PCR技术是利用DNA复制的原理，将某一DNA分子片段在实验条件下，合成许多相同片段的一种方法。利用这种技术能快速而特异性的扩增任何要求的目的基因或DNA分子片段，“人类基因组计划”的研究中常用这种技术。请结合相关知识，回答有关此技术的一些问题：

（1）PCR技术能将某一DNA分子扩增成许多相同的DNA片段，原因是：①DNA分子的_______________结构为复制提供了精确的模板；②DNA复制时遵循的_______________原则，保证了复制准确无误地进行。

（2）在实验条件下，DNA分子进行扩增，除了需要扩增的DNA片段外，还需要_________、____________和_____________等条件。

（3）某一DNA分子片段含有80对碱基，其中腺嘌呤有35个，若让该DNA分子扩增三次（即复制三次）至少需要鸟嘌呤脱氧核苷酸的数目是______________个。

（4）用³²P标记的一个DNA分子的两条链，让该DNA分子在P的培养液中连续扩增三次，所得DNA分子中含³¹P的脱氧核苷酸链与含³²P脱氧核苷酸链数之比是__________。

糖原贮积病是由于遗传性糖原代谢障碍，致使糖原在组织内过多沉积而引起的疾病，临床表现为低血糖等症状。下图1为人体糖代谢的部分途径。请分析回答：

（1）据图1可知，抑制葡萄糖激酶不仅制约糖原的合成，还会制约体内细胞的__________，使产能减少。

（2）I型糖原贮积病是6-磷酸葡萄糖酶基因（E）突变所致。血糖浓度低时，正常人体分泌                 （激素）增加，使血糖浓度恢复到正常水平；给I型糖原贮积病患者注射该激素_______（填“能”或“不能”）使血糖浓度恢复到正常水平。

（3）I型糖原贮积病是一种常染色体隐性遗传病，图2为某家族此病遗传情况家系图，在正常人中，杂合子概率为1/150。若Ⅱ-3与表现型正常的男性结婚后生育一个孩子，则患病概率约为____________。

（4）某新型糖原贮积病是由于磷酸酶基因（D）突变引起。经过家系调查绘出的家系遗传图与图2一致。研究者合成了两种探针，能分别与正常基因和突变基因相应的DNA序列互补。此探针在一定的杂交和洗脱条件下，只要有一个碱基不匹配，就不能形成稳定的杂交链而被洗脱。利用探针对该新型糖原贮积病家系进行检测，过程和结果如下图所示。

①体外扩增DNA时，解链的方法是___________________________。

②结合图2和图3分析：该新型糖原贮积病的遗传方式为X染色体隐性遗传病，做出此判断依据是该家系中_______个体DNA杂交检测的结果，其中I-1个体的基因型是                      。

③假如Ⅲ-1和男性患者结婚，生育的孩子患新型糖原贮积病的概率是                    。

重叠延伸PCR技术是一种通过寡聚核苷酸链之间重叠的部分互相搭桥、互为模板，通过多次PCR扩增，从而获得目的基因的方法。利用该技术可以实现基因的定点诱变（如图）。它在需要诱变的位置合成两个带有变异基因碱基的互补引物（如图的引物b和引物c），然后分别与引物a和引物d做PCR，这样得到的两个PCR产物分别带有变异碱基，并且彼此重叠，在重叠部位经重组PCR就能得到诱变的PCR产物（如图的突变产物AD）。请回答下列问题：

（1）PCR与体内DNA复制相比，不需要                酶参与。

（2）引物中（G+C）的含量越高，引物与模板DNA结合的稳定性                   。

（3）图中获得产物AB和CD，必须将引物a、引物b和引物c、引物d置于不同反应系统中，这是因为                   。除图中所示外，在不同的反应体系中需要共同加入的物质是                 。 

（4）在引物a、引物b组成的反应系统和引物c、引物d组成的系统中均进行一次复制，共产生                 种双链DNA分子。

（5）图中获得产物AB，至少要经过                    轮循环，循环产物中含有引物a的DNA占有的比例为                         。

（1）根据家族病史，该病的遗传方式是                          ；母亲的基因型是         （用A、a表示）；若弟弟与人群中表现型正常的女性结婚，其子女患该病的概率为       （假设人群中致病基因频率为1/10，结果用分数表示）。

（2）检测发现，正常人体中的一种多肽链（由146个氨基酸组成）在患者体内为仅含45个氨基酸的异常多肽链。异常多肽链产生的根本原因是                  ，由此导致正常mRNA第         位密码子变为终止密码子。

（3）分子杂交技术可用于基因诊断，其基本过程是用标记的DNA单链探针与             进行杂交。若一种探针只能直接检测一种基因，对上述疾病进行产前基因诊断时，则需

要     种探针。若改致病基因转录的mRNA分子为“…ACUUAG…”，则基因探针序列为                  ；为制备大量探针，可利用            技术。

据图回答下列问题：

（1）过程①所需的酶是           。过程②中PEG还可以用               等物理方法替代，全部过程用到的生物技术的原理是                         。

（2）过程②后，在显微镜下观察融合的活细胞中有供体的                存在，这一特征可作为初步筛选杂种细胞的标志。原生质体经过            再生，进而分裂和脱分化形成愈伤组织。

（3）若分析再生植株的染色体变异类型，应剪取再生植株和                 植株的根尖，通过解离、漂洗、染色和制片等过程制成装片，然后在显微镜下观察比较染色体的形态和数目。

（4）采用特异性引物对花椰菜和黑芥基因组DNA进行PCR扩增，得到两亲本的差异性条带，可用于杂种植株的鉴定。下图是用该引物对双亲及再生植株1—4进行PCR扩增的结果。据图判断，再生植株1—4中一定是杂种植株的有              。