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          50条信息

            • 1.
              目前已成功利用基因工程技术培育出马铃薯新品种。请根据教材中知识回答下列问题:
              (1)马铃薯易患的多种疾病,可导致其产量下降。通过导入抗病基因,并使该基因表达,可以提高马铃薯产量,基因工程中使用最多的抗病基因是病毒外壳蛋白基因和 ______ 。
              (2)由于受体细胞不同以及将目的基因导入受体细胞的方法不同,因此基因表达载体的构建 ______ (填
              “完全相同”或“有所差别”)。
              (3)马铃薯是双子叶植物,常用 ______ 法将目的基因导入马铃薯体细胞中。将病毒外壳蛋白基因转入普通马铃薯植株细胞内,并成功表达的过程,在基因工程中称为 ______ 。
              (4)科学家还培育出了抗除草剂转基因马铃薯,其设计思路是,修饰除草剂作用的靶蛋白,使其对除草剂, ______ (填“敏感”或“不敏感”)或使靶蛋白过量表达植物吸收除草剂后仍能 ______ 。
              (5)将目的基因导入受体细胞后,还需对转基因植物进行目的基因的检测与鉴定,一般要进行 ______ 水平和个体水平的鉴定。
            • 2.
              阅读以下资料,回答问题:
              多酚氧化酶是引起苹果果肉褐变的主要酶类。研究人员通过转基因技术,将相关目的基因导入苹果细胞内,该目的基因转录的产物RNA能与苹果细胞内源mRNA序列特异性结合,从而减少多酚氧化酶基因的表达,延缓褐变。
              (1)构建基因表达载体需用同种的 ______ 酶对含有目的基因的DNA和运载体进行酶切;基因表达载体包含目的基因、启动子、终止子和 ______ 等;将基因表达载体导入苹果细胞,最常用的方法为 ______ 。
              (2)要将转基因苹果细胞培育成幼苗,常用的细胞工程技术是 ______ ,该技术的原理是 ______ ,使用的培养基中除了含有营养物质外,还必须含有一定比例的 ______ 等植物激素。
              (3)若在个体生物学水平上鉴定转基因苹果是否培育成功,则鉴定的实验思路是 ______ 。
            • 3.
              噬菌体抗体库技术是指将人的全部抗体基因插入噬菌体的基因组中,然后让该噬菌体感染大肠杆菌,最终使抗体以复合蛋白质的形式表达于噬菌体的表面,形成含有全套抗体谱的噬菌体抗体库,请回答下列问题:
              (1)人体内的抗体是在 ______ 中合成后,以胞吐的方式分泌到内环境中的.
              (2)若要获取人的抗体基因,可以从细胞中提取相应的RNA,通过逆转录过程获取 ______ 片段,再合成目的基因,采用PCR技术扩增目的基因的过程中,需要的物质除模板链、四种肤氧核苷酸外,还需要 ______ .
              (3)构建重组DNA分子的目的是 ______ .在噬菌体抗体库的构建过程中,是否需要利用CaCl2处理大肠杆菌以制备感受态细胞?请写出原因: ______ .
              (4)检测大肠杆菌转录出的相应RNA时应采用技术,即从原核细胞中提取RNA,以 ______ 为探针,与RNA杂交.该技术的原理是 ______ .
            • 4.
              目前普遍种植的玉米具有较强的耐旱性,若从玉米细胞中提取耐旱基因转移到苜蓿细胞中,便可提高苜蓿的耐旱性。
              (1)理论上,构建的基因组文库中含有生物的 ______ 基因。苜蓿是否获得耐旱性需经过一系列的检测与鉴定,首先应采用 ______ 技术检测苜蓿细胞的 DNA上是否插入了耐旱基因;最后还要在实验田中鉴定苜蓿植株的 ______ 。
              (2)将提取到的耐旱基因导入农杆菌,再利用 ______ 法将其导入到苜蓿的体细胞中,然后利用 ______ 技术获得苜蓿的再生植株。获得苜蓿再生植株的实验过程中需要进行无菌操作,其主要原因是 ______ 。
              (3)获得苜蓿再生植株需分别配制诱导丛芽和生根的培养基,这两类培养基的最大区别是 ______ 。
            • 5.
              21三体综合征是一种常见的染色体病,通过产前诊断等手段可有效预防该遗传病的产生。常用的方法有:
              (1)唐氏筛查:抽取孕妇血液化验,检测血清中的甲型胎儿蛋白、绒毛膜促性腺激素等指标,然后进一步检查鉴定。检测这些物质常用 ______ 技术,以细胞工程技术生产的纯度高的 ______ 为试剂进行检测,该试剂最主要的优点在于它的 ______ 。
              (2)羊水检查:胎儿的某些细胞会脱落在羊水中,通过羊水穿刺,可以得到胎儿的 ______ 细胞。将这些细胞通过技术以扩大细胞的数量,对细胞中的染色体进行核型分析,了解胎儿细胞染色体的结构和数目是否正常。患者比正常人多了一条21号染色体,其形成原因是 ______ 。
              (3)无创基因检测:在孕妇的血液中存在胎儿游离DNA片段,可以对21号染色体上的特有基因DSCR3和非21号染色体上的基因GAPDH(做参照)进行实时荧光定量PCR扩增,以测定DSCR3基因和GAPDH基因的含量,计算2种基因剂量的比值如表:
              样品数 DSCR3/GAPDH
              正常人 80 0.884±0.420
              21三体胎儿 5 1.867±0.054
              21三体患者 7 1.810±0.169
              要利用胎儿游离的DNA片段扩增出相应的基因,关键是 ______ 的设计。据表格分析,正常人与21三体患者基因的差异主要是 ______ 。
            • 6.
              为研究肝癌致病机理,科研工作者利用图所示的差异杂交法和基因工程获取相关癌基因以作进一步研究。请据图回答问题:

              (1)图1中,A过程需要用 ______ 酶,D过程需要回收 ______ (填“未杂交”或“杂交分子”)的含32P的cDNA单链,继而通过人工合成,获得 ______ ,并用其构建基因文库。
              (2)从图1构建的基因文库中获取的目的基因,一般还需进行人工改造后才能用于基因表达载体的构建,改造内容除了在基因两端添加限制酶的识别序列外,还需添加 ______ ,以便其随载体导入到受体细胞后,能正常调控表达过程。
              (3)上图2为改造后的目的基因。图3为两种质粒,其中Ampr为氨苄青霉素抗性基因,Tetr为四环素抗性基因,lacZ为蓝色显色基因,其表达产物可使底物X-Gal呈蓝色。EcoRⅠ(0.7Kb)、NotⅠ(1.2Kb)等为限制酶及其切割位点与复制原点之间的距离(1kb=1000个碱基对)。
              ①图3中能作为载体的最理想的质粒是 ______ (填“X”或“Y”),用选定的质粒与图2的目的基因构建基因表达载体时,应选用的限制酶是 ______ 。为筛选出成功导入目的基因的受体细胞,培养基中应适量添加 ______ 。
              ②若用EcoRⅠ完全酶切上述①中获得的重组质粒,并进行电泳观察,可出现四种长度不同的片段,其长度分别为1.7kb、5.3kb、 ______ 。
            • 7.
              人参是珍贵的药用植物,研究人员运用转基因技术构建乙肝病毒表面抗原(HBsAg)的人参细胞表达系统,为珍贵药用植物与疫苗联合应用开辟了新思路,其构建过裎如图所示,图中SmaⅠ、SstⅠ、EcoRV为限制酶。请回答相关问题:

              (1)②的构建过程除限制酶外还需要 ______ 酶;想要从②中重新获得HBsAg基因,所用的限制酶不能是EcoRV或SmaⅠ,原因是 ______ 。
              (2)将重组质粒转入农杆菌常用 ______ 处理細胞;要使目的基因成功整合到人参细胞的染色体上,该过程所采用的质粒应含有 ______ 。
              (3)分析图可知,②中应含有的标记基因是 ______ ;过程⑤的目的是 ______ 。
              (4)该疫苗进入机体后可刺激机体产生能与乙肝病毒特异性结合的 ______ ,同时还能产生 ______ 使机体长期对乙肝病毒具有免疫力。
            • 8.
              利用转基因奶牛乳腺生物反应器可生产人的生长激素,根据图回答有关问题.

              (1)基因表达载体的组成,除了目的基因外,还必须有 ______ 、 ______ 以及标记基因等.
              (2)在体外受精前,要对精子进行 ______ 处理,对于牛的精子常采用 ______ .
              (3)图中①过程常采用 ______ ,图中②过程的培养液成分比较复杂,除一些无机盐和有机盐类外,还需要添加维生素、 ______ 、氨基酸、核苷酸等成分,以及 ______ 等物质.
              (4)早期胚胎发育到 ______ 才进行移植.
            • 9.
              普通牛奶赖氨酸含量低,为了提高牛奶中赖氨酸的含量,吉林大学农学部利用现代生物工程技术培育出世界首例赖氨酸转基因克隆奶牛“织女”,预计将来其分泌的乳汁中含有更多的赖氨酸.如图为培育转基因克隆动物的技术流程图,请回答:

              (1)获得黑白花奶牛成纤维细胞后,利用技术扩增细胞.“织女”牛⑦进入泌乳期后,可通过分泌乳汁来生产人类所需的赖氨酸,因而称为 ______ .
              (2)实施基因工程的核心操作步骤是 ______ ,实现②过程的常用方法是 ______ .
              (3)在目的基因的检测与鉴定过程中,检测目的基因是否发挥功能作用的第一步是 ______ .
              (4)获得重组细胞④时,以去核卵细胞为受体细胞的原因是 ______ .
            • 10.
              去年冬季我国北方再次爆发流感,专家指出接种流感病毒疫苗仍是预防的有效措施。流感病毒为RNA病毒,M基因编码流感病毒表面抗原(M蛋白)。请回答下列问题:(1)由病毒RNA通过 ______  可获得病毒DNA,若要通过PCR技术扩增M基因,关键是设计M基因对应的 ______ 。
              (2)构建M基因表达载体所用的工具酶是 ______ 。为保证目的基因的表达,重组载体上应含有特定的 ______ (复制原点、启动子、标记基因),它能被受体细胞的 ______ 所识别,以便于催化转录过程。
              (3)若要将M基因表达载体导入到大肠杆菌细胞内,以大量生产疫苗,通常先用钙离子处理大肠杆菌,其目的是 ______ 。
              (4)新型疫苗--“DNA疫苗”是将含M基因的重组表达载体直接导入人体内,在人体细胞内通过M基因的表达产生 ______ ,刺激机体通过免疫过程产生 ______ ,提高机体的免疫能力。
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