【生物—选修1：生物技术实践】

  泡菜是四川人非常喜爱的家常小菜，新鲜的泡菜滤液中含有乳酸菌，可作为实验材料分离纯化乳酸菌.回答下列问题:

(1)泡菜腌制一段时间后，泡菜坛中的盐水和蔬菜逐渐变酸，原因是________________________________________。腌制过程中，要注意控制腌制的__________________等条件，以防止亚硝酸盐的含量过高。

(2)分离纯化乳酸菌时，需要用无菌水对泡菜滤液进行梯度稀释，这样做的目的是______________________________________________________________________________。接种泡菜菌液的全过程都应在______________________附近进行。

(3)固体培养基会因加入适量碳酸钙后而不透明，但乳酸能溶解培养基中的碳酸钙。纯化乳酸菌时应该挑取生长在平板_______(选填“表面”或“中下层”)且周围出现_________的菌落进一步分离。

[生物·选修1：生物技术实践]

微生物的培养在生物科学史和现代生物工程中都是极其重要的基础技术。下图1是某学生重复艾弗里证明DNA是遗传物质实验的其中一组实验；下图2是基因工程中运用影印法将培养基A上的菌落按原来方向印在培养基B上，以检测重组质粒是否导入大肠杆菌的示意图，请据图回答下列问题。

（1）图1、图2的培养结果显示，两实验中使用的都是         （填物理状态）培养基

     ①酒精灯 ②接种环  ③高压蒸汽灭菌锅  ④培养皿

（3）培养基灭菌是避免杂菌污染的有效途径之一。适用于图1、图2所示培养基的灭菌方法是                        ；接种前还需检测灭菌效果。方法是将                   置于恒温箱中，在适宜温度下培养一段时间，观察培养基上是否有菌落产生。

（4）实验证明，上述两项实验中R型菌和大肠杆菌的转化率都很低。为获得图1、图2所示的培养结果，一是要设法提高图1中S型菌的                                ；二是要使用恰当的方法接种。两实验都不能用平板划线法和稀释涂布平板法接种，而应采用不加稀释的涂布平板发接种R型菌和大肠杆菌，理由是                                     。接种培养4天后，可通过观察             的形态特征来识别R型菌和大肠杆菌。

一、[生物——选修1：生物技术实践]

大肠杆菌是寄生于人和动物肠道中的细菌，其代谢产物能与染料伊红美蓝反应，使菌落呈黑色。下面是其培养基配方：

回答下列问题：

（1）该培养中，蛋白胨为大肠杆菌提供的主要营养有________和维生素。从物理性质来看，该培养基属于________培养基。

（2）对该培养基进行灭菌时，可采用________法。在接种大肠杆菌前，需先将灭菌后的空白培养基放在恒温箱中培养一段时间，观察是否有菌落生成，其目的是________。

（3）为检测严重污染水体中大肠杆菌数量，将水样适当稀释后，取样涂布在上述平板培养基中，应选择颜色为________的菌落进行计数。该方法是通过统计平板上的菌落数来推测样品中的活菌数，其原理是________。

二、[生物——选修3：现代生物科技专题]  

据报道，尽管存在巨大争议，世界上首例“三亲婴儿”仍然于2016年4月在墨西哥诞生。三亲婴儿的培育技术路线如下。

回答下列问题：

（1）三亲婴儿培育技术中，过程A使用的技术是________；在体外受精前需对精子进行________处理；由“受精卵→三亲婴儿”过程中，需用到的胚胎工程技术有早期胚胎培养和________。

（2）利用三亲婴儿培育技术可以避免三亲中________（填“捐献者”、“母亲”或“父亲”）中的________（填“常染色体上”、“性染色体上”或“线粒体中”）的基因缺陷传给孩子。

（3）三亲婴儿与体细胞克隆动物多利羊在遗传物质来源上的主要区别是________。

[生物——选修1：生物技术实践]

[生物——选修l：生物技术实践]

研究人员从土壤中筛选获得能降解苯酚的细菌菌株，以降解工业废水中的苯酚，其主要步骤如图所示。请回答下列问题：

(1)图②中培养目的菌株的培养基中应以________为唯一碳源，从功能上讲，该培养基属于________培养基。若要测定②中活细菌数量，应采用的接种方法是__________。在显微镜下用血细胞计数板直接计数所得到的细菌数目往往比实际活菌数目偏大，原因是______________________。

(2)若要长期保存目的菌，不采用图中⑦的保存方法，而用__________的方法。实验结束后，使用过的培养基应该进行________处理后才能倒掉。

(3)在接种到图中⑥之前，随机取若干灭菌后的空白平板先培养一段时间，这样做的目的是______________。

【生物—选修1：生物技术实践】

请回答下列有关微生物培养的问题：

（1）具有耐高糖和耐酸特性的酵母菌是理想的酒精发酵菌种，为了获得耐高糖、耐酸特性的酵母菌菌种，可以对野生酵母菌菌种进行诱变处理，然后在__________（培养基的物理状态）培养基上进行培养，该培养基要在基本培养基上额外添加______________________。

（2）若要用酿造果酒的装置酿造果醋，需要改变的环境条件是                      。

（3）分析下面培养基的配方：NaNO₃、KH₂PO₄、NaH₂PO₄、MgSO₄·7H₂O、KCl、H₂O。若用于培养纤维素分解菌，应加入____________，为检验纤维素分解菌的存在与否，还应加入__________。

（4）安徽怀远盛产石榴，石榴酒也是当地的特产。利用石榴发酵制作石榴酒的过程中，发酵装置内加入石榴汁后要留出约1/3的空间，目的是____________________________。

（5）筛选乳酸菌时可选用平板划线法或______________________接种，培养基中的尿素可为乳酸菌生长提供__________。

[生物—选修3：现代生物科技专题]

略

【生物——选修1：生物技术实践】

科研人员以秸秆为原料进行酒精的制备，大致流程如图所示。回答下列问题：

（1）对采集的土样进行稀释的目的是         。有时需要在梯度稀释前进行选择培养，其目的是                     。

（2）常用的微生物接种方法有平板划线法和           。用分离得到的纤维素分解菌培养液进行数量测定，在稀释倍数为10⁵对应的培养基中测定平板上菌落数的平均值为26，则每毫升样品中的纤维素分解菌个数是（接种液的体积为0.2mL）        。

（3）经过③的培养，可以得到多种纤维素分解菌，应该在鉴别培养基上选取         的菌落进行扩大培养，从中提取的纤维素酶活性高。

（4）经⑤、⑥步骤后得到的糖液中的糖是             ，⑦过程常用的微生物是           

        ，⑦过程的气体条件是                    。

【生物——选修模块1：生物技术实践】

我国规定每升饮用水中大肠杆菌不能超过3个。某兴趣小组尝试对某品牌饮用水的大肠杆落含量进行检测，操作简图如图甲，伊红美蓝培养基配方如图乙。

回答下列相关问题：

（1）图甲中滤膜的孔径应________（“大于”或“小于”）大肠杆菌。受此启发，对某些不耐高温的试剂可以怎样除菌？________。

（2）配制图乙中的基础培养基时，除了水分、无机盐以外，还应加入________（一种营养成分），以及________。伊红美蓝培养基上生长的大肠杆菌菌落呈现黑色，从功能上划分，该培养基属于________培养基。

（3）该小组通过统计________的数目，计算出单位体积样品中大肠杆菌数目。理论上他们的统计值要比实际________（“偏高”或“偏低”），理由是________。