[生物——选修1生物技术实践]

   乳酸菌是人和动物体胃肠道中的有益菌，能助消化，利于肠道健康，但是消化道中胆汁所含的胆盐会对乳酸菌的生理活动有抑制作用，为此，研究人员通过辐射处理野生型乳酸菌，得到耐高浓度胆盐的乳酸菌。

（1）与腐乳制作所用微生物相比，乳酸菌在结构上的主要特点是________。

（2）实验步骤：

①育种与培养：辐射处理后可得到多种类型的乳酸菌，置于经过________法灭菌处理的________（固体／液体）培养基中，37℃振荡培养。

②接种与选择：为避免培养液中菌体浓度过高，需将培养液进行________处理。之后，将菌液涂布接种于含0.3％胆盐和不含胆盐的固体培养基上，配置时为了使培养基凝固，应向培养基中加入________；置于37℃条件下________（密闭／充气）培养；设置不含胆盐的培养基培养的目的是________。

③筛选与纯化：从平板中提取实验效果明显的目的菌株，采用________法接种于新的培养基平板，可对菌株进一步纯化。

【生物—选修1：生物技术实践】

回答下列与微生物发酵、培养以及应用相关的问题：

(1)苹果酒清香、明快，风味清爽，它是由果汁发酵产生的。果汁发酵后是否有酒精产生，可用 

              来检验。

(2)严格控制发酵条件是保证发酵正常进行的关键，这直接关系到是否能得到质量高、产量多的理想产物，通常所指的发酵条件不包括   。

 A.温度控制          B.溶氧控制        C．pH控制       D.酶的控制

(3)苹果酒在      的作用下，经过深层发酵可形成苹果醋；在此过程中要适时向发酵液中充气，原因是                  

(4)腐乳是用豆腐发酵制成，有多种微生物参与发酵，其中起主要作用的是           。在腐乳的制作过程中，从微生物培养的角度来看，豆腐应该属于           。

(5)在充足的碳源、氮源、无机盐和水的条件下，乳酸菌仍然不能正常生长，还需要在培养基中添加               。应用平板划线法分离乳酸菌时，从第二次划线操作起，每次总是要从上一次划线的末端开始划线，并划线数次，其原因是                                             。

［生物——选修1:生物技术实践］

回答下列有关生物技术实践的问题。

（1）采用萃取法从胡萝卜中提取胡萝卜素的主要步骤为粉碎、干燥、萃取、________、________。

（2）家庭制作腐乳过程中，豆腐块上生长的毛霉来自空气中的         。密封腌制时添加卤汤，卤汤中的酒精的含量应控制在12%左右，含量过高会导致腐乳            。

（3）测定泡菜中亚硝酸盐含量的原理是，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后，与N­-1-­萘基乙二胺盐酸盐结合形成         色染料。处理过滤后的泡菜汁液时使用氢氧化铝乳液的作用是                     。

（4）统计泡菜液中乳酸菌的数量时，采用稀释涂布平板法接种于特定培养基。在稀释倍数为10⁴的培养基中测得平板上菌落数的平均值为30.4，则每毫升样品中的菌落数是      个(涂布平板时所用稀释液的体积为0.2毫升)。分离得到的乳酸菌在长期保存时，可以采用         的方法。

A[选修l：生物技术实践]

请回答下列问题：

(1)从土壤中筛选纤维素分解菌时，需要在培养基中加入的特殊染料是________。某同学在纯化土壤中的细菌时，发现培养基上的菌落连成一片，最可能的原因是___________________________________________________________。

(2)制作泡菜时，为了缩短制作时间，有人还会在冷却后的盐水中加入少量陈泡菜液，加入陈泡菜液的目的是___________。从开始制作到泡菜质量最佳这段时间内，泡菜液逐渐变酸，这段时间内泡菜坛中乳酸菌和其他杂菌的消长规律是______________。

(3)腐乳制作有多种微生物参与，其中起主要作用的是______ __。豆腐发酵主要利用了微生物产生的_____________，通过发酵，豆腐中营养物质的种类增多，且更易于消化和吸收。

(4)有人想提取橘皮精油获取利润，一般提取橘皮精油的方法是_______法，为了提高出油率，需将柑橘皮干燥去水，并用______浸泡，浸泡时间为10h以上，这样压榨时不会滑脱。

(5)某橘农发现自家有一株橘树具有抗虫性状，欲利用花药离体培养技术大量繁殖，则应选择花粉发育至_______期的花药培养成功率最高。

B[选修3：现代生物科技专题]

图示方案为人们获得生物新品种的过程，请回答下列问题：

方案I、抗冻蛋白基因烟草细胞→抗冻烟草

方案Ⅱ、A基因全免疫过的B细胞→体外培养→单克隆抗体

方案III、人的生长激素基因牛的受精卵→早期胚胎受体母牛→转基因牛

(1)基因工程的核心步骤是_________。农杆菌上转化法中，根据农杆菌的特点，如果将抗冻蛋白基因插入到_________上，通过农杆菌的转化作用，就可以使目的基因进入植物细胞，并将其插入到植物细胞中____________上。

(2)推测方案Ⅱ中A基因所起的作用是________，请写出该方案获得的细胞中遗传信息传递时所遵循的法则_____________。   

(3)方案III中的转基因牛可以通过分泌乳汁来生产人的生长激素。这需要将人的生长激素基因与________的启动子等调控组件重组在一起。该方案中的早期胚胎在移植入受体母牛子宫之前，必须对胚胎进行性别鉴定一般是取处于______时期的______细胞进行检测。

[生物——选修1：生物技术实践]

果酒、果醋、泡菜和腐乳的制作都离不开微生物的作用。请结合微生物的特点及产品的制作过程，回答下列有关问题：

（1）苹果醋的制作过程中，利用了________（填“厌氧”或“需氧”）的醋酸菌的发酵作用，该过程需要控制的温度条件是________。

（2）腐乳的制作过程中起主要作用的微生物是________；该制作过程中加盐的作用是________。

（3）制作泡菜时，泡菜坛一般要用水密封，目的是________。在________条件下，亚硝酸盐与氨基苯磺酸反应后，与N－1－萘基乙二胺盐结合形成________色，与标准液进行目测比较，可以估算出泡菜中亚硝酸盐的含量。

请回答下列有关“腐乳制作”的问题：

（1）豆腐发酵主要是利用了微生物产生的______________________________________________，通过发酵，豆腐中营养物质的种类______________（增加/减少）且更易于消化吸收。

（2）腐乳外部有一层致密的“皮”，这层皮是霉菌的_______________________。

（3）制作腐乳时，加盐的作用是________________________________________________________和_____________________________________________________________________________。

（4）卤汤是由酒及各种________________配制而成的，卤汤中的酒可以选用料酒、黄酒、米酒、高粱酒等，含量一般控制在12%左右，原因是酒精含量过低，_________________________；酒精含量过高___________________________________________________________________。

腐乳是我国古代劳动人民创造出的一种经过微生物发酵的大豆食品。下面是腐乳制作的流程示意图：

 →→→

(1)在腐乳的制作中，起主要作用的生物是________，它与乳酸菌在结构上主要的区别是_____________。

(2)腐乳含有丰富的氨基酸、甘油、脂肪酸等小分子物质，参与这些物质变化的酶是____________________。

(3)传统的制作过程中，豆腐块上生长的毛霉来自__________________。而现代的腐乳生产是在严格的无菌条件下，将优良的毛霉菌种接种在豆腐上，这样可以_______________________________。

(4)加盐的作用是________________________和__________________________。

γ-氨基丁酸（GABA）是具有降血压、抗焦虑等功能的水溶性氨基酸。科研人员通过实验研究了白方腐乳在前发酵、盐腌和后发酵过程中GABA的含量变化，为寻找生产富含GABA腐乳的工艺奠定基础。实验步骤如下：

①豆腐白坯表面接种毛霉孢子后，在适宜的温度和湿度下培养48h，获得毛坯。

②将毛坯分层整齐地摆放在瓶中，盐腌5d。

③腌制后加入卤汤，置于28℃恒温箱中后发酵90d。

请分析回答：

（1）通常含水量为          左右的豆腐适合做腐乳；毛霉生长的适宜温度为       。

（2）前发酵过程中，毛坯的GABA含量发生明显变化的原因是                       。

（3）步骤②中，加盐腌制的正确方法是                                         。

此过程腐乳干重中的GABA含量下降，一方面与食盐抑制毛霉生长，酶活性降低有关；另一方面部分GABA会                            而导致测定值减小。

（4）后发酵过程中，GABA含量再次增加的原因是                            ，后发酵     d后的白方腐乳出厂销售比较适宜。

【生物——选修1生物技术实践】

回答下列关于生物技术实践的问题：

Ⅰ、①乳酸菌 ②根瘤菌 ③蓝藻 ④醋酸菌 ⑤毛霉 ⑥酵母菌 ⑦大肠杆菌 ⑧曲霉

制作果酒、果醋、腐乳、泡菜对应的起主要作用的微生物依次是                （填相应序号）；泡菜制作的原理是（用反应式表示）：                                      。

Ⅱ、回答下列有关泡菜制作的问题

（1）制作泡菜时，煮沸盐水，其目的是             。为了缩短制作时间，有人还会在冷却后的盐水中加入少量陈泡菜液，加入陈泡菜液的目的是                                。

（2）已知泡菜中亚硝酸盐含量与泡制时间有关。为了测定不同泡制天数泡菜中亚硝酸盐的含量，某同学设计了一个实验，实验材料、试剂及用具包括：刻度移液管、比色管、不同浓度的亚硝酸钠标准溶液、亚硝酸盐的显色剂、不同泡制天数的泡菜滤液等。回答相关问题：

请完善下列实验步骤。

①标准管的制备：用             和显色剂制成颜色深浅不同的系列标准管。

②样品管的制备：用刻度移液管分别吸取一定量的       ，加到不同的比色管中，然后在各个比色管中加入等量的显色剂进行显色，得到样品管。

③将每个         分别与系列标准管进行比较，找出与样品管颜色深浅       的标准管，该管中亚硝酸钠含量即代表样品管中的亚硝酸盐含量，记录各样品管亚硝酸盐的含量。

（3）制作腐乳、果醋和泡菜时，需要通入氧气的是               ，腐乳制作中加盐腌制的目的除析出豆腐中的水分，使豆腐块变硬外，还能够

（4）菊花的组织培养所需的培养基是           （填“固体”或“液体”）状态，且菊花比较容易培养，在配制MS培养基时，             （填“必须添加”或“不必添加”）植物激素。