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            • 1. 回答下列关于基因工程的问题.
              外源基因需要导入受体细胞才能实现其表达功能.下图示一种外源基因导入受体细胞的方法,请据图分析回答:

              (1)图所示的导入方法称为    .在动物基因工程中,受体细胞通常采用    
              基因工程操作步骤中,需要从受体细胞群中筛选出已获得目的基因的细胞,下图①-③示一种筛选方法的过程.
              pBR322质粒含有两个抗性基因,分别是Amp(氨苄青霉素)抗性基因和Tet(四环素)抗性基因,其中在Tet抗性基因上有下列目的基因的插入位点(插入将导致Tet抗性基因功能性失活),请据图分析回答:

              (2)图中①过程所需的酶是    
              (3)经过①过程,pBR322质粒可能出现的两种结果A是        
              (4)②过程表示用含四环素(使细胞停止生长,但不致死)和环丝氨酸(使生长的细胞致死)的培养基中培养细菌甲,则培养结果C表示在培养基中可能存活的细菌包括    
              (5)若要进一步筛选出符合要求的受体细胞D,则③过程需要做的处理是(请参照过程②的方法)    
              基因工程中使用的Ⅱ型限制性核酸内切酶通常可以识别长度为4-8个核苷酸的特异序列.下列图示限制酶Sau3AⅠ对DNA片段切割的结果.

              (6)请据图分析,Sau3AⅠ的识别序列以及切割位点(用“↓”表示)是    
              下表列出了几种限制酶的识别序列及其切割位点,图1(含两个抗性基因的质粒)和图2(含目的基因的外源DNA)中箭头表示相关限制酶的酶切位点,请据图分析回答:
              限制酶XhoⅠBclⅠSalⅠBamHⅠXbaⅠ
              识别序列及酶切位点C↓TCGAGT↓GATCAG↓TCGACG↓GATCCT↓CTAGA

              (7)为了使目的基因和质粒实现定向连接和便于受体细胞的筛选,切割质粒的限制酶应选用    ,切割含目的基因的外源DNA的酶应选用    
            • 2. 如图是培育表达人乳铁蛋白的乳腺生物反应器的技术路线.图中tetR表示四环素抗性基因,ampR表示氨苄青霉素抗性基因,BamHI、HindIII、Sma I直线所示为三种限制酶的酶切位点.据图回答:

              (1)图中将人乳铁蛋白基因插入载体,需用    限制酶同时酶切载体和人乳铁蛋白基因.筛选含有重组载体的大肠杆菌首先需要在含    的培养基上进行.能驱动人乳铁蛋白基因在乳腺细胞中特异性表达的调控因子是图中的    .过程①采用的操作方法通常是    
              (2)过程②代表的生物技术是    .对早期胚胎进行切割,经过程②可获得多个新个体.目前最常见的是经分割产生的同卵    胎.
              (3)为检测人乳铁蛋白是否成功表达,可采用    技术.
              (4)对代孕牛的要求是    
            • 3. 2009年10月,我国自主研发的转基因抗虫水稻“华恢1号”获得农业部颁发的安全证书.图1表示该抗虫水稻主要培育流程,据图回答:

              (1)④过程应用的主要生物技术是    ;该技术的过程主要包括        两个阶段,利用的基本原理是    
              (2)杀虫基因(crylA)是人们根据几种Bt毒蛋白的分子结构,设计并人工合成的,这属于    工程技术范畴.
              (3)组建理想的载体需要对天然的质粒进行改造.图2是天然土壤农杆菌Ti质粒结构示意图(示部分基因及部分限制性内切酶作用位点),据图2分析:
              ①人工改造时,要使抗虫基因表达,还应插入    
              ②人工改造时用限制酶Ⅱ处理,其目的是:第一,去除质粒上的    (基因),保证T-DNA进入水稻细胞后不会引起细胞的无限分裂和生长;第二,使质粒带有单一限制酶作用位点,有利于    .第三,使质粒大小合适,可以提高转化效率等.
              ③若用限制酶Ⅰ分别切割改造过的理想质粒和带有抗虫基因的DNA分子,并构成重组Ti质粒.分别以含四环素和卡那霉素的培养基培养已成功导入抗虫基因的水稻胚细胞,观察到的细胞生长的现象是    
              (4)若限制酶Ⅱ切割DNA分子后形成的粘性末端为,则该酶识别的核苷酸序列是    
            • 4. 酿酒过程中若操作不慎,所酿的酒可能变酸.分析回答:
              (1)酿酒所需的微生物是    ,产生的酒精可以与     (试剂)发生显色反应.
              (2)在变酸的酒的表面观察到的菌膜是    在液面大量繁殖而形成的.若要对该菌进行初步分离纯化,比较便捷的操作是:采用    法(填“平板划线”或“稀释涂布平板”)把它们接种到    (填“固体”或“液体”)培养基上,经培养得到肉眼可见的    
              (3)实验室中常用    法对培养基及器皿进行灭菌.不同培养基的具体配方不同,但一般都含有水、        和无机盐.
            • 5. 1中含有链霉素,其它培养基中不含链霉素.请据实验回答:

              (1)将原始对链霉素敏感大肠杆菌K12菌种涂布在培养皿1的表面培养,接着通过右图“印章”将培养皿1中的菌群“印”在培养皿2、3上培养.“印章”位置保持不变.培养皿2、3根据其功能,分别称为    培养基、    培养基.
              (2)培养基3的A点处有菌落生长,将培养基2中相应的A点位置的菌落上挑出少量移入培养基4中.如图反复几次实验.请根据实验现象解释“微生物的突变是自发的还是环境因素导致的”:    
              (3)要分离出单个菌落,除了本实验中的涂布法外,还可以用    法.
              (4)上述不含链霉素培养基通常使用的是    ,下表是另一种培养基配方,该培养基具有    作用.
              成分KH2PO4Na2PO4MgSO4•7H2O葡萄糖尿素琼脂
              含量1.4g2.1g0.2g0.0g1.0g15.0g
              (5)现有5种营养缺陷型菌株1、2、3、4、5,它们不能合成生长所必需的物质G,已知A、B、C、D、E都是合成G物质的必需中间产物,但不知这些物质合成的顺序,于是在培养基中分别加入这几种物质并分析了这几种物质对各种营养缺陷型菌株生长的影响,结果如下表所示.根据以上结果,推测这几种物质的合成顺序应是    
              物质
              突变体
              培养基中加入的物质
              ABCDEF
              1---+-+
              2-+-+-+
              3-----+
              4-+++-+
              5++++-+
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