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            • 1. 创卫”是创建卫生城市的简称。“卫生城市”是一个城市综合功能和文明程度的重要标志。某同学欲利用所学习的微生物培养知识,通过实验证明痰液中含有细菌,来倡导同学们不要随地吐痰,为“创卫”添一份力。请回答下列问题:

              (1)欲培养细菌必须先制备可供细菌生长的培养基。实验室中常用牛肉膏蛋白胨固体培养基来培养微生物,该培养基的组成成分包括牛肉膏、蛋白胨、NaCl________、H2O等;该培养基中微生物所需的氮源来自________,制备该培养基的步骤是:计算→称量→溶化→灭菌→倒平板,其中灭菌常用的方法是_______________________________________________;培养基灭菌后,需要冷却到________ ℃左右才能倒平板,等平板冷凝后,还需要将平板倒置,主要目的是___________________________________________________________________________。

              (2)为了使实验更有说服力,某同学设置空白对照组和若干实验组,其中对照组的作用是____________________________________________________。若在某次调查中,某一实验组平板上的平均菌落数为39个,而空白对照组的平板上出现了9个菌落,这种结果说明在此次调查中出现了________现象。

              (3)某同学利用稀释涂布平板法来统计样品中细菌的数目,统计结果往往比实际细菌的数目要低,主要原因是:_________________________________。

            • 2. 长木蜂有在蜂巢内储存蜂粮(主要是长木蜂咀嚼过的花粉)的习性,其储存的蜂粮在蜂室中能长期保存不变质。研究人员为筛选出蜂粮中具有抑菌作用的微生物,开展实验如下:
              (1)配置培养基。称取适量的牛肉膏、蛋白胨、NaCl等营养物质,再加入                    和适量的水,配置牛肉膏蛋白胨培养基,其中可提供碳源的有                 。另配置适于乳酸菌生长的MRS培养基。
              (2)系列稀释操作。将一批盛有9mL水的试管作               处理:从三个蜂巢采集 蜂粮各lg,分别加入含有9mL水的试管中混匀,再进行梯度稀释处理。在此过程中,为使菌液与水混合均匀,可将移液管上的橡皮头(洗耳球)                           ;移液管不能重复使用的原因除了需要避免混合上一个稀释浓度的残留液会使稀释不准确外,还有原因是                 

              (3)涂布、培养和计数。将各稀释浓度的试管,分别吸取O.lmL,在两种培养 基上涂布均匀,并在适宜条件下培养。根据菌落的                   (至少写出三项) 等特征初步判断微生物的种类。若在牛肉膏蛋白胨培养基上最多发现有51种微生物生长,在MRS培养基上最多有17种微生物生长,则实际蜂粮中的微生物种类                  (填“可能”或“不可能”)大于68种。

            • 3.

              .请回答下列与大肠杆菌有关的问题。

              (1)从生态系统的成分上看,大肠杆菌属于____它的同化作用类型是____。

              (2)下表是某公司研发的一种培养大肠杆菌菌群的培养基配方。

              成分

              含量

              蛋白胨

              10.0g

              乳糖

              5.0g

              蔗糖

              5.0g

              K2HPO4

              2.0g

              显色剂

              0.2g

              琼脂

              12.0g

              将上述物质溶解后,用蒸馏水定容到1000ml

              根据用途划分该培养基属于______ (选择、鉴别)培养基。该培养基中的碳源是_____。

              (3)在微生物培养操作过程中,为防止杂菌污染,需对培养基和培养皿进行____ (消毒、灭菌)操作者的双手需要进行清洗和_______。静止空气中的细茵可用紫外线杀灭,其原因是紫外线能使蛋白质变性,还能_______。培养大肠杆菌时,常用的接种方法是平板划线法和__________________。通常,对获得的纯菌种还可以依据菌落的形状、大小等菌落特征对细菌进行初步的________。培养大肠杆菌时,在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固体培弃基应采用的检测方法是______________ 。若用大肠杆菌进行实验,使用过的培养基及其培养物必须经过____________处理后才能丢弃,以防止培养物的扩散。

              (4)以下微生物发酵生产特定产物时,所利用主要微生物的细胞结构与大肠杆菌相同的是________

              A、制作果酒     B、由果酒制作果醋    C、制作泡菜    D、制作腐乳

              (5)利用培养基不仅可以分离培养微生物,也可以进行植物组织培养。在植物组织培养的过程中,也要对外植体等进行一系列的消毒、灭菌,并且要求无菌操作,原因是_________

            • 4. 高温淀粉酶在大规模工业生产中有很大的实用性。研究者从赤峰市克旗热泉(出口水温达87℃)中筛选了高效产生高温淀粉酶的嗜热菌,其筛选过程如图所示。请回答下列问题:


              (1)Ⅰ号培养基中应加入     ,以便挑选出能产生高温淀粉酶的嗜热菌。从Ⅰ号培养基中挑选     菌落接种到Ⅱ号培养基中。

              (2)②过程所使用的接种方法是      。如果不经过①过程,直接将采集的样品进行接种培养,可能出现的结果是      

              (3)Ⅰ、Ⅱ号培养基中接种菌种后,应该置于     的恒温培养箱中培养,培养皿要倒置的原因是     

              (4)在高温淀粉酶运用到工业生产前,需对该酶的最佳温度范围进行测定。下图中的曲线①表示酶在各种温度下酶活性相对最高酶活性的百分比。将酶在不同温度下保温足够长的时间,再在酶活性最高的温度下测其残余酶活性,由此得到的数据为酶的热稳定性数据,如曲线②。根据实验结果分析:80℃并不是该酶使用的最佳温度,原因      。曲线②35℃数据点是在     ℃时测得的。

            • 5.

              (每空1分,共7分)某化工厂的污水池中含有一种有害的难以降解的有机化合物A。研究人员用化合物A、磷酸盐、镁盐以及微量元素配制的培养基,成功筛选到能高效降解化合物A的细菌(目的菌)。实验的部分步骤如下图所示。请回答下列问题:

              (1)培养基中的化合物A能为目的菌的生长繁殖提供________,筛选过程中所用的培养基的常用灭菌方法是________。

              (2)实验中“重复多次”的目的是________,为了达到分离纯化目的菌的目的,在固体培养基上接种的方法可以是________。

              (3)实验过程中振荡培养,“振荡”的目的是________。

              (4)实验结束后,使用过的培养基应该进行灭菌后才能倒掉,目的是________。

              (5)某同学计划统计污水池中“目的菌”的数目,需要设计________作为对照组,此对照组的目的是证明培养基是否被污染。

            • 6. 胡萝卜素是一种常用的食用色素,可分别从胡萝卜或产胡萝卜素的微生物菌体中提取获得,流程如下:

              (1)筛选产胡萝卜素的酵母菌R时,可选用______________或平板划线法接种。采用平板划线法接种时需先灼烧接种环,其目的是______________________。

              (2)培养酵母菌R时,培养基中的蔗糖和硝酸盐可分别为酵母菌R的生长提供________和________。

              (3)从胡萝卜中提取胡萝卜素时,干燥过程应控制好温度和________以防止胡萝卜素分解;萃取过程中宜采用________方式加热以防止温度过高;萃取液浓缩前需进行过滤,其目的是__________________。

              (4)纸层析法可用于鉴定所提取的胡萝卜素。鉴定过程中需用胡萝卜素标准品作为____________。

            • 7.


              一种广泛使用的除草剂(含氮有机物)在土壤中不易被降解,长期使用可污染土壤。为修复被该除草剂污染的土壤,可按下面程序选育能降解该除草剂的细菌(已知该除草剂在水中溶解度低,含一定量该除草剂的培养基不透明)。

              (1)制备土壤浸出液时,为避免菌体浓度过高,需将浸出液进行稀释处理。现有一升土壤浸出液,用无菌吸管吸取1mL液样至盛有9mL无菌水的试管中,依次稀释103稀释度.各取0.1mL已稀释103倍的水样分别接种到三个培养基上培养,记录的菌落数分别为55、56、57,则每升原土壤浸出液样中菌体数为 ______
              (2)要从长期使用该除草剂的土壤中分离目的菌,从用途方面来看,上述培养皿中培养基的特点是 ______
              (3)接种技术的核心是 ______ .在划线接种时,连续划线的目的是将聚集的菌种逐步 ______ ,培养时,只有很少菌落出现,大部分细菌在此培养基上不能生长的主要原因是 ______ 或有氧条件抑制了这些细菌的生长.
              (4)在培养基上形成的菌落中,无透明圈菌落利用的氮源主要是 ______ ,有透明圈菌落利用的氮源主要是 ______ ,据此可筛选出目的菌.实验结果如图显示的A~E五种菌株中, ______ 是最理想菌株.

            • 8. 幽门螺杆菌(Hp)感染是急慢性胃炎和消化道溃疡的主要致病因素,在患者体内采集样本并制成菌液后,进行分离培养。实验基本步骤如下:请回答:

              (1)在生物学中,将允许特定种类的微生物生长,同时抑制或阻止其他种类微生物生物的培养基,称做________。

              (2)配制培养基时,要加入尿素和________指示剂,这是因为Hp含有________,它能以尿素作为________源;若有Hp,则菌落周围会出现________色环带。

              (3)步骤X表示________。在无菌条件下操作时,先将菌液稀释,然后将菌液________到培养基平面上。菌液稀释的目的是为了获得________菌落。

              (4)临床上用14C呼气试验检测人体是否感染Hp,其基本原理是Hp能将14C标记的________分解为NH314CO2

            • 9.

              羧甲基纤维素钠(CMC)是常用的食品添加剂,不能被人体消化吸收,因此通常被认为是安全的食品添加剂.研究者用含1.0%CMC无菌水作为饮用水,连续饲喂实验小鼠12周,测定小鼠体重,结果如图1、图2所示.

              (1)图1所示实验中的对照处理是 ______ .图1结果显示,食用CMC能够 ______ .综合图1、图2结果,通过比较 ______ ,说明CMC的这种作用依赖于小鼠消化道内的各种微生物.
              (2)有人提出:小鼠摄入的CMC改变了其肠道内各种微生物的比例.为检验上述推测,研究者设计了如下实验:
              ①搜集 ______ (填图中分组编号)小鼠粪便制成悬浮液涂布于 ______ 上(填下列选项前的序号).
              a.以CMC为碳源的液体培养基   b.全营养液体培养基
              c.以CMC为碳源的固体培养基         d.全营养固体培养基
              ②接种后置于 ______ (填“无氧”或“有氧”)条件下培养,通过观察 ______ 以初步鉴定小鼠消化道中的微生物类群.
              ③统计比较 ______ ,以确定推测是否成立.
              (3)为进一步研究“小鼠体重变化是否由CMC引起的小鼠消化道内各种微生物比例改变所致”,研究者设计了粪便移植实验,并检测了被移植小鼠体重的变化.请将下列选项填入下表中(选填选项前的符号),完成实验方案.

              a.普通小鼠                    b.无菌小鼠
              c.饲喂含CMC无菌水12周的普通小鼠   d.饲喂无菌水12周的普通小鼠
              e.含1.0%CMC的无菌水           f.无菌水(不含CMC)

            • 10. 每年到了夏收和秋收季节后,农民都对农作物秸秆的处理犯愁,焚烧会导致环境污染,直接埋进地里,一时对以降解,影响下一季农作物的播种,请你结合自己学习的知识,回答下列问题.
              (1)农田生态系统是人工建立的生态系统,由于______,所以抵抗力稳定性小于森林生态系统.
              (2)某同学提出了如图所示的解决秸秆问题的方案:
              从生态系统能量流动的实践意义角度分析该方案实现了______;从环境保护角度分析具有______意义.
              (3)若将大量培养的纤维素分解菌与粉碎的秸秆搅拌混匀后施到土壤中,可以增加秸秆降解速度,从土壤中筛选分离出纤维素分解菌最好选择______土壤取样,无菌条件下加入含选择培养基的锥形瓶中,将锥形瓶固定在______上,一定温度下培养1~2d,直至培养变浑浊,为了鉴别纤维素分解菌和进一步纯化菌种,可以在鉴别培养基上加入______染液,将筛选获得的菌液稀释后用______方法接种到鉴别培养基上,然后挑选产生______的菌落作为菌种进行扩大培养.
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