落周围，如果菌落周围的现象是________，则说明此种菌能够________。

（每空题1分共15分）从土壤中分离分解尿素的细菌的一般过程为“采集土样→稀释→纯化分离→性能测定”，下表为分离分解尿素的细菌所用的培养基配方，据图表信息，回答有关问题：

(1)从作用上看，该培养基属于________培养基，该培养基含有培养微生物所需要的各种基本成分。其中最主要的碳源是________，氮源是________。细菌能利用该氮源是由于体内能合成________酶

(2)获得纯净培养物的关键是__________，其中培养基常用________法灭菌。

(4)鉴定某种细菌是否能够分解尿素，应该在培养基中加入__________指示剂，若该细菌能够分解尿素，则指示剂变为________色，原理是______________。

(5)为了测定微生物的数量，某同学在4个培养基上分别接种稀释倍数为10⁶的土壤样液0.1 mL，培养后菌落数分别为180、155、176、129个，则每毫升原土壤样液中上述微生物的数量为________，测定的活菌数比实际活菌数________(填“低”“高”“基本一致”)。因为__________________________________________________________________要想使所得估计值更接近实际值，除应严格操作、多次重复外，还应保证待测样品稀释的________。

(2)纯化的菌种常采用固体斜面培养基临时保藏，该方法保存的时间较________，而且菌种易________．常用的凝固剂是________．

(3)从培养基所含的成分来看，从土壤中分离出固氮菌的培养基特点是________，从土壤中分离出纤维素分解菌的培养基特点是________．

（二）人组织纤溶酶原擞活物(htPA)是一种重要的药用蛋白，可在转htPA基因母羊的羊乳中获得．流程如下：

(1)卵母细胞可以从活体________中采集，还可从已处死的雌羊卵巢中获取．对供体母羊用________处理，可以获取更多的卵(母)细胞．采集的精子需要经过________处理，才具备受精能力．

(2)欲用有限的早期胚胎获得多个转基用个体，可以利用________技术．由于代孕母羊对移入其子宫的外来胚胎________，才使早期胚胎能在代孕母羊体内存活．

(3)质粒上应有________，才能使htPA基因插入其中．在转htPA基因母羊的肌肉细胞中________(能、不能)检测到目的基因．若在其羊乳中检测到________，说明目的基因成功表达．

54.（每空2分，共16分）请分析回答下列问题： (1)无菌技术主要通过消毒和灭菌来避免杂菌的污染。常用的灭菌方法有____________灭菌、干热灭菌和________灭菌。

(2)稀释涂布平板法分离纯化土壤中微生物的正确操作步骤是        (        )

①土壤取样  ②称取10 g土壤加入盛有90 mL无菌水的锥形瓶中制备土壤提取液 

③吸取0.1 mL溶液进行平板涂布  ④依次稀释至10¹、10²、10³、10⁴、10⁵ 、10⁶、10⁷稀释度

A．①②③④         B．①③②④     C．①②④③         D．①④②③

(3)利用酵母菌将葡萄汁发酵后是否有酒精产生，可以用重铬酸钾来检验，在酸性条件下，重铬酸钾与酒精反应呈______色。在发酵过程中，随着酒精度的提高，发酵液逐渐呈现深红色，原因是______________________．

(4)酵母菌适合生活在偏酸性环境，而放线菌则适合生活在偏碱性环境中，分离二者所用的培养基称为____________。

(5)在腐乳制作的过程中，起主要作用的微生物是____________。

(6)腐乳制作过程中影响其风味和品质的因素有哪些 (        )

①盐的用量  ②酒的种类和用量③发酵温度  ④发酵时间  ⑤香辛料的用量

A．①②③④⑤     B．①②③     C．①②⑤       D．③④