某同学要分离土壤中能分解尿素的细菌，并统计每克土壤样品中活菌数目，培养基配方如下。将各种物质溶解后，用蒸馏水定容到1 000 mL，再经高温灭菌，制成固体培养基备用。

(1)根据培养基的成分判断，该同学能否分离出土壤中分解尿素的细菌？________(填“能”或“不能”)，原因是__________________。

(2)分装培养基的培养皿常用___________方法灭菌，待培养基冷却到________℃(填“20”、“30”、“40”或“50”)左右时，在____________附近倒平板，等平板冷却凝固后，将平板倒过来放置，可以防止____________________________________________，以免造成污染。

(3)要统计每克土壤样品中活菌数目，宜采用_______________法接种，根据土壤样品的稀释倍数和接种稀释液的体积，统计平板上的____________就能大约推测出样品中活菌数。

(4)培养分解尿素的细菌时，在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固体培养基应采用的检测方法是_________________。

(5)实验中使用过的培养基及其培养物必须经过________处理后才能丢弃，以防止微生物的扩散。

下表所示配方的培养基可筛选某种细菌，该细菌可以在该培养基上生长，进而形成菌落。回答下列问题：

（1）该培养基可筛选的细菌是_________________，判断的依据是_________________________________________。

（2）如果从土壤中获取的样本含该细菌的数量较少，需要对样本中的细菌进行扩大培养，请判断能否用表格中的培养基来扩大培养___________（填“能”或“不能”），理由是____________________________________________________________。

（3）如果需要对该细菌进行计数，则应用_________________法接种。为了确定该细菌确实属于所要分离的细菌，需要在培养基中加入_________指示剂。另一种接种细菌的常用方法是_______________________。

人和哺乳动物的尿中含有尿素，大量尿素的存在会对环境造成污染．土壤中有些细菌含有脲酶，可通过降解尿素作为其生长的氮源。现对土壤中的这类细菌进行分离实验，请回答下列问题：

（1）分离培养细菌时必须进行无菌操作，包括培养基和各种器皿都必须是无菌的，常用的灭菌方法有 ____________、_____________ 和灼烧灭菌。

（2）将样液进行一系列的梯度稀释，然后接种培养．在稀释土壤溶液的过程中每一步都要在__________附近进行操作．接种后的培养皿倒置于37℃的恒温培养箱中培养。

（3）用含有酚红指示剂的培养基筛选能分泌脲酶的细菌，从功能上划分该培养基属于_______培养基．若培养基中存在有分解尿素的细菌，其菌落周围会出现红色环带，这是由于尿素被分解产生的______使pH升高，酚红指示剂产生的颜色变化，从而证明这一菌株可以尿素为氮源．变色区域越大，表明该菌株利用尿素的能力_______。

（4）实验室筛选微生物通常须人为提供有利于目的菌生长的________、________、pH等条件，抑制或阻止其他微生物的生长，能达到此目的的培养基称为________。

（5）分解秸秆中纤维素的微生物能分泌纤维素酶，该酶是由3种组分组成的复合酶．其中的葡萄糖苷酶可将__________分解成____________。

（6）在含纤维素的培养基中加入刚果红（CR）时，CR可与纤维素形成___________色复合物．用含有CR的该种培养基培养纤维素分解菌时，培养基上会出现以该菌的菌落为中心的___________。

幽门螺杆菌感染是急慢性胃炎和消化性溃疡的主要致病因素。在患者体内采集样本并制成菌液后，进行分离培养。实验基本步骤如下，请回答：

（1）幽门螺杆菌能够以尿素为唯一氮源，是因为能够合成______________________，培养基中加入酚红指示剂，若有幽门螺杆菌，则菌落周围会出现___________环带。

（2）上述培养过程中，能够“浓缩”幽门螺杆菌的步骤是_____________________。

（3）采用稀释涂布平板法，通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌，其原因是_____________________________________________。

（4）上述实验统计结果往往比原患者样品中含有的幽门螺杆菌活菌数_______________（偏大、偏小、相同）。

螺杆菌(Hp)感染是急慢性胃炎和消化性溃疡的主要致病因素。在患者体内采集样本并制成菌液后，进行分离培养。实验基本步骤如下：

→→→→

请回答：

(1)在配制培养基时，要加入尿素和酚红指示剂，这是因为Hp含有脲酶，它能以尿素作为氮源；若有Hp，则菌落周围会出现________色环带。

(2)步骤X表示________。在无菌条件下操作时，先将菌液稀释，然后将菌液涂布到培养基平面上。菌液稀释的目的是为了获得________菌落。

(3)在培养时，需将培养皿倒置并放在__________________中。若不倒置培养，将导致无法形成单菌落。

(4)临床上用¹⁴C呼气试验检测人体是否感染Hp，其基本原理是Hp能将¹⁴C标记的____________分解为NH₃和¹⁴CO₂。

回答下列(一)、(二)小题。

(一)请回答下列有关微生物培养、发酵过程中的相关问题。

(1)在“分离以尿素为氮源的微生物”的实验中，配制好的尿素固体培养基加上封口膜后用高压蒸汽灭菌方法灭菌，冷却后加入用_________漏斗过滤的尿素溶液。漏斗用后需用适宜浓度的___浸泡，再用蒸馏水冲洗，干燥后保存。 

(2)在“果汁中的果胶和果胶酶”实验中，可以用___(A.50%乙醇　B.70%乙醇　C.90%乙醇　D.95%乙醇)鉴别果胶。果胶酶可以从黑曲霉或______中提取，配制这些微生物的培养基时需要将pH调至____。

(3)果酒制作果醋过程中，通入空气需要经过_____过滤。果醋发酵结束的标志是pH_____。 

(二)下图表示动物细胞克隆和制备单克隆抗体的相关过程，请回答相关问题：

(1)过程①常应用____方法导入重组诱导基因后得到干细胞；部分干细胞经过诱导可分化成全身的不同组织或器官，说明这些细胞具有____性。在动物细胞培养过程中培养液中必须通入O₂和CO₂，通入CO₂的目的是__________。

(2)该过程中甲和乙细胞可经过生物诱导剂______的作用形成丙细胞。取一个丙细胞，放在含大量失去____的小鼠成纤维细胞的特定培养体系中培养，最后产生大量的细胞群，这种方法为____法。 

(3)下列关于经③和④过程得到单克隆抗体的叙述，错误的是_____。

A.该过程应用了细胞膜具有流动性的原理    B.该过程应用了动物细胞融合和动物细胞培养技术

C.丙细胞要具有分泌多种抗体的能力   D.丙细胞的形成先通过筛选得到杂交瘤细胞，再进行抗体检验

某生物兴趣小组通过测定土壤中的微生物的种类、含量等来了解其土质情况，并做了相关微生物的分离工作。回答相关问题。

⑴获得纯净培养物的关键是___________________________，这是研究和应用微生物的前提。

⑵从土壤中分离纤维素分解菌时，常从公园里、街道旁、花盆中的土壤或是农田、菜园土选取土壤时，原因是___________________________。

⑶该小组对某种菌进行扩大培养时等分为两组，A组静置培养，B组振荡培养。结果发现B组比A组的细菌要多得多，原因是_______________________________（答两点）。

⑷小组进一步发现，该土壤中只有一种真菌，欲使其从土壤中与其它细菌分离开，可在牛肉膏-蛋白胨培养液中加入___________。分离纯化后提取DNA测序发现含有产脲酶的基

因序列，请设计实验证明该种真菌可合成脲酶（简要说明实验步骤，结果，结论。相关试剂、仪器、菌种等都可提供）____________________

下表是筛选异养型细菌的培养基配方。回答下列问题：

(1)苯胺是致癌物质，土壤中有分解苯胺的异养型细菌，若要筛选此异养型细菌，则此培养基中的成分X除了为目的菌提供能源外，还能提供_________，该培养基从物理性质看属于________培养基。中学实验室中对培养基进行灭菌的常用方法是____________。接种前，用灭菌后未接种的培养基培养一段时间，观察是否形成菌落，目的是________________________________________________________________________。

(2)如图是采用纯化微生物培养的两种接种方法接种后培养的效果图，获得图A效果的接种方法是____________________。运用获得图B效果的方法接种时，操作上应注意每次划线前要灼烧________。

(3)在以尿素为唯一氮源的培养基中加______________可初步鉴定该种细菌能否分解尿素；在筛选能够分解纤维素的微生物过程中，常用到________染色法。

（1）依物理性质，该培养基属于___________培养基，依用途划分，则属于____________培养基。

（2）根据培养基原料，所培养微生物的同化作用类型是_____________

(3)该培养基中的碳源是______________  。

(4)若用该培养基选择能分解尿素的细菌，应除去的物质有______________，应加入的物质是_________

（5）使用高压蒸汽灭菌锅灭菌加盖时，拧紧固定盖子的螺栓，注意要__________________，使螺栓松紧一致不漏气。加热灭菌锅时，要先________（关闭、打开）排气阀，使水沸腾，排除锅内的冷空气。通常是在温度为121 ℃、气压为100 kPa的条件下灭菌20分钟左右．灭菌完毕后，待压力表中指针指向0点、温度降至60℃以下后，取出灭菌物品。

如图为分离微生物的流程示意图，请据图回答问题：

（1）微生物培养时，选取_________________时的记录作为结果，这样可以防止因培养时间不足而导致遗漏菌落的数目．

（2）若要对分离的细菌做进一步的鉴定，还需借助物理化学的方法：若要鉴定是否有分解尿素的细菌，可以在以尿素为唯一氮源的培养基中加入_________指示剂，若指示剂变红，说明培养基的PH____________，这样可以鉴定这种细菌可以分解尿素；若要鉴定是否有分解纤维素的细菌，在长出菌落的培养基上，覆盖_________染液，10～15min后，倒去该染液，再加入1mol/L的NaCl溶液，15min后，也倒去该溶液，若菌落的周围出现__________，说明此细菌能分解纤维素．

（3）在 10⁵ 稀释度下求出 3 个平板上菌落数的平均值为63，那么，每克样品中的菌落数为_______________．