I．为了调查某河流的水质状况，某研究小组测定了该河流水样中的细菌含量，并进行了细菌分离等工作。回答下列问题：

(1)该小组采用稀释涂布平板法检测水样中的细菌含量。在涂布接种前，随机取若干灭菌后的空白平板先行培养了一段时间，这样做的目的是____________________；然后，将1 mL水样稀释100倍，在3个平板上用涂布法分别接入0.1 mL稀释液；经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为39、38和37。据此可得出每升水样中的活菌数为________。

(2)在第二次及以后的划线时，总是从上一次划线的末端开始划线。这样做的目的是_____________________________。

(3)微生物生长繁殖所需的主要营养物质有碳源、水、______、_______四类，该实验所用的选择培养基只能以苯磺隆作为唯一碳源，其原因是_________________________。

（4)纯化菌株时，通常使用的划线工具是________。划线的某个平板培养后，第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌，第二划线区域所划的第一条线上无菌落，其他划线上有菌

落。造成划线无菌落可能的操作失误有________________________________。

（5）为探究苯磺隆的降解机制，将该菌种的培养液过滤离心，取上清液做图乙所示实验。该实验的假设是________________________，该实验设计是否合理？为什么？___________。

（6）若要统计培养液中活菌的数目，则应采用_______________法进行接种。

根据各类微生物的形态结构特点和新陈代谢类型，利用选择培养基和鉴别培养基，结合显微镜镜检以及菌落特征，可以把混杂在一起的大肠杆菌、硝化细菌、乳酸菌、酵母菌、金黄色葡萄球菌、圆褐固氮菌、尿细菌、纤维杆菌分离开来。下面是分离筛选的方法步骤，请根据各个步骤的条件，填写空格中的内容：

首先配制一系列不同性质的固体培养基，然后进行高温灭菌。再将上述微生物的混合液分别接种到各种培养基上培养。

(1)利用无氮培养基可筛选出________________。

(2)用不含有机碳源的选择培养基可筛选出_________________.

(3)酵母菌的筛选需要在常规培养基中另加人_______________。

(4)用含较高浓度NaCl的培养基可选择出________________。

(5)利用伊红一美蓝培养基培养混合菌，菌落呈黑色是____________，挑取该菌落单独培养，结合显微镜镜检和进一步用伊红——美蓝鉴别培养基来确定。

(6)在无氧环境下培养混合菌，同时加入一定浓度的乳酸，使培养基pH充分降低，利用菌落特征，结合显微镜镜检，选取生长优势的菌落，即可分离出________________。

(7)利用碳源为纤维素的液体培养基可筛选______________________。

(8)若筛选尿细菌，则配制的培养基特点是________________________。初步筛选后为了进一步验证分解尿素的细菌是否存在，常用的方法是        。

(9)在上述实验接种时可采用平板划线法，操作结束为什么仍需要灼烧接种环？                                                           。

蓝色牛仔裤常选用质地较粗的棉布料，为了美观和穿着舒适，以往采用“石洗”法，把成捆的布料和浮石放在机器中翻滚，使它变得柔软。现在改用“生物石洗”法，用含有纤维素酶和蓝靛染料的溶液水洗布料，当达到一定柔软度时，冲洗掉纤维素酶。

（1）自然界中纤维素的来源是___________________。它是_______________的基本组成成分。纤维素酶能使布料柔软的原因是_______________。

（2）某研究性学习小组同学，为了从土壤中筛选纤维素分解菌，利用下列材料和用具进行了实验，请完善下列实验步骤。

   提示：刚果红能与纤维素形成红色复合物，纤维素分解菌在含有刚果红和纤维素的培养基上形成有透明圈的菌落。

   材料用具：采集的土样，研钵，配制纤维素分解菌培养基的各种原料，琼脂，纤维素粉，刚果红溶液，培养箱，无菌水。

   实验步骤：

   ①利用培养纤维素分解菌培养基的各种原料、琼脂及________________配制固体培养基，灭菌。

   ②将采集的土壤样品在研钵中研碎后_____________________________，制成土壤匀浆。

   ③利用无菌操作方法把土壤匀浆___________到培养基上，放在培养箱内培养一段时间。

④用显微镜观察纤维素分解菌时，要从____________________挑取材料制成临时装片。

（3）在用平板计数法纤维素分解菌数目统计时，统计的菌落数往往比活菌的实际数低，这是因为                        。

（4）如果探究温度对纤维素酶活性的影响，自变量是                ，应该保持                               等不变（至少答两项）。

土壤中微生物种类繁多，功能强大。比如：最显著的作用是分解有机质：把植物的残根败叶和施入土壤中的有机肥料分解，改善土壤的结构和供给植物吸收。若利用其中某种微生物，则需要进行菌种的分离和纯化。以下示意图是从土壤中分离出分解尿素的微生物流程图。请分析相关问题：

（1）②过程所使用的接种方法对微生物进行计数时，统计的菌落数往往比活菌的实际数目________，原因是________。

（2）从用途上来说，1号培养基属于________培养基，制备该培养基的步骤是：计算→称量→________→________→倒平板。

（3）该实验中酶活性鉴定是鉴定________酶的活性，可以加入________指示剂，如果指示剂变为________色，说明该酶的检测为阳性。

（1）实验步骤：

①配制以_____________ 为碳源的固体培养基，为了使培养基凝固成固体，应该向培养基中加入的物质是 _____________ 。

②将土壤样品接种到已灭菌的培养基上，在恒温培养箱中培养一段时间后，培养基上出现 _____________ 。

③将接种针用 _____________ 法灭菌后，从②中的培养基上挑取一定量细菌，接种入_____________（固体、半固体、液体）培养基，在恒温摇床上培养24h，使细菌大量繁殖。

④配制与①相同的培养基，并加入少量碘液，使培养基呈蓝紫色。用 _____________ 法将上一步大量繁殖后的细菌接种到已灭菌的培养基上。

⑤培养一段时间后，观察菌落周围培养基的颜色变化和变化范围的大小。周围出现较大__________  现象的菌落即为初选菌落，经进一步分离、纯化后即可达到实验目的。

（2）上述所有倒平板和接种操作，都应在超净台上酒精灯 _____________   附近进行。

（3）上述实验步骤中，从用途看，①所用培养基属于 _______培养基，⑤所用培养基属于_______培养基。

(1)该小组采用稀释涂布平板法检测水样中的细菌含量。在涂布接种前，随机取若干灭菌后的空白平板先行培养了一段时间，这样做的目的是____________________；然后，将1 mL水样稀释100倍，在3个平板上用涂布法分别接入0.1 mL稀释液；经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为39、38和37。据此可得出每升水样中的活菌数为________。

(2)在第二次及以后的划线时，总是从上一次划线的末端开始划线。这样做的目的是_____________________________。

II．有机农药苯磺隆是一种除草剂，长期使用会污染环境。研究发现，苯磺隆能被土壤中某些微生物降解。分离降解苯磺隆的菌株和探索其降解机制的实验过程如图甲、乙所示。 
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(1)微生物生长繁殖所需的主要营养物质有碳源、水、______四类，该实验所用的选择培养基只能以苯磺隆作为唯一碳源，其原因是_________________________。

(2)与微生物培养基相比，植物组织培养的培养基常需添加生长素和________，这些植物激素一般需要事先单独配制成________保存备用。

(3)纯化菌株时，通常使用的划线工具是________。划线的某个平板培养后，第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌，第二划线区域所划的第一条线上无菌落，其他划线上有菌落。造成划线无菌落可能的操作失误有________________________________。

(4)为探究苯磺隆的降解机制，将该菌种的培养液过滤离心，取上清液做图乙所示实验。该实验的假设是________________________，该实验设计是否合理？为什么？______________________。

据表判断，培养基甲      （填“能”或“不能”）用于分离和鉴别纤维素分解菌，原因是             ；培养基乙        （填“能”或“不能”）用于分离和鉴别纤维素分解菌，原因是             。