回答下列(一)、(二)小题：

    (一)酶是生物体中生化反应的催化剂，在工业生产和食品加工中的应用日益广泛。为提高酶的利用率以及提高产品的纯度，一般需要对酶进行固定化处理：即将酶用物理或化学方法固定在______介质上，具体方法有______法、共价偶联法、包埋法和交联法等。

    如图为装有固定化酶a的实验装置，其中b是反应柱，c是催化底物。

​

    ①若装置中的固定化酶为α—淀粉酶，利用该装置进行淀粉水解实验时，在漏斗中加入反应液后的操作是______________________，以保证反应充分。对流出的液体用______检测，若呈现______色，说明淀粉被水解成糊精。

    ②若a是固定化酵母，要想得到较多的酒精，加入反应液后的操作是______________________；装置中的长导管起的作用是____________________________。

    (二)兔肝细胞中的基因E编码代谢甲醛的酶，现拟利用基因工程技术将基因E转入矮牵牛中，以提高矮牵牛对甲醛的代谢能力，请回答：

    (1)从兔肝细胞中提取mRNA，在______酶的作用下形成互补DNA，然后以此DNA为模板扩增得到基因E。在相关酶的作用下，将基因E与Ti质粒连接在一起，形成______，再导入用氯化钙处理的______，用此农杆菌侵染矮牵牛叶片。将被侵染的叶片除菌后进行培养，最终得到转基因矮牵牛。其中培养过程正确的是______(A．叶片在含适宜浓度生长素的培养基上分化形成愈伤组织  B．愈伤组织在含细胞分裂素和生长素配比较高的培养基上形成芽  C．再生的芽在细胞分裂素含量较高的培养基上生根  D．愈伤组织在含适宜浓度植物生长调节剂的培养基上脱分化形成再生植株)。

    (2)取转基因矮牵牛叶片，放入含MS液体培养基和适宜浓度甲醛且密封的试管中。将试管置于______上，进行液体悬浮培养液。一段时间后测定培养基中甲醛的含量，以判断基因E是否在转基因矮牵牛中正常表达。培养过程中液体培养基的作用：一是提供营养；二是______________________________________________，从而使叶片保持正常的形态。

回答下列(一)、(二)小题：

    (一)回答固定化酶有关问题

    (1)制备固定化α－淀粉酶的过程中，将α－淀粉酶固定在石英砂上的方法是______，一定浓度的淀粉溶液经过______后，可使淀粉水解为______，遇碘显______色，此实验最适温度为______。

    (2)关于固定化酶中的酶说法正确的是______。

    A．酶的种类多样性，可催化一系列的酶促反应

    B．酶被固定在不溶于水的载体上，可反复利用

    C．酶作为催化剂，反应前后结构不改变，所以固定化酶可永远利用下去

    D．固定化酶由于被固定在载体上，所以丧失了酶的高效性和专一性特点

    (二)下图是培育表达人乳铁蛋白的乳腺生物反应器的技术路线。图中tet^R表示四环素抗性基因，amp^R表示氨苄青霉素抗性基因，BamHⅠ、HindⅢ、SmaⅠ直线所示为三种限制酶的酶切位点。

    据图回答：

    (1)图中将人乳铁蛋白基因插入载体，需用___________限制酶同时酶切载体和人乳铁蛋白基因。筛选含有重组载体的大肠杆菌首先需要在含______的培养基上进行。

    (2)能使人乳铁蛋白基因在乳腺细胞中特异性表达的调控序列是______(填字母)。

      A．amp^R    B．启动子    C．终止子    D．复制原点

    (3)过程①可采用的操作方法是______(填字母)。

    A．农杆菌转化    B．显微注射    C．大肠杆菌转化    D．细胞融合

    (4)过程②采用的生物技术是_____________。

    (5)对早期胚胎进行切割，经过程②可获得多个新个体。这利用了细胞的______性。

    (6)为检测人乳铁蛋白是否成功表达，可采用______(填字母)技术。

    A．核酸分子杂交    B．基因序列分析    C．PCR D．抗原一抗体杂交

(4)工业上在进行图中步骤⑥酿制果醋时，为了提高果醋产量，需要得到纯化的醋酸菌菌种，在菌种纯化过程中，使用__________接种方法可以同时进行计数，获得的纯化菌种可以用______的方法进行长期保存。

图2

(1) 图1的步骤①中,溶化海藻酸钠时要__________,以防止焦糊。步骤②中加入果胶酶的作用是____________________________。 

(2) 图1的步骤③中进行增殖培养的目的是________________。步骤④体现了固定化酵母______________的优点。 

(3) 由图2可知,固定化酵母接种量为____时酒精产量最高,接种量过高,酒精产量反而有所降低的原因是___________________。 

(4) 生产实践中,可以通过___________(填方法)来逐渐提高固定化酵母对较高浓度糖液的耐受性,从而达到提高发酵效率的目的。 

               图1

(1)甲、乙两种酶用同一种蛋白酶处理，酶活性与处理时间的关系如图1所示。甲酶的化学本质最可能是________。

图2

图3

① 使用该加酶洗衣粉的最适宜温度为________。

② 在0 ℃和75 ℃时，酶的催化效率基本都为零。但当温度再度恢复到45 ℃时，后者酶的催化能力已不能恢复，这是因为________________________________。

图4

①a、b过程中，酶作用的部位依次是________。

② 若将获得的DNA片段用PCR技术进行扩增，与细胞内的DNA复制过程相比，利用PCR技术扩增DNA时所需酶的不同之处是____________。