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            • 1. 为获得果胶酶,科研人员进行了下列果胶酶高产菌株的分离、筛选、鉴定及果胶酶在生产上的应用试验。
              (1)为分离果胶酶产生的某种霉菌,科研人员配制了如表所示成分的培养基,该表中应加入的成分a是______,该成分在培养基中的作用为______;在各种成分溶解配制好后应将pH调到______,再进行高压蒸汽灭菌。
              成分 K2HPO4 MgSO4 NaNO3 FeSO4 a 琼脂 蒸馏水
              质量 0.1g 0.5g 3g 0.01g 2g 15g 加至1L
              (2)将获得的菌株进行扩大培养后,再用______(工具)从滤液中获得粗提的果胶酶。如要检测获得的果胶酶活性,可先将等量的果胶酶和果胶混合处理适宜时间,再加入等量的______,最后根据沉淀物的生成量来判断。
              (3)在果汁和果酒制作过程中,常用果胶酶处理来提高相应产品的______;生产上通过明胶、海藻酸钠(包埋剂)或戊二醛(交联剂)等对果胶酶进行______处理,以减少酶的使用量,降低生产成本。
            • 2. 酵母菌通过基因突变能产生营养缺陷型菌株,由于营养缺陷型菌株丧失了合成氨基酸、嘌呤、嘧啶、维生素等的能力,不能在基本培养基中生长,必须在基本培养基中补充某些物质才能生长。如图简要表明了科学研究者用紫外线处理野生型啤酒酵母菌单倍体获得其营养缺陷型菌株的方法。

              根据以上叙述,回答下列问题:
              (1)若用紫外线处理二倍体酵母菌,除通过基因突变产生营养缺陷型菌株外,涉及的变异类型还可能有______;选用单倍体酵母菌的好处是______。
              (2)酵母菌细胞中质粒上的基因______(遵循、不遵循)孟德尔遗传规律,其主要原因是______。
              (3)BrdU是一种嘧啶类似物,酵母菌在繁殖过程中摄取BrdU并替代胸腺嘧啶脱氧核苷酸的位置掺入到新合成的DNA链中。含BrdU的DNA的酵母菌因其比正常的DNA更容易被紫外线破坏而死亡,不繁殖的酵母菌由于不能利用BrdU,其DNA对紫外线不敏感而存活下来。若图中的营养缺陷型是甘氨酸营养缺陷突变型,请利用上述原理将突变型菌株从野生型菌株中筛选出来并大量繁殖(要求:写出完整的实验步骤)。______。
            • 3. 生物柴油是用动物植物油脂或脂肪酸与甲醇酯化合成的脂肪酸甲酯,是一种可再生的清洁能源。请回答下列相关问题:
              (1)生物柴油产业推广的难点之一在于动植物油脂原料成本较高,所以科研人员将寻找原材料的目光投向了富含脂肪酸的微藻,以下是从微藻中提取脂肪酸的简要流程:

              ①因脂肪酸具有______的性质,故选用有机溶剂萃取法进行提取。
              ②溶剂浸提之前需将材料混干的原因是______。
              (2)传统生产生物柴油是用酸或碱进行催化,会对环境造成污染。科研人员欲分离筛选能产生催化该反应的脂肪合成酶的微生物,用生物酶法生产生物柴油。
              ①自然界中产脂肪合成酶的微生物较少,应在______的环境取土样,在将样品稀释涂布到固体培养基上分离纯化前可先进行选择(富集)培养以达到______的目的。
              ②由于反应物甲醇可以使蛋白质变性而影响催化效率,要得到酶活性较高的菌种,可以在培养基中添加一定浓度的______,从培养基的用途看,这属于______培养基。
              ③分离纯化的菌种还要发酵培养检测______以确定其经济价值。
            • 4. 已知微生物A可以产生油脂,微生物B可以产生脂肪酶.脂肪酶和油脂可用于生物柴油的生产.回答有关问题:
              (1)显微观察时,微生物A菌体中的油脂通常可用于______ 染色.微生物A产生的油脂不易挥发,可选用______(填“萃取法”或“水蒸气蒸馏法”)从菌体中提取.
              (2)为了从自然界中获得能产生脂肪酶的微生物B的单菌落,可从含有油料作物种子腐烂物的土壤中取样,并应选用以______为碳源的固体培养基进行培养.
              (3)若要测定培养液中微生物B的菌体数,可在显微镜下用______ 直接计数;若要测定其活菌数量,可选用______ 法进行计数.
              (4)为了确定微生物B产生的脂肪酶的最适温度,某同学测得相同时间内,在35℃、40℃、45℃温度下降解10g油脂所需酶量依次为4mg、1mg、6mg,则上述三个温度中,______℃条件下该酶活力最小.为了进一步确定该酶的最适温度,应围绕______℃设计后续实验.
              (5)若需克隆脂肪酶基因,可应用______技术.
            • 5. 回答下列关于微生物的问题:
              Ⅰ.检验饮用水的细菌、病毒的含量是有效监控部分疾病发生的必要措施.请回答下列与检验饮用水中大肠杆菌有关的问题:
              (1)检验大肠杆菌的含量时,通常将水样进行一系列的梯度稀释,然后将不同稀释度的水样用涂布器分别涂布到琼脂固体培养基的表面进行培养,记录菌落数量,这种方法称为______.
              如图所示的四种菌落分布图中,图______不是由该方法得到的.

              (2)现有一升水样,用无菌吸管吸取1mL.转至盛有9mL.无菌水的试管中,依次稀释至103 稀释度.各取0.1mL 已稀释103 倍的水样分别接种到三个培养基上培养,记录的菌落数分别为55,56,57.则每升原水样中大肠杆菌数为______个.
              (3)有三种材料或用具需要清毒或灭菌:①培养细菌用的培养基与培养皿;②玻棒、试管、烧瓶和吸管;③实验操作者的双手•其中需要消毒的是______(填序号),需要灭菌的是______(填序号).
              Ⅱ如表是某公司研发的一种培养大肠杆菌菌群的培养基配方.
              成分 蛋白胨、牛肉膏 乳糖 蔗糖 K2HPO4 显色剂 琼脂
              含量(g) 10.0g 5.0g 5.0g 2.0g 0.2g 12.0g
              将上述物质溶解后用蒸馏水定容到1000mL
              (1)根据用途划分该培养基属于______培养基(填“选择”或“鉴别”).该培养基中的碳源是______.
              (2)以下微生物发酵生产特定产物时,所利用主要微生物的细胞结构与大肠杆菌相同的是______(多选)
              A.制作果酒 B.由果酒制作果醋 C.制作泡菜 D.制作腐乳.
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