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            • 1.

              植物秸秆中的纤维素可被某些微生物分解。刚果红(CR溶液)可以与纤维素形成红色复合物,但并不与纤维素降解产物纤维二糖和葡萄糖发生这种反应。用含有CR的培养基培养纤维素分解菌时,培养基上会出现以该菌的菌落为中心的透明圈 。

              为从富含纤维素的土壤中分离获得纤维素分解菌的单菌落,某同学设计了如下培养基(成分见下表):注:“+”表示有,“-”表示无。

               

              氨基酸

              无机盐

              纤维素粉

              琼脂

              CR溶液

              维生素

              培养基

              +

              +

              +

              -

              +

              +

              +

              (1) 据表判断,培养基      (“能”或“不能”)用于分离和鉴别纤维素分解菌,原因是                                 ;配制培养基的步骤应为:称量、熔化、____ 、____ 、分装、___  、倒平板。 (2) 取土壤10g,放入无菌研钵中,注入无菌水5ml,并用无菌玻璃棒搅拌均匀备用。为了观察到透明圈,应该采用的接种方法是_____________  。为了获得单个菌落,应将提前准备的菌液进行___________。
              (3) 有同学在刚果红培养基平板上,筛到了几株有透明降解圈的菌落如图。图中降解纤维素能力最强的菌株是           

                (4) 教师用筛选到的纤维素酶高产菌株J1和J4,在不同温度条件进行纤维素分解发酵,测得发酵液中酶活性的结果见下图,推测菌株        更适合夏季分解植物桔杆,理由是             

            • 2.

              [生物—选修1:生物技术实践]

                 为研究酸奶中的乳酸杆菌数是否达标,某同学做了如图所示的实验。请回答下列问题:

              (1)为避免样本中菌体浓度过高,需要对样本用无菌水进行________处理。

              (2)培养乳酸杆菌的固体培养基中,除了含有________、水和无机盐等主要营养成分外,还应加入适量的________和琼脂,在灭菌前,还需调节培养基的________。接种后,培养基置于(填“25~28℃”或“30~37℃”)恒温箱中培养。

              (3)如图,测定菌落数时,该同学涂布了5个平板,培养后的菌落数分别是20、110、116、134和120,可算出每毫升样品中的菌落数是________个。

              (4)用这种方法测定的乳酸杆菌菌落数比实际活菌数量________,因为________。

            • 3. 尿素是一种重要的农业氮肥,不能直接被农作物吸收,只有当土壤中的微生物将尿素分解后才能被植物吸收利用。因此,对土壤中分解尿素的微生物进行分离和鉴定具有重要意义。

              回答下列问题:

              (1)对土壤中分解尿素的微生物的分离过程如下:

              第一步:土壤取样。取土样用的工具和盛土样的信封等在使用前都需要________(填“消毒”或“灭菌”)。

              第二步:样品稀释。通常分离不同种类的微生物要采用不同的稀释度,原因是________。

              第三步:微生物的培养与观察。将一定稀释度的样品接种在以尿素为唯一氮源的培养基上,并在适宜的条件下培养。分解尿素的微生物能在该培养基上生长繁殖,而________则不能生长繁殖。(注:实验中所用的培养基经检测符合要求,且均在无菌条件下操作)

              (2)若对土壤悬液进行梯度稀释时,未经振荡而直接取上层悬液进行梯度稀释,用稀释倍数为104的样液涂布到平板上进行培养和计数,统计出的菌落数往往比正确操作统计出的菌落数________。

              (3)对土壤中分解尿素的微生物作进一步的鉴定

              若要对上述初步筛选出的分解尿素的微生物作进一步的鉴定,需在上表培养基配方中添加的物质是________、________。若分离得到的是尿素分解菌,则培养基中pH升高使酚红指示剂变为红色,pH升高的原因是________。

              (4)分解尿素的微生物在生态系统中的作用是________。


              35 近年来,由于食品安全、环境污染等问题的加重,胃癌的发病率不断增加。常见的切除、化疗、放疗等治疗手段对病人的身体副作用较大,而“生物导弹”(借助单克隆抗体的导向作用,能将药物定向带到癌细胞所在位置)的定向治疗为胃癌患者带来了福音。下图是“生物导弹”——抗人体胃癌的单克隆抗体的制各过程。

              回答下列问题:

              (1)幽门螺旋杆菌的感染与胃癌的发生密切相关,幽门螺旋杆菌从细胞结构上与人体细胞相比,最显著的特点是________。

              (2)从免疫学的角度分析,图中实验小鼠注射的甲是________,从小鼠的________(免疫器官)中可获得相应的B淋巴细胞。

              (3)诱导细胞融合形成细胞乙的原理是________。若只考虑细胞的两两融合,理论上乙有________种类型,符合要求细胞的特点是________。

              (4)丙需进行克隆化培养和专一抗体检测,经多次筛选后可获得数量较多的能分泌所需抗体的丁,细胞丁可在体外条件下大规模培养,也可以注射到小鼠________内进行体内培养,从而获得大量的单克隆抗体。该抗胃癌单克隆抗体与从动物血清中分离的抗体相比,最主要的优点是________。

            • 4. 【生物——选修1:生物技术实践】

              乳酸杆菌常用于生产酸奶,牛奶的质量和乳酸杆菌的种类都会影响酸奶的品质,请回答下列问题:

              (1)含有抗生素的牛奶不能发酵成酸奶的原因是________.

              (2)在分离纯化优良菌种时制作的培养基中一般含有水、无机盐和________等营养物质,在此基础上,还需要满足乳酸杆菌生长对________以及氧气的要求.制作好的培养基需要进行灭菌,灭菌是指用强烈的理化因子杀死物体内外的微生物包括________.在接种前需要检测该同体培养基是否被污染,具体检测方法是________

              (3)测定培养液中乳酸杆菌数量时可选用________法和活菌计数法进行计数;若采用活菌计数法计数,则要对样品进行________操作,为保证结果准确,一般选择菌落数在________的平板进行计数.

            • 5. 【生物---选修1:生物技术实践】(15分)

              为了调查某城市自来水的水质状况,某研究小组测定了自来水水样中的细菌含量,并进行了细菌分离等工作。回答下列问题:

              (1) 该小组想检测水样中的活细菌含量。一般运用                培养基进行微生物的培养,在制备培养基从物理性质上属于       培养基;该培养基的制备过程是            

                          。如果你想在涂布接种某种微生物前,随机取了若干灭菌后的空白固体培养基,在适宜的条件下培养了一段时间,若空白培养基出现了菌落。请分析出现菌落的原因(写出二个)①                           , ②                         

              (2) 培养基灭菌后,将1mL水样稀释1000倍,在3个平板上用涂布法分别接入0.1mL稀释液;经适当培养后,3个平板上的菌落数分别为51、50和49。据此可得出每升水样中的活菌数为            。

              (3) 该小组采用平板划线法分离水样中的细菌。操作时,每次划线之前都要灼烧接种环,目的是                              的菌种,使下次划线的菌种直接来源于          

            • 6. [生物——选修1:生物技术实践](15分)请考生从给出的3道物理题、3道化学题、2道生物题中每科任选一题作答

                  某同学要分离土壤中能分解尿素的细菌,并统计每克土壤样品中活菌数目,培养基配方如下。将各种物质溶解后,用蒸馏水定容到1000mL,再经高温灭菌,制成固体培养基备用。

              (1)根据培养基的成分判断,该同学能否分离出土壤中分解尿素的细菌?_______(填“能”或“不能”),原因是___________________________。

                 (2)培养基用_________方法灭菌,培养皿用____________方法灭菌,待培养基冷却到________℃(填“20”、“30”、“40”或“50”)左右时,在________附近倒平板,等平板冷却凝固后,将平板倒过来放置,可以防止__________,以免造成污染。

                 (3)要统计每克土壤样品中活菌数目,宜采用__________法接种,根据土壤样品的稀释倍数和接种稀释液的体积,统计平板上的___________就能大约推测出样品中活菌数。

                 (4)培养分解尿素的细菌时,在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固体培养基应采用的检测方法是_______________。

                 (5)实验中使用过的培养基及其培养物必须经过_________处理后才能丢弃,以防止微生物的扩散。

            • 7. 45、下面是探究如何从土壤中分离自生固氮菌与计数的实验,完成下列问题:(8分)

              实验原理:农田的表层土壤中,自生固氮菌的含量比较多。将用表土制成的稀泥浆,接种到某特定的选择培养基上进行培养。在这种情况下,只有自生固氮菌才能生长繁殖。用这种方法,可以将自生固氮菌与其他细菌分离开来。

              材料用具:农田的表层土壤、某特定选择的培养基、牛肉膏蛋白胨培养基,盛9 mL无菌水的试管、无菌吸管、无菌涂布器、无菌培养皿,盛90 mL无菌水的锥形瓶、恒温箱。


              (1)方法步骤:
              ①倒平板
                   分别将        培养基(填写题中特定选择培养基的具体名称)、牛肉膏蛋白胨培养基倒平板,应在酒精灯火焰旁操作。
              ②制备土壤稀释液
                  取土样 10 g加入盛有90 mL无菌水的锥形瓶中,充分摇匀。用无菌吸管吸取上清液1 mL,转至9 mL的无菌水的大试管中,依次稀释到107稀释度。
              ③涂布
                  按照由107~103稀释度的顺序分别吸取0.1 mL进行平板涂布,每个稀释度下,特定的选择培养基上应至少涂布        个平板,牛肉膏蛋白胨培养基涂布        个。
              ④培养
                  放入恒温箱内,在28~30 ℃下培养3~4天。
              ⑤细菌的计数
                  当菌落数目稳定时,选取菌落数在        的平板进行计数。如果测试的平均值为50,则每克样品中的菌落数是           。(稀释度是105)

              (2)预期结果:
              相同稀释度下,牛肉膏蛋白胨平板上的菌落数        (填“多于”或“少于”)特定选择培养基上的数目。并说明原因。                                         (2分)

            • 8.

              多氯联苯是一种有机致癌物质,容易累积在脂肪组织,造成脑部、皮肤及内脏的疾病并影响神经、生殖及免疫系统。多氯联苯为油状液体,污染土壤后,土壤呈现油状板结,很难清除。研究发现部分酵母菌具有分解多氯联苯的作用,为消除这种污染,科研人员计划从受污染的土壤中筛选出高效分解多氯联苯的菌株。

              (1)筛选分解多氯联苯的菌株时,应将土壤样品稀释,接种到以             为唯一碳源的培养基上,从功能上讲,该培养基属于              

              (2)对初步提取到的菌株要进行      ,一般操作方法有两种,下图是利用                    法进行微生物接种,把聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。培养一段时间后,如果出现菌落且菌落周围           消失或减少,说明该菌落中的菌株具有降解多氯联苯的能力。


              (3)若要测定培养液酵母菌的菌体数,可在显微镜下用                 直接计数。若用稀释涂布平板法统计菌落数,在涂布接种前,随机取若干灭菌后的空白平板进行培养一段时间,这样做的目的是                                          

              (4)将1ml酵母菌溶液稀释100倍,在3个平板上用涂布法分别接入0.1ml稀释液经适当培养后,3个平板上的菌落数分别为42、43、44,据此可得出每升溶液中酵母菌活菌数为             

            • 9.

              [生物——选修1:生物技术实践]

              请回答下列与微生物有关的问题:

              (1)土壤中具有分解尿素的细菌,此类细菌能产生脲酶,该酶能将尿素分解成________。

              (2)为从富含尿素的土壤中分离获得尿素分解菌的单菌落某同学设计了甲、乙两种培养基(成分见下表):

               

              KH2PO4

              NaHPO4

              MgSO4·7H2O

              葡萄糖

              琼脂

              尿素

              注:“+”表示有,“-”表示无。

              培养基甲________(填“能”或“不能”)用于分离和鉴别尿素分解菌,原因是________;培养基乙________(填“能”或“不能”)用于分离和鉴别尿素分解菌,原因是___________________________。

              (3)如分别取0.1mL已稀释102倍的水样分别涂布到四个琼脂同体培养基的表面进行培养,培养基记录到产生脲酶的细菌的菌落数分别为161、155、158、370,则每升原水样中该细菌数为________。

              (4)纯化细菌时使用的培养基一般用________法灭菌,________(填“可”或“不可”)用加入抗牛素的方法防止杂菌感染。

              (5)某小组采用平扳划线法分离某样本的该细菌。在第二次及以后的划线时,总是从上一次划线的末端开始划线。这样做的目的是______________________________________________________。

              (6)尿素分解苗在20℃长期保存时,菌液中常需要加入一定量的________(填“石蜡”“蒸馏水”或“甘油”)。


              [生物——选修3:现代生物科技专题]

              回答下列与生物工程有关的内容

              (1)基因工程技术中,________是将目的基因导入植物细胞最常用的方法,其中的Ti质粒上的T-DNA是指________。获得该基因后,将该基因在反应体系中扩增时需要舔加的有机物质有________。

              (2)试管婴儿技术是指采用人工方法将卵子与精子从人体内取出并在体外受精,发育成胚胎后,再移植回母体子宫内,以达到受孕目的的一种技术。顺利受精必须满足两个条件来自父方的精子要进行________;来自母方的卵母细胞要________。

              ________(填生物技术)是培育试管婴儿最后一道工序。一般来说,该技术操作比较合适的时期是________。

              (3)与传统方法生成的抗体相比,单克隆抗体最主要的优点是特异性强、灵敏度高、________。在癌症治疗时,把抗癌细胞的单克隆抗体跟________相结合,制成的“生物导弹”,借助单克隆抗体的________作用,将药物带到癌细胞位置,将其在原味杀死。

              (4)桑基鱼塘生态系统能充分利用废弃物中的能量,形成无废弃物农业,这主要遵循了生态工程的________原理。同时,通过饲养家禽、家畜,栽培食用菌,提高农民经济收入使保护环境和发展经济相互协调,这又体现了生态工程的________原理。我国西北一些地区年降雨量少,适官种植灌小和草,却被硬性规定种植属于乔木的杨树,致使许多地方的杨树长成半死不活状,结果防护林成为残败的“灰色长城”。其失败的原困主要是违背了________原理。

            • 10. 【生物——选修1:生物技术实践】

              下表是某公司研发的一种培养大肠杆菌菌群的培养基配方,请根据表格回答。

              成分

              蛋白胨

              乳糖

              蔗糖

              K2HPO4

              指示剂

              琼脂

              含量(g)

              10.0

              5.0

              5.0

              2.0

              0.2

              12.0

              将上述物质溶解后,用蒸馏水定容到1000mL

              (1)从生态系统的成分上看,大肠杆菌属于_________。

              (2)若根据用途划分,该培养基属于__________(填“选择”或“鉴别”)培养基。若要用上述培养基来筛选出土壤中的尿素分解菌,培养基的营养成分必需怎样更改?

              _________________,并用__________作为指示剂。

              (3)在微生物培养的过程中,为防止杂菌污染,需要对培养基和培养皿进行______;操作者的双手需要进行清洗和_______________。

              (4)

              图1和图2是培养某细菌的结果图,其对应的接种方法分别是:____________和____________,这两种方法接种后培养基上都可以得到由单个细胞繁殖所形成的________。图1所用的接种方法可用来对活菌进行计数。此外,测定微生物数目的另一种方法是_____________。

              (5)以下微生物发酵生产特定产物时,所利用的主要微生物的细胞结构与大肠杆菌较相似的有__________。

              A.制作果酒             B.由果酒制作果醋         C.制作泡菜              D.制作腐乳

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