2．
纤维素分子不能进入酵母细胞．为了使酵母菌能够利用环境中的纤维素为原料生产酒精，构建了含3种不同基因片段的重组质粒，下面是酵母菌转化及纤维素酶在工程菌内合成与运输的示意图．
（1）本研究构建重组质粒时选用四种限制酶．其识别序列如下图，为防止酶切片段的自身环接，可选用的限制酶组合是__________或___________．
A．①②
B．①③
C．②④
D．③④
（2）设置菌株Ⅰ为对照，是为了验证_________________不携带纤维素酶基因．
（3）纤维素酶基因的表达包括__________和___________过程，与菌株Ⅱ相比，在菌株Ⅲ、Ⅳ中参与纤维素酶合成和分泌的细胞器还有__________
（4）在以纤维素为唯一C源的培养基上分别培养菌株Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ，菌株__________不能存活，原因是____________________________．
（5）酵母菌生产酒精的细胞部位是_______________,产生酒精时细胞的呼吸方式是________________．在利用纤维素生产酒精时,菌株Ⅳ更具有优势，因为导入的中重组质粒含有_________，使分泌的纤维素酶固定于细胞壁，减少因培养液更新而造成的酶的流失，提高酶的利用率．