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            • 1.

              在农业生产研究上,常常需要进行微生物的培养和计数。

              (1) 下图是利用____________法进行微生物接种,把聚集的菌种逐步分散到培养基的表面。

               (2) 分析下面培养基的配方:NaNO3、KH2PO4、NaH2PO4、MgSO4•7H2O、KCl、H2O。若此培养基用于培养分解尿素的细菌,则应除去上述_______成分,并加入______物质,以补充______源。若用于培养纤维素分解菌,应加入________物质,为检测纤维素分解菌的存在与否,还应加入_______染料,含纤维素分解菌将形成__________圈。

            • 2.

              下表是某公司研发的一种培养大肠杆菌菌群的培养基配方,请根据表格和所学知识回答下列相关问题。

              成分

              蛋白胨

              乳糖

              蔗糖

              K2HPO4

              指示剂

              琼脂

              含量(g)

              10.0

              5.0

              5.0

              2.0

              0.2

              12.0

              将上述物质溶解后,用蒸馏水定容到1 000 mL

              (1)从生态系统的成分上看,大肠杆菌属于____________。

              (2)若根据用途划分,该培养基属于________(填“选择”或“鉴别”)培养基。若要用上述培养基来筛选出土壤中的尿素分解菌,培养基的营养成分必需怎样更改?_____________。

              (3)在微生物培养的过程中,为防止杂菌污染,需要对培养基进行________。

              (4)图1和图2是培养某细菌的结果图,其对应的接种方法分别是:________和_________,




              (5)以下过程中所利用的主要微生物的细胞结构与大肠杆菌较相似的有________。

              A.制作果酒  B.由果酒制作果醋    C.制作泡菜     D.制作腐乳

            • 3.

              下列是与微生物培养有关的问题,请回答:

              ⑴某细菌固体培养基的组成成分是、葡萄糖、尿素、琼脂和蒸馏水,其中碳源是_____,氮源是_____。已知只有能合成脲酶的细菌才能在该培养基上生长,该培养基属于_____培养基。按照化学成分分类,该培养基属于_____培养基。从同化作用类型看,用该培养的细菌属于_____

              ⑵一小组采用稀释涂布平板法检测水样中细菌含量.在涂布接种前,随机取若干灭菌后的空白平板先行培养了一段时间,这样做的目的是 ______ ;然后,将1mL水样稀释100倍,在3个平板上用涂布法分别接入0.1mL稀释液;经适当培养后,3个平板上的菌落数分别为39、38和37,据此可得出每升水样中的活菌数为 ______ .
              (3)该小组采用平板划线法分离水样中的细菌,操作时,接种环通过 ______ 灭菌,在第二次及以后的划线时,总是从上一次划线的末端开始划线,这样做的目的是 ______ .
              (4)纯化微生物,可以用_______________方法
            • 4.

              有机农药苯磺隆是一种除草剂,长期使用会污染环境。研究发现,苯磺隆能被土壤中某些微生物降解。分离降解苯磺隆的菌株和探索其降解机制的实验过程如图甲、乙所示.


              (1)微生物生长繁殖所需的主要营养物质有碳源、水、________、____________四类,该实验所用的选择培养基只能以苯磺隆作为唯一碳源,其原因是_________________。

              (2)纯化菌株时,通常使用的划线工具是___________。划线的某个平板培养后,第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌,第二划线区域所划的第一条线上无菌落,其他划线上有菌落。造成划线无菌落可能的操作失误有________________________________________。

              (3)为探究苯磺隆的降解机制,将该菌种的培养液过滤离心,取上清液做图乙所示实验。该实验的假设是_________________________,该实验设计是否合理?为什么?_________________________________________________________________。

            • 5.

              苯酚及其衍生物广泛存在于工业废水中,对环境有严重危害。小明同学准备依据下图操作步骤,从处理废水的活性污泥中分离筛选酚降解高效菌株。请回答下列问题:

              (1)酚降解菌富集培养基含有蛋白胨、K2HPO4、MgSO4、苯酚和水,其中可作为碳源的有_____________,该培养基属于_______培养基。

              (2)将采集到的样品接种培养,苯酚用量应随转接次数增加而逐渐______,以达到富集酚降解菌的目的。

              (3)小明同学采用_________________法进一步分离纯化目的菌,该方法先需要用________________对菌液进行梯度稀释,进行梯度稀释的理由

              是_______________。制备该步骤中用的培养基时除了需要水、营养物质外,还必须添加_____________。

              (4)下图为______________法示意图,在图中_________(填图中序号)区域更易获得单菌落。

            • 6.

              下列有关从土壤中分离所需的微生物的叙述,不正确的是

              A.土壤中微生物最多的是细菌,生活在酸碱度接近中性的潮湿土壤中

              B.测定土壤中细菌总量比测定分解尿素的细菌数量时的稀释倍数更大

              C.为了保证选出30-300间的菌落,应缩小稀释的范围

              D.应在火焰旁称取土壤,小铁铲和盛土样的信封都需灭菌处理
            • 7. 金黄色葡萄球菌是一种具有高度耐盐性的微生物,可引起人类肺炎、肠炎等疾病。金黄色葡萄球菌在血平板(培养基中添加适量血液)上生长时,可破坏菌落周围的红细胞,使其褪色。下图为定性检测鲜牛奶中是否存在金黄色葡萄球菌的操作流程,请回答相关问题。

              (1)按细胞结构分类,金黄色葡萄球菌属于______生物,从培养过程分析,金黄色葡萄球菌可进行_______呼吸。

              (2)7.5%NaCl肉汤培养基可为微生物提供的营养成分包括________________,用7.5%NaCl肉汤培养基进行选择培养的主要目的是______________________。

              (3)操作中在血平板上的接种方法是____________,接种操作前后需要对接种工具进行___________灭菌。

              (4)在制备血平板时需将pH调节至________(“微酸性”或“微碱性”)后灭菌,待培养基冷却后,再加入适量血液。经多次规范操作、重复实验,血平板上均出现_____________________的菌落,初步证明鲜牛奶中存在金黄色葡萄球菌,但鲜牛奶供应商仍认为此菌并非鲜牛奶所携带,因此要对本操作进行完善,完善的方案是_______________________________。

            • 8.

              土壤中含有大量的难溶性磷酸盐,为了从土壤中筛选出能够将难溶性磷酸盐转化为植物能吸收的可溶性磷的优良解磷菌株,以便将其添加到有机肥中,改善植物磷元素供应。科研人员进行如下实验:


                                             图1                                                               图2

              实验原理:固体培养基中难溶性磷酸盐在微生物的作用下溶解,会在菌落周围形成透明圈(如图),透明圈直径(D)与菌落直径(d)的比值(D/d)代表微生物溶解磷的能力大小。实验步骤:

                  步骤1 取某地区土样5 g制得土壤溶液后稀释,取稀释液1 mL接种到基础培养基A上,在适宜温度下培养72 h。                  

                  步骤2 在基础培养基A上用接种环挑取代表性菌落再次接种,培养3~4 d后观察菌落特征和透明圈的大小。

              菌株

              透明圈直径(D)

              菌落直径(d)

              D/d

              M-3-01

              18.8

              12.3

              1.5

              B3-5-6

              20.7

              8.0

              2.6

              T1-4-01

              9.1

              6.5

              1.4

              (1)从物理形态看,培养基A属于________培养基。培养基中磷源应该是_____________。

              (2)步骤1中接种方法是________,步骤2中接种环的灭菌方法是________。

              (3)根据实验结果可以确定溶解磷能力最强的菌株是________。

              (4)为进一步测定初步筛选的三种菌株实际溶解磷的能力,研究人员将它们接种到基础培养基B中,并在37 ℃、200 r·min-1摇床培养,定期取上清液,测定溶液中可溶性磷含量,得到图2所示曲线。

              ①用摇床进行培养的好处是____________________、___________________。

              ②结果表明最优良的解磷菌株是________________________________________。

            • 9.

              下列就“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数”实验的有关叙述,不正确的是( )

              A.经高压蒸汽灭菌的培养基所倒平板和接种后培养时的平板均要倒置
              B.同一稀释度下至少要涂布三个平板并且要培养到菌落数稳定时计数
              C.在稀释度足够高时,所形成的单个菌落中所有细胞的遗传信息必定相同
              D.在相同培养条件下,未接种的培养基表面无菌落生长说明培养基没有被杂菌污染
            • 10.

              牛奶富含蛋白质长期饮用有助于增强体质,但牛奶同时也是多种疾病的传播载体。国家标准是每毫升牛奶中细菌数小于30000个。以下是牛奶消毒及细菌检测实验。

              (1)图中步骤①称为_______消毒法。步骤②是_______________。

              (2)培养基中的蛋白胨可以为微生物提供_________________。进行步骤③操作时,应选用下列中的哪种工具?______。为了避免杂菌污染,此步骤应在____________附近进行。

              (3)将接种后的培养基和作为对照的________________同时放入37℃恒温培养箱中,培养36小时。取出后统计各平板的菌落数,结果如表所示。应该选择其中稀释倍数为______的平板进行计数,经过消毒后的牛奶中,细菌数大约是_________/mL。

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