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            • 1.

              高温淀粉酶在大规模工业生产中有很大的实用性。研究者从赤峰市克旗热泉(出口水温达87℃)中筛选了高效产生高温淀粉酶的嗜热菌,其筛选过程如图所示。请回答下列问题:



              (1)I号培养基中应加入___________,以便挑选出能产生高温淀粉酶的嗜热菌。从I号培养基中挑选__________菌落接种到II号培养基中。

              (2)②过程所使用的接种方法是___________________。如果不经过①过程,直接将采集的样品进行接种培养,可能出现的结果是___________________

              _____________。

              (3)I、II号培养基接种菌种后,应该置于__________的恒温培养箱中培养,培养皿要倒置的原因是_______________________________。

              (4) 在高温淀粉酶运用到工业坐产前,需对该酶的最佳温度范围进行测定。下图中的曲线①表示酶在各种温度下酶活性相对最高酶活性的百分比。将酶在不同温度下保持足够长的时间,再在酶活性最高的温度下测其残余酶活性,由此得到的数据为酶的热稳定性数据,如曲线②。根据实验结果分析:80℃并不是该酶使用的最佳温度,原因是___________________。

            • 2.

              1.生物乙醇是以生物为原料生产的可再生能源。我国利用农作物废弃物(秸秆)生产乙醇,其技术流程为:纤维素酶分解→酵母菌发酵→蒸馏→成品。纤维素酶可以从能分解纤维素的细菌培养液中提取。某同学设计了从土壤中分离纤维索分解菌的实验流程:土壤取样→选择培养→梯度稀释→鉴别培养。请分析回答下列问题:

              (1)最好选择       环境采集土样。

              (2)配置培养基时,各种成分在熔化后分装前必须进行       ,接种前要进行       

              在整个微生物的分离和培养中,一定要注意在无菌条件下进行。在制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的倒平板操作时,平板冷凝后,应将平板       放置,这样做的目的是       

              (3)以下是A、B两种培养基配方:

              A培养基配方:

              KH2P04

              Na2HP04

              MgS04.7H20

              葡萄糖

              尿素

              琼脂

              1.4克

              2.1克

              0.2克

              10.0克

              1.0克

              15.0克

              B培养基配方:

              KH2P04

              NaN03

              Na2HP04.7H20

              MgS04.7H20

              KCl

              纤维素粉

              酵母膏

              水解酪素

              0.9克

              l克

              1.2克

              0.5克

              0.5克

              5克

              0.5克

              0.5克

              如果要分离提纯土壤中的纤维素分解菌,应选择   (填编号)培养基配方,从功能看该培养基属于___   ____培养基。该培养基能增加样品中纤维素分解菌的浓度,其原理是                  

              (4)为了鉴别纤维素分解菌和进一步纯化菌种,可以在鉴别培养基中加入       ,将筛选获得的菌液稀释后用      法接种到鉴别培养基上,然后挑选产生     的菌落作为菌种进行扩大培养。

              (5)乙醇是酵母菌的发酵产物,发酵时酵母菌直接利用的物质是               

              2.科学家从某些能无限增殖细胞的细胞质中分离出无限增殖调控基因(prG),该基因能激发许多动物细胞分裂,这为单克隆抗体的制备提供了更为广阔的前景。请回答下列问题:

              (1)利用细胞融合技术制备单克隆抗体的过程中,促进动物细胞融合常用的诱导剂是       ,植物体细胞杂交在细胞融合之前要用           处理。

              (2)利用细胞融合技术制备单克隆抗体时有两次筛选,第1次筛选的目的是       ,第2次筛选的目的是           

              (3)有人提出,可以直接通过基因工程导入该调控基因来制备单克隆抗体,其思路如图所示。请回答下列问题:

              ①.酶A是指       ,酶B是指       

              ②.对已导入重组质粒的Ⅱ进行“检测”的目的是         ;题目中Ⅱ所指的细胞是       ,Ⅲ所9指的细胞具有的特点是           

              (4)也有人提出用细胞核移植技术构建重组细胞来生产单克隆抗体,试用相关的图示及文字表示该过程:(图中·和▲代表细胞核,○代表细胞质)

            • 3. (10分) 有机农药苯磺隆是一种除草剂,长期使用会污染环境。研究发现,苯磺隆能被土壤中某些微生物降解。分离降解苯磺隆的菌株和探索其降解机制的实验过程如图甲、乙所示。

              (1)微生物生长繁殖所需的主要营养物质有碳源、水、___________________四类,该实验所用的选择培养基只能以苯磺隆作为唯一碳源,其原因是________________________________________________________________。

              (2)纯化菌株时,通常使用的划线工具是____________。划线的某个平板培养后,第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌,第二划线区域所划的第一条线上无菌落,其它划线上有菌落。造成划线无菌落可能的操作失误有___________________________________________________________。

              (3)为探究苯磺隆的降解机制,将该菌种的培养液过滤离心,取上清液做图乙所示实验。该实验的假设是_____              

            • 4.

            • 5. (11分).(1)某同学在做微生物实验时,不小心把圆褐固氮菌和酵母菌混合在一起。请你完成分离得到纯度较高的圆褐固氮菌和酵母菌的实验步骤,并回答有关问题:

              ⑴主要步骤:

              ①制备两种培养基:一种是____培养基,另一种_____的培养基。分别分成两份,依次标上A,A的B,B,备用。

              ②分别向A、B培养基中接种______。

              ③接种后,放在恒温箱中培养3~4天。

              ④分别从A、B培养基的菌落中挑取生长良好的菌种,接种到A、B培养基中。

              ⑤接种后,把A、B培养基放入恒温箱中培养3~4天。

              ⑵回答问题:

              在步骤①中,为保证无杂菌污染,实验中应采用的主要措施有__________、______________、_____________。

              第④⑤两个步骤的目的是_____________________。

              (2)用基因工程技术从经过分离、提纯的圆褐固氮菌中获取固氮基因,然后进行PCR扩增。下列表1和表2分别表示用PCR扩增固氮基因的反应体系及反应条件。

              PCR反应体系

              50ul

              缓冲液

              5ul

              脱氧核苷酸

              1ul

              引物A      

              0.5ul

              引物B      

              0.5ul

              DNA聚合酶   

              0.5U

              模板DNA     

              1-2ul

              加去离子水补足至50 ul

              反应条件

              温度

              时间

              变  性

              95 ℃

              30s

              复  性

              55 ℃

              30s

              延  伸

              72 ℃

              1min

              30个循环后

              适宜

              5-10min

              保  温

              4 ℃

              2h

              ①从上表中可得出,PCR技术与DNA复制相比较,主要区别之一是                                                        

                   此外,从反应条件看,所使用的DNA聚合酶应具有__________的特点。每次循环都需要2种引物的主要原因是_______________           ________________。

              ②下图为第1轮循环产生的产物。请绘出以a链和b链为模板经PCR扩增的产物。

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