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            • 1． 回答下列有关微生物和酶工程的问题．
              枯草芽孢杆菌盛产蛋白酶，后者在生物医药和日用化工等生产领域具有重要的经济价值，且已大规模产业化应用．
              （1）在培养包括枯草芽孢杆菌在内的异养型微生物时，培养基营养成分应包括水和    （用序号组合回答）．
              ①淀粉  ②蛋白质   ③生长因子  ④葡萄糖   ⑤无机盐
              为筛选枯草芽孢杆菌的蛋白酶高产株，将分别浸过不同菌株（a～e）的分泌物提取液及无菌水（f） 的无菌圆纸片置于含某种高浓度蛋白质的平板培养基表面；在37℃恒温箱中放置2～3天，结果如图1．

              （2）大规模产业化首选的菌株是    ；菌株b提取物周围没有形成明显清晰区的原因是    ．
              图2显示枯草芽孢杆菌的蛋白酶和其它酶的热稳定性数据，即酶在不同温度下保温足够长的时间，再在酶活性最高的温度下测其酶活性．在该蛋白酶的工业化生产过程中，通常需对发酵液在60～70℃保温一定时间，再制备酶制剂．
              （3）在60～70℃保温一定时间的作用是    ．
              A．诱导蛋白酶的热稳定性
              B．有利于发挥蛋白酶的最佳活性
              C．裂解枯草芽孢杆菌细胞
              D．大幅度降低发酵液中其他酶的活性
              （4）枯草芽孢杆菌蛋白酶制备的合理工艺步骤应为    （选择正确的序号并排序）．
              ①过滤   ②干燥   ③破碎   ④浓缩．
              难度：中等
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            • 2． （2016•南昌校级二模）在工业上常利用微生物将木屑、废纸（主要成分为木质纤维）转化为生物乙醇．基本流程如图所示，请据图回答：
              （1）微生物筛选常用的接种方法是    和    ．筛选微生物X菌种的培养基中，应以    为唯一碳源，在培养基中加入    ，并根据水解圈的大小来筛选微生物X．
              （2）从微生物X中提取的纤维素酶液可通过    法进一步纯化，判断纯化的蛋白质是否达到要求，可用    法对样品进行纯度鉴定．若想使该酶液能反复利用，常采用    的方法进行固定．
              （3）微生物Y是    ．在生产生物乙醇的工艺中常对其进行固定化，采用的方法是    ．在酸性条件下，可用    来检测发酵产物中是否含有酒精．
              难度：中等
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            • 3． （2016•海南）回答下列问题：
              （1）蛋白酶甲、乙、丙三者的活性随pH的变化如图所示．通常，用清水洗涤衣服上的新鲜血迹是，不应该使用开水，原因是    ．若要去除衣服上的血渍，应选择含有    （填“蛋白酶甲”、“蛋白酶乙”或“蛋白酶丙”）的碱性洗衣粉，理由是    ．
              （2）某同学为了洗去衣服上的油渍，洗衣时在市售的蛋白酶洗衣液中添加脂肪酶，该同学的做法    （填“合理”或“不合理”），理由是    ．
              （3）已知溶液的pH可以影响酶的活性，请推测pH影响某种蛋白酶活性的原因可能是其影响了酶和底物分子中    （填“羧基和氨基”、“氨基和甲基”、“羧基和甲基”或“甲基和甲基”）等基团的解离状态．
              难度：中等
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            • 4． 洗衣粉是生活的必需用品，某实验小组为探究洗衣粉加酶后的洗涤效果，将一种无酶洗衣粉分成3等份，进行3组实验．甲、乙组在洗衣粉中加入1种或2种酶，丙组不加酶，在不同温度下清洗同种化纤布上的2种污渍，其他实验条件均相同，如表为实验记录．请回答下列问题．
              温度/℃1020304050
              组别甲乙丙甲乙丙甲乙丙甲乙丙甲乙丙
              清除血渍时间/min67668852518336347711126891167
              清除油渍时间/min93789587639182468575277769868
              （1）本实验的自变量是    和    ．
              （2）提高洗衣粉去污能力的方法有    ．甲组在洗衣粉中加入了    ；乙组在洗衣粉中加了    ．甲、乙组洗涤效果的差异，说明酶的作用具有    ．
              （3）如果甲、乙和丙3组均在水温为80℃时洗涤同一种污渍，请比较这3组洗涤效果之间有无差异    ，理由是    ．
              （4）添加蛋白酶的加酶洗衣粉不适宜洗涤下列哪些衣料    
              ①棉织品  ②毛织品   ③腈纶织品   ④蚕丝织品  ⑤涤纶织品  ⑥锦纶织品
              （5）酶所催化的化学反应一般是在     条件下进行的．
              难度：中等
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            • 5． 果胶是由    聚合而成的一种高分子化合物，不溶于水．在果胶酶的作用下，可以被分解成    ，果胶酶是分解果胶的一类酶，它包括    、     和果胶酯酶，果胶酶的化学本质是    ．
              难度：较易
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            • 6． （2016•成都校级二模）根据现代生物技术的相关知识，回答下列问题：
              （1）我们在用苹果泥作原料探究果胶酶催化反应的最适条件和最适用量时，通过来确定最适值的思想方法是不变的．此类实验的观测指标可以是    ．用葡萄制做的果酒酒味纯正，放置一段时间后，发现果酒带有明显的酸味，原因是密封不严，醋酸菌进行有氧呼吸，将果酒转变成果醋．果酒发酵结束后，为方便后续使用，可将菌液转移到甘油中，与之充分混匀后，放在    ℃的冷冻箱中保存．
              （2）对分离的能分解尿素的细菌进行鉴定，在以尿素为唯一氮源的培养基中加入    ，培养后如果PH升高，指示剂将变红，因为细菌合成的    将尿素分解成氨，使培养基碱性增强．
              （3）已知某样品中存在甲、乙、丙、丁、戊五种蛋白质分子，其分子大小、所带电荷的性质和数量情况如图所示．
              ①将样品装入透析袋中透析12h，若分子乙保留在袋内，则分子    也保留在袋内．
              ②若用凝胶色谱柱分离样品中的蛋白质，则分子    移动速度最快．
              ③若将样品以2 000r/min的速度离心10min，分子戊存在于沉淀中，则分子    可能不存在于沉淀中．
              （4）提取胡萝卜素常用有机溶剂萃取的方法，萃取的效率主要取决于    ，同时还受到原料颗粒的大小、紧密程度、含水量、萃取的温度和时间等条件的影响．将提取的胡萝卜素粗品用    法进行鉴定，鉴定过程中需用    作为对照．
              难度：中等
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            • 7． 为获得果胶酶高产菌株，科研人员进行了下列分离、筛选、鉴定工作．
              （1）为分离果胶酶产生菌，科研人员配制了下表所示成分的培养基，该表空白处的两种成分是    ．制备的培养基常用    法进行灭菌．
              K2HPO4MgSO4NaNO3FeSO4琼脂
              0.1g0.5g3g0.01g2g15g加至1L
              （2）科研人员将采集的果园土壤放入无菌水中，震荡混匀，制成悬液．为获得较均匀分布的单菌落，还需要将悬液进行    ，用    法接种于固体培养基上．接种后的培养基    状态放人培养箱．
              （3）选择单菌落数目适宜的培养基，加入一定浓度的刚果红溶液（果胶与刚果红结合后显红色），一段时间后洗去培养基表面的刚果红溶液，观察并比较菌落    直径的比值，筛选果胶酶高产菌株．
              （4）将获得的菌株进行液体培养后，从培养液的    （填“上清液”或“沉淀物”）获得粗提的果胶酶．将一定量的粗提果胶酶与适量果胶溶液混合，一定时间后测定吸光值来测定酶活性．进行吸光值测定时，需将    与等量果胶溶液混合，作为实验的对照．
              难度：中等
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            • 8． 请阅读下列材料并回答有关问题：
              猪饲料中的磷元素有相当一部分存在于植酸中，猪由于缺乏有关酶，造成磷源浪费，而且植酸随粪便排出后易造成环境有机磷污染．如图为对植酸酶进行不同处理时其活性与温度的关系．
              （1）生产中从土壤中筛选出产酶菌株，土壤悬液首先经80℃处理15分钟，其目的是筛选出    ．
              （2）在产酶菌株的筛选过程中，固体培养基中的添加不溶于水的植酸钙，植酸钙被植酸酶分解后可以培养上产生透明圈，可根据透明圈的    选择目的菌株．
              （3）所得菌株还需要进一步测定植酸酶的活性，活性的测定可以用    作为底物，活性可用    表示．
              （4）在生产中    （填“未固定”或“固定化”）植酸酶更适于添加到猪饲料中，使用的最适温度为    ℃．
              难度：中等
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