在农业生产研究上，常常需要进行微生物的培养和计数。

(1) 下图是利用____________法进行微生物接种，把聚集的菌种逐步分散到培养基的表面。

 (2) 分析下面培养基的配方：NaNO₃、KH₂PO₄、NaH₂PO₄、MgSO₄•7H₂O、KCl、H₂O。若此培养基用于培养分解尿素的细菌，则应除去上述_______成分，并加入______物质，以补充______源。若用于培养纤维素分解菌，应加入________物质，为检测纤维素分解菌的存在与否，还应加入_______染料，含纤维素分解菌将形成__________圈。

高温淀粉酶在大规模工业生产中有很大的实用性。研究者从热泉中筛选了高效产生高温淀粉酶的嗜热菌，其筛选过程如下图所示，请据图回答有关问题：

（1）过程①②合称为______________________。从功能上看，Ⅰ号培养基属于____________；该培养基中必须以_______作为唯一碳源。 Ⅱ号培养基的接种方法为___________________。

（2）对配制的培养基采用的灭菌方法是__________________________________。

（3）在1号培养基上挑出能产生淀粉酶的嗜热菌菌落的鉴别方法是培养基上会出现以该菌的菌落为中心的______________；也可将得到的菌悬液转接于同时含有葡萄糖和淀粉作碳源的固体培养基上培养，得到若干菌落后用碘液作显色处理，看到如下图所示情况，可判断图中周围___

_________的菌落含有所需菌种。

（4）如果高温淀粉酶的产业化需要其活性在固定化处理时不受损失，且在多次重复使用后仍能维持稳定的酶活性，则应选择下图中的______（填写字母）固定化工艺。

I.如表所示配方的培养基可筛选某种细菌，该细菌可以在该培养基上生长，进而形成菌落．回答下列问题：

（3）如果需要对该细菌进行计数，则应用______法接种．为了确定该细菌确实属于所要分离的细菌，需要在培养基中加入______指示剂。另一种接种细菌的常用方法是____________。该方法在操作时，每一次划线前都要进行灼烧，目的是________________________。

（1）转基因技术的核心步骤是______。为获得较多的目的基因可采用______技术进行扩增，该技术的原理是_______________。

（2）将植物体细胞用纤维素酶和果胶酶处理得到______，再将目的基因导入其中，最后通过______ 技术培养可得到相应的转基因幼苗。

（3）对大多数高等植物而言，与传统的细胞核转基因相比，叶绿体转基因更稳定，其遗传方式______  （填“遵循”或“不遵循”）孟德尔遗传定律，不会随______（填“花粉”或“卵细胞”）传给后代，从而保持了母本的遗传特性。

（4）来自原核生物中有重要价值的外源基因，无需改造和修饰就可在叶绿体中高效表达，原因是 _________________。

回答下列（一）、（二）小题

（一）如图是“分离以尿素为氮源的微生物”实验的基本流程，请回答下列问题：

（1）该实验培养基应该含有_____．

A．尿素       B．氯化钠        C．葡萄糖         D．琼脂

（2）稀释过程中需要用到的仪器是________，尿素溶液可用_______使之无菌．若要检查B过程灭菌是否彻底，可以采用的方法是_________．

（3）图中步骤C为_____．相对于划线分离法，过程D涂布分离法的优点是_________．

（4）如果菌落周围出现_____色环带，说明该菌落能分泌脲酶．

（二）如图是某实验室做的通过动物纤维母细胞等获得单抗的实验研究．据图回答相关问题．

（1）X、Y、Z细胞的名称分别是__________、__________、__________．

（2）与纤维母细胞相比，诱导干细胞的全能性较_____．②过程的实质是____________．

（3）③过程中需用到的生物诱导剂是________．

（4）④处需要筛选，其目的是______________________________________．

（1）果酒的制作利用了_____（填微生物名称），其代谢类型为____________。果醋制作时温度应控制在_____。

（2）乙瓶为发酵瓶，你认为甲、丙两个装置瓶中，盛有果醋的是装置瓶_____，原因是_______________________。

（3）可以用_____来检验生产出的果醋中是否含有酒精．在_____条件下，该物质与酒精反应使溶液呈_____色。

Ⅱ.尿素是一种重要的农业肥料，经微生物分解后能更好的被植物利用．某生物兴趣小组试图探究土壤中微生物对尿素是否有分解作用，设计实验并成功筛选到能高效分解尿素的细菌（目的菌）．培养基成分如下表所示．

回答下列问题：

（1）该培养基能筛选出目的菌的原因是_____。

（2）图中将细菌转到固体培养基上接种时，可采用的方法是_____。初步筛选出来的菌种还需要进一步的鉴定：在培养基中加入_____指示剂，接种并培养初步筛选的菌种，若指示剂变成_____色，则可说明该菌种能够分解尿素。

（3）在实验中，下列材料或用具需要灭菌的是_____（填序号）。

①培养细菌的培养基与培养皿

②玻棒、试管、锥形瓶和吸管

③实验操作者的双手

（4）在进行分离分解尿素的细菌实验时，A同学从培养基上筛选出大约50个菌落，而其他同学只选择出大约20个菌落．A同学的实验结果产生的原因可能有_____（填序号）。

①所取土样不同 ②培养基被污染 ③接种操作错误 ④没有设置对照实验

（5）实验结束后，使用过的培养基应该进行_____处理后，才能倒掉。

请分析回答下列问题：(1)无菌技术主要通过消毒和灭菌来避免杂菌的污染。常用的灭菌方法有____________灭菌、干热灭菌和________灭菌。

(2)稀释涂布平板法分离纯化土壤中微生物的正确操作步骤是        (        )

①土壤取样  ②称取10 g土壤加入盛有90 mL无菌水的锥形瓶中制备土壤提取液 

③吸取0.1 mL溶液进行平板涂布  ④依次稀释至10¹、10²、10³、10⁴、10⁵ 、10⁶、10⁷稀释度

A．①②③④         B．①③②④     C．①②④③         D．①④②③

(3)利用酵母菌将葡萄汁发酵后是否有酒精产生，可以用重铬酸钾来检验，在酸性条件下，重铬酸钾与酒精反应呈______色。在发酵过程中，随着酒精度的提高，发酵液逐渐呈现深红色，原因是______________________．

(4)酵母菌适合生活在偏酸性环境，而放线菌则适合生活在偏碱性环境中，分离二者所用的培养基称为____________。

(5)在腐乳制作的过程中，起主要作用的微生物是____________。

(6)腐乳制作过程中影响其风味和品质的因素有哪些 (        )

①盐的用量  ②酒的种类和用量③发酵温度  ④发酵时间  ⑤香辛料的用量

A．①②③④⑤     B．①②③     C．①②⑤       D．③④

下图表示微生物培养与利用的相关实验技术，回答下列问题：

 (1)在培养基的制备过程中，A表示____________，B表示灭菌，对培养基灭菌常用的方法是_________。

（2）D是微生物接种最常用的方法之一，它包括___________和_____________两步操作。

（3）在筛选土壤中分解尿素的细菌时，所用培养基以尿素作为_______________；在统计菌落数目时，一般选择菌落数在 ___________________的平板进行计数。若要对分离的菌种作进一步的鉴定，可在选择培养基中加入___________________指示剂，若指示剂变__________，则可初步鉴定该种细菌能够合成___________，分解尿素。

土壤是“微生物的天然培养基”，下面是有关土壤中分解尿素的细菌分离和计数的实验过程，请根据下图回答相关问题：

(1)能分解尿素的细菌代谢类型为_____________，取样时一般_____（能/不能）从土壤表层取土样。
(2)为分离出土壤中分解尿素的细菌，应该用__________________________________的____体培养基进行分离，并加入________指示剂进行鉴别。为了提高实验结果的可信度，还需设置对照组。若要判断选择培养基是否起到了选择作用，对照组的设置是__________________________________；若要判断选择培养基是否被杂菌污染，对照组的设置是__________________________________。

(3)若取土样5g，应加入___ml的无菌水配制成稀释10倍土壤溶液。因土壤中细菌密度很大，需要不断加以稀释，配制成如图所示的不同浓度的土壤溶液。随后将10³-10⁷倍的稀释液分别吸取0.1mL加入到固体培养基上，用________将菌液铺开。这种接种方法称为_____________。
(4)将接种的培养皿放置在37℃恒温培养箱中培养24h～48h，观察并统计呈_____色的菌落数，结果如下表，其中________倍的稀释比较合适。

在生产研究上，常常需要进行微生物的培养和计数。回答下列与微生物的培养与利用有关的问题

（1）下图是利用______________法将微生物接种到固体培养基上，把混合的菌种逐步稀释分散获得______________菌落。接种后培养基应______________放在37℃恒温培养箱中进行培养。

分析下面培养基的配方：NaNO3、KH2PO4、NaH2PO4、MgSO4•7H2O、KCl、H2O。若此培养基用于筛选尿素分解菌，则应除去上述培养基成分中的________，并加入______________和________物质，以补充其生活所需的碳源和氮源。培养基中加入酚红作指示剂的原因是尿素分解菌能合成________将尿素分解为氨，使培养基pH发生改变，酚红由黄变红，使菌落周围呈现红色。

（3）三位同学用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中细菌数量。在对应稀释倍数为10⁶的培养基中，取0.2ml稀释液涂布，得到以下统计结果：

甲同学涂布了1个平板，统计的菌落数是260；

乙同学涂布了三个平板，统计的菌落数是210、240和246，取平均值232；

丙同学涂布了三个平板，统计的菌落数是21、212和256，取平均值163；

在三位同学的统计中，____________同学的统计结果是相对准确可信的。按照该同学的结果，每毫升原液中的菌体数是______________。用这种方法测得的菌体数比实际活菌数量______________。

③统计原生质体数量，结果如下。

分析回答：

（1）步骤②中，加酶液的目的是_______________________，洗涤时选用渗透压稳定剂的理由是______________________________________。

（2）结果表明，制备红豆杉内生真菌原生质体的适宜条件是__________、________、_______。

（3）检验原生质体再生能力，需要配制再生固体培养基，培养基灭菌常采用___________ 法，灭菌后需要冷却到_______℃左右才能用来倒平板。

（4）实验中将收集到的原生质体浓度为30×10⁶个/mL培养液先稀释10⁴倍，再各取0.1mL稀释液分别均匀涂布在3个再生固体培养基上培养。一段时间后，统计得到的菌落数分别为：27、21、24。则原生质体再生率（能再生的原生质体数占全体部原生质体的比例）约为________________。