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            • 1. 为了检测抗生素作用,需要做细菌耐药实验。
              (1)为了统计某治病菌活菌数,可用________________法将样本接种于固体培养基表面。该接种方法中的接种工具是________________。
              (2)为了检测致病菌对于抗生素的敏感性,将分别含有A、B、C、D四种抗生素的滤纸片均匀置于该平板上的不同位置,培养一段时间后,含A的滤纸片周围出现透明圈,说明该致病菌对抗生素A  ________________;含B的滤纸片周围没有出现透明圈,说明该病菌对抗生素B________________;含C的滤纸片周围的透明圈比含A的小,说明________________;含D的滤纸片周围的透明圈也比含A的小,且透明圈中出现了一个菌落,在排除杂菌污染的情况下,此菌落很可能是抗生素D的________________。
              (3)根据(2),抗生素________________抗菌效果最好。

              (4)人类经常使用抗生素,细菌抗药性不断增强是________________的结果。

            • 2. 纤维素分解性细菌是能分解纤维素的细菌。这类细菌多见于腐植土中,下面是分离纤维素分解菌的实验流程。

              土壤取样→①→梯度稀释→接种到②→挑选产生透明圈的菌落

              (1)以上实验流程中①是_________,①过程中使用的培养基是___________(液体培养基、固体培养基);②是__________________。

              (2)过程②用到的培养基中加入了一种染料与______形成红色复合物,刚果红染色法有两种,一种是先培养__________,再加入刚果红进行颜色反应;另一种是在________加入刚果红。

              (3)菌落周围出现透明圈说明纤维素分解菌能分泌纤维素酶,该酶是一种复合酶至少包括_____________________,并最终把纤维素分解成______________。

              (4)某实验小组为了研究pH对纤维素分解菌产生的纤维素酶活性的影响,将纤维素分解菌分别接种在pH不同的刚果红—纤维素培养基中,通过观察出现透明圈的最早时间和24h后透明圈直径的大小来判断纤维素酶活性的高低,该实验小组设置了pH分别为6、7、8的三组实验进行观察,得到了如下的实验结果:

              pH

              出现透明圈的最早时间(h)

              24h后透明圈的直径(cm)

              6

              6

              4.42

              7

              10

              3.66

              8

              24

              1.33

              通过上述结果可知,该实验的自变量是_______,因变量是________和____________,纤维素分解菌更适合在偏_______(填“酸”、“碱”或“中”)性环境下生长。

              (5)纤维素酶的测定方法,一般是采用对纤维素酶分解滤纸等纤维素后所产生的_________进行定量的测定。

            • 3.

              三孢布拉霉菌能用来生产胡萝卜素,但该菌株的高产性状容易退化,需要定期筛选出高产菌株,研究表明菌体细胞内的[H]可将无色的TTC还原为红色复合物(颜色深浅与[H]的含量成正相关),且菌体细胞内[H]含量越高,还原能力越强,胡萝卜素合成能力也越强。请结合下列筛选菌株及提取胡萝卜素的流程图。回答下列问题:

              三孢布拉霉菌液→梯度稀释→涂布到含有TTC的培养基上→挑取单菌落→扩大培养→收集菌丝并处理→萃取→过滤→浓缩→鉴定

              (1)工业生产上提取天然胡萝卜素的方法主要有三种,除可利用上述微生物的发酵生产之外,还可以从植物中提取和从___________中获得。

              (2)将菌液涂布到含TTC的培养基上前,需要用_________(物质)对菌液进行梯度稀释;接种时,如何对接种工具涂布器进行灭菌?________。

              (3)挑取单菌落时,若菌落周围_________________,则菌株合成胡萝卜素的能力较强。扩大培养时,需要使用________________(物理状态)培养基。

              (4)从该微生物中提取胡萝卜素时,扩大培养后要收集三孢布拉霉菌菌丝进行的处理是粉碎和________,以提高萃取效率。萃取法提取胡萝卜素时,经常使用石油醚作为萃取剂,除其能够充分溶解胡萝卜素外,还具有的优点有____________________(答出两点);萃取液的浓缩可以直接使用________装置。

            • 4. 某化工厂的染水池中,含有一种有害的、难于降解的有机化合物A,研究人员用化合物A、磷酸盐、镁盐以及微量元素配制的培养基,成功地筛选到能高效降解化合物A的细菌(目的菌).实验的主要步骤如图所示.请分析回答问题:
              (1)培养基中加入化合物的目的是筛选 ______ ,这种培养基属于 ______ 培养基.
              (2)“目的菌”生长所需的氮源和碳源是来自培养基中的 ______ ,实验需
              要振荡培养,由此推测“目的菌”的代谢类型是 ______
              (3)培养若干天后,应选择培养瓶中化合物A含量 ______ 的培养液,接入新的培养液中连续培养,使“目的菌”的数量 ______
              (4)转为固体培养时,常采用 ______ 的方法接种,获得单菌落后继续筛选.
              (5)若研究“目的菌”的生长规律,将单个菌落进行液体培养,可采用 ______ 的方法进行计数,以时间为横坐标,以 ______ 为纵坐标,绘制生长曲线.
              (6)实验结束后,使用过的培养基应该进行 ______ 处理后,才能倒掉.
            • 5. 生物柴油是一种可再生的清洁能源,其应用在一定程度上能够减缓人类对化石燃料的消耗.科学家发现,在微生物M产生的脂肪酶作用下,植物油与甲醇反应能够合成生物柴油(如图)

              (1)用于生产生物柴油的植物不易挥发,宜选用 ______ ______ 方法从油料作物中提取.
              (2)筛选产脂酶的微生物M时,选择培养基中添加的植物油为微生物生长提供 ______ ,培养基灭菌采用的最适方法是 ______ 法.
              (3)测定培养液中微生物数量,可选用 ______ 法直接计数;从微生物M分离提取的脂肪酶通常需要检测 ______ ,以确定其应用价值;为降低生物柴油生产成本,可利用 ______ 技术使脂肪能够重复使用.
              (4)若需克隆脂肪酶基因,可应用耐热DNA聚合酶催化的 ______ 技术.
            • 6. 在调查和分离湖水中耐盐细菌的实验中,先将10升湖水水样浓缩至10毫升,然后各取浓缩水样1毫升,涂布到多个培养皿中培养.请回答:
              (1)可以通过提高培养基中    的浓度,筛选被调查细菌,这种培养基被称为    培养基.
              (2)要提高实验结果的可靠性,排除培养基未彻底灭菌的可能性,应该设置的对照组是    .为检验(1)中筛选方法的效果,可以设置的对照组是    
              (3)在微生物的培养过程中,实验室对培养基灭菌常用的方法是    .为防止冷凝水影响细菌的生长,需将培养皿    培养.在培养基上产生的单个菌落在生态学中可以被称为    
              (4)根据培养皿上菌落的平均数可以计算湖水中该种细菌的密度,但计算的数据要比实际活菌的数目少,原因是    
            • 7. 为了检测饮用水中是否含有某种细菌,配制了如表培养基配方:
              蛋白胨乳糖蔗糖K2HPO4伊红美蓝蒸馏水pH
              10g5g5g2g0.4g0.065g100mL7.2
              (1)该培养基所含的碳源有    ,其功能是    
              (2)该培养基所含的氮源有    ,其功能是    
              (3)该培养基除含碳源、氮源外,还有微生物需要的营养物质是    
              (4)该细菌的同化作用类型是    
              (5)该培养基可用来鉴别哪种细菌?    
              A.霉菌        B.大肠杆菌        C.酵母菌        D.乳酸菌.
            • 8. 在农业生产中发现一种广泛使用的除草剂(含氮有机化合物)在土壤中不易降解,长期使用可污染土壤.为修复被该除草剂污染的土壤,可按下面程序选育能降解该除草剂的细菌(已知该除草剂在水中溶解度低,含一定量该除草剂的培养基不透明).

              (1)制备土壤浸出液时,为避免菌体浓度过高,需将浸出液进行    处理.
              (2)要在长期使用该除草剂的土壤中分离目的菌,从物理性质、用途方面来看,上述培养皿中的培养基应具有的特点是:在     的培养基中加入    
              (3)在划线培养时,只有很少菌落出现,大部分细菌在此培养基上不能生长的主要原因是    
              (4)在固体培养基上形成的菌落中,无透明带菌落利用的氮源主要是    ,有透明带菌落利用的氮源主要是    ,据此可筛选出目的菌.
              (5)若实验接种时用的是稀释涂布平板法,在统计菌落数目时得到4个平板,统计的数目分别为21、213、257、278,则对数据处理后取平均值计数为    ,该方法往往比活菌的实际数目偏    (高/低).
            • 9. 生物柴油是一种可再生的清洁能源,其应用在一定程度上能够减缓人类对化石燃料的消耗.科学家发现,在微生物M产生的脂肪酶作用下,植物油与甲醇反应能够合成生物柴油(如图)

              (1)用于生产物柴油的植物没不易挥发,宜选用 ______ ______ 方法从油料作物中提取.
              (2)筛选产脂酶的微生物M时,选择培养基中添加的植物油为微生物生长提供 ______ ,培养基灭菌采用的最适方法是 ______ 法.
              (3)测定培养液中微生物数量,可选用 ______ 法直接计数;从微生物M分离提取的脂肪酶通常需要检测 ______ ,以确定其应用价值;为降低生物柴油生产成本,可利用 ______ 技术使脂肪能够重复使用.
              (4)若需克隆脂肪酶基因,可应用耐热DNA聚合酶催化的 ______ 技术.
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