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            • 1.

              为了获得较多、较纯、较完整的甜菜总DNA,科研人员比较了A方法(通过CTAB裂解细胞,并与蛋白质形成复合物)、B方法(通过SDS裂解细胞释放核DNA,使蛋白质变性)、C方法(通过高盐沉淀蛋白质)从嫩叶、块根中提取总DNA的效果,主要实验步骤和相关检测结果如下,其中氯仿-异戊醇不溶于水且密度均大于水,DNA不溶于氯仿-异戊醇,蛋白质等溶于氯仿-异戊醇。分析回答:

              (1)步骤③将DNA粗提液在65℃水浴保温60min的目的是           。步骤④“?”表示            。步骤⑤中加RNA酶的作用是            

              (2)影响DNA纯度的物质主要有          。提取的DNA中RNA残留较多的方法是           。以嫩叶为材料提取DNA的得率较高,原因是         

              (3)电泳可以直观对比DNA的完整性,分子大小不同的DNA在凝胶上迁移速率不同,从而产生不同的条带。下图是上述实验中提取到的总DNA凝胶电泳结果,其中M是已知大小的不同DNA的混合物。实验结果显示A、B方法提取的总DNA电泳结果只有一条带,而C方法有明显的“拖尾”现象。

              ①只出现一条带的原因是                     

              ②出现“拖尾”现象的原因是                    

            • 2.

              科研人员以金定鸭、长乐灰鹅和象洞鸡的全血为实验材料,比较苯酚—氯仿抽提法(方法A)和盐析法(方法B)提取血液中DNA的效率。图中EDTA具有破坏细胞膜、抑制DNA酶的活性的作用,SDS具有破坏细胞膜和核膜、使蛋白质变性和抑制DNA酶活性的作用。提取过程和结果如下:

              提取过程:

              实验结果:

              注:纯DNA的OD值为1.8,OD值在1.75~1.85间,DNA纯度较好;OD值高于1.8,一般有RNA污染;OD值小于1.8,一般有蛋白质或其他物质污染。

              请回答:

              (1)本实验不选择哺乳动物血液为实验材料的原因是                 

              (2)步骤①中,若只用蛋白酶K消化处理,对实验结果的影响是                      

              (3)步骤③中,破碎细胞常用的方法是                      。步骤⑤加入蒸馏水的目的是                     

              (4)苯酚和氯仿-异戊醇不溶或微溶于水,密度均大于水,步骤②⑦所依据的原理是                   

              (5)对于长乐灰鹅、象洞鸡来说,较适宜的DNA提取方法分别是                               

              (6)实验结果表明,不同方法提取的DNA中,影响DNA纯度的主要物质是                。相同体积的不同鸟类的血液DNA提取量有明显差异,其原因可能是                

            • 3.

              下面是高中生物教材中有关实验操作的简图。请据图回答:

              (1)若A为苹果,则滤液C常用于检测生物组织中________实验。能否用香蕉替代苹果进行该实验__________。

              (2)若A为新鲜的菠菜叶,进行“色素的提取和分离”实验时,溶液B应该是____最终所得滤纸条上的四条色素带很淡,其原因与图示操作有关的是__________。

              (3)若A为洋葱,进行“DNA的提取与鉴定”实验时,溶液B应该是_______,在滤液C中加入__________可去除杂质中的蛋白质。

            • 4.

              下图是姜堰某中学生物兴趣小组进行的DNA粗提取实验,其中SDS(—种表面活性剂)除了能瓦解细胞膜和核膜,还能与脂质和蛋白质结合。当SDS遇到钾离子时,钾离子可以置换SDS中的钠离子,产生不溶于水的PDS沉淀。请回答下列问题:

              (1)实验中,向剪碎的猪肝中加入食盐的主要作用是____。将猪肝匀浆放入65℃水浴锅中水浴l0min以除去部分杂质的主要实验原理是________。

              (2)方法一的步骤①中加入洗涤剂的作用是_________。方法三的步骤③中,离心后应取____________。

              (3)方法一、二获得的絮状物均带黄色,从DNA在细胞中的存在形式分析,杂质分子最可能是________,可用___________试剂鉴定。

              (4)要比较三种方法获得的絮状物中DNA含量,请写出实验思路:______________________________。

              (5)哺乳动物的血细胞液不是提取DNA的理想材料,原因是___________________________。

            • 5.

              某生物兴趣小组开展DNA粗提取的相关探究活动。具体步骤如下:

              材料处理:称取新鲜的花菜、辣椒和蒜黄各2份,每份10g。剪碎后分成两组,一组置于20℃、另一组置于-20℃条件下保存24h。

              DNA粗提取:

              步骤一:将上述材料分别放入研钵中,各加入15mL研磨液(含洗涤剂和食盐),充分研磨。用两层纱布过滤,取滤液备用。

              步骤二:先向6只小烧杯中分别注入10mL滤液,再加入20mL体积分数为95%的冷酒精溶液,然后用玻璃棒缓缓地向一个方向搅拌,使絮状物缠绕在玻璃棒上。

              步骤三:取6支试管,分别加入等量的               (填溶液名称及浓度)溶液溶解上述絮状物。

              步骤四::在上述试管中各加入4mL                 试剂。混合均匀后,置于沸水中加热5min,待试管冷却后比较溶液的颜色深浅,结果如下表:

              分析上述实验过程,回答下列问题:

              (1)该探究性实验课题名称是                         

              (2)步骤一中研磨液中洗涤剂的作用是                              ,食盐的作用是                                    

              (3)步骤二中“缓缓地”搅拌,这是为了                        ,所加酒精溶液需冷却的原因之一是低温抑制              的活性,可以防止DNA降解。

              (4)上述实验中步骤三,步骤四的空缺依次分别为                                                     

              (5)实验表明,                               获取的DNA量最多。

            • 6.

              如图是“DNA粗提取与鉴定”相关实验步骤,请据图分析回答:

              (1)鸡血细胞是进行该实验较好的实验材料,这是因为_________________,从鸡血细胞中释放出核物质的处理方法是向鸡血中加入___________,并__________。如果选用植物细胞,需要选用洗涤剂的目的是______________。

              (2)图a表示释放核物质后进行过滤的过程,过滤后取______进行下一步实验。

              (3)图b表示的相关操作过程中,加入2mol/LNaCl溶液的作用是__________________,图b操作后进行过滤的目的是________________________。

              (4)图c表示在滤液中加入冷却的______________,进一步提取含杂质更少的DNA。

            • 7.

              请回答下列与生物技术实践相关的问题。

              (1)自古酒就与人类生活息息相关。在图所示两发酵瓶中装入等量的葡萄汁,其中装置__________更适用于果酒制作,果酒制作中发酵旺盛期_________产量很大,需进行定期排气。果酒发酵是否成功可用_____对发酵产物酒精进行检验确认。

              (2)在生产过程中,发现葡萄酒变酸,表面观察到菌膜,造成此现象的生物是      ;腐乳外部有一层致密的“皮”,这是     的匍匐菌丝形成的;制作泡菜时,有时坛内会长一层白膜,这是      繁殖形成的。

              (3)培养基配制和灭菌时,灭菌与调节pH的先后顺序是     ;一般对配制的培养基采用          法灭菌。

              (4)微生物培养后期进行菌落统计时,除了________计数法,还可用________法培养细菌进行间接活菌计数。

              (5)提取洋葱DNA时,要在切碎的洋葱中加入一定的      ,并进行充分地搅拌和研磨,待过滤后再收集研磨液。

              (6)对于植物有效成分的提取,适用于玫瑰油、薄荷油等化学性质稳定、难溶于水、挥发性强的芳香油的提取方法为______,在提取过程中,加入_____可吸收精油中残留的水分。

            • 8. (8分)真核生物细胞内,大量DNA和蛋白质以及一些RNA等混杂在一起,难以分离。生物兴趣小组的同学为了获得纯度相对较高的DNA展开了实验探究。请分析回答:

              (1) 分离各种物质的基本思路是根据DNA和其他物质理化性质的不同而采取一定的方法,下图是从各种物质之间的差异角度开展研究。

              ①  取鸡血细胞液(为什么?)10 mL,加蒸馏水20 mL,同时用玻璃棒快速搅拌。过滤,取,转移到塑料材质的大烧杯中。

              ②沿大烧杯内壁持续、缓慢地加入,用玻棒沿一个方向轻轻搅拌,同时不断收集析出的物质。将上述操作结果鸡血中几种物质的析出情况绘制成曲线,据图分析:

              ③如果只要收集纤维蛋白,可采取的措施是。

              ④ DNA在饱和度约为的硫酸铵溶液中溶解度最小。

              (2) 如果要进一步去掉其他杂质,尽可能提高获得的DNA纯度,可采取的办法是。若用洋葱提取DNA,需加入一定的进行充分的搅拌和研磨。

            • 9. 31、(7分)下图为“DNA的粗提取与鉴定”的实验装置,请回答问题。

              (1)实验材料选用鸡血细胞液,而不用鸡全血,主要原因是鸡血细胞液中________含量较高。

              (2)在图A所示的实验步骤中加蒸馏水20 mL的目的是________________,通过图B所示的步骤取得滤液,再在滤液中加入2 mol/L的NaCl溶液的目的是使滤液中的DNA溶于浓盐溶液中;图C所示实验步骤中加蒸馏水的目的是__________________________________。

              (3)为鉴定实验所得丝状物的主要成分是DNA(D图中的b试管),溶解后可用________试剂进行鉴定,结果丝状物被染成蓝色,但必需的条件是                 ,从而加快颜色反应速率,同时说明DNA耐________。溶液颜色的变化程度主要与________________________有关。

            • 10. (8分)回答下列有关“DNA的粗提取和鉴定”实验的问题:

              (1)下列有关“DNA的粗提取和鉴定”实验原理的叙述,正确的是(  )

              A.DNA在NaCl溶液中的溶解度,随NaCl溶液浓度的降低而减小

              B.利用DNA不溶于酒精的性质,可除去细胞中溶于酒精的物质而得到较纯的DNA

              C.DNA是大分子有机物,不溶于水而溶于所有有机溶剂

              D.在沸水中,DNA遇双缩脲试剂会出现紫色反应

              (2)由于鸡血较难找到,某学生试图用人血代替,结果没有成功,其原因最可能是(    )

              A.操作方法不对   B.人血含DNA太少   C.NaCl溶液浓度太高   D.加二苯胺太少

              (3)下图为该实验过程中的一些重要操作示意图:

              ①正确操作顺序是       

              ②上图C、D步骤都加入蒸馏水,但其目的不同,分别是             

              ③上图A步骤中所用酒精必须是经过充分遇冷才能使用,该步骤的目的是       

              (4)为鉴定A中所得到的丝状物的主要成分为DNA,可滴加      试剂,沸水浴,如果出现        则该丝状物的主要成分为DNA。

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